二硫代甲酸衍生物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了二硫代甲酸衍生物及其制备方法和应用。本发明专利技术合成了新型的二硫代甲酸衍生物，其具有新的生物学特性：(1)可抑制肝癌、结肠癌、卵巢癌细胞的生长，具有较小的半数抑制浓度；(2)在很低浓度即可抑制血管形成，并抑制癌细胞转移。(3)细胞毒性与诱导凋亡、周期阻滞及自噬有关。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医药技术，具体涉及二硫代甲酸衍生物及其制备方法和应用。
技术介绍
癌症是严重影响人类生活质量和生存的重大疾病之一，90％以上病人不是死于原位癌而是死于癌转移。在癌细胞浸润转移时，癌旁的血管形成为肿瘤细胞生长提了条件，肿瘤细胞的生长需要有血管形成，而血管的增生亦为肿瘤转移提供了条件。所以血管形成是肿瘤治疗的重要靶点。同时，在正常的成人中，除了创伤愈合及生殖周期外，几乎所有的新生血管形成都是病理性的，如肿瘤、风湿性关节炎及糖尿病眼底病变等。故选择这一靶点也是更安全、毒副作用更小的治疗方法，所以开发有效的血管形成药物是抑制癌转移重要途径之一。不同化合物抑制血管形成已有不少国内专利(中国专利：2011100042161；028121252；2011100042176；CN101011380A)。二硫代甲酸衍生物由于良好的生物活性备受药物工作者青睐，如吡咯二硫代甲酸酯可抑制核因子(NF-kB)，并抑制癌细胞侵袭转移及血管形成,50微摩完全抑制血管形成。其他衍生物如二硫代甲酸氨基甲酸酯能够上调包括血管细胞粘附分子。但有关二吡啶酮腙二硫代甲酸丙酸酯对肿瘤及血管形成的抑制作用未有报道。
技术实现思路
本专利技术合成了新型的吡啶(醛、酮)腙二硫代甲酸丙酸酯，其具有新的生物学特性：(1)可抑制肝癌、结肠癌、卵巢癌细胞的生长，具有较小的半数抑制浓度；(2)在很低浓度即可抑制血管形成，并抑制癌细胞转移。(3)细胞毒性与诱导凋亡、周期阻滞及自噬有关。本专利技术的技术方案是：二硫代甲酸衍生物的制备方法，其合成路线如下式所示，所述二硫代甲酸衍生物是吡啶醛腙二硫代甲酸丙酸酯或吡啶酮腙二硫代甲酸丙酸酯。本专利技术的进一步改进包括：所述的方法，其具体过程包括：取1mmol的KOH置于圆底烧瓶，用体积比为5:1的乙醇-水混合物溶解放置在冰水浴，向其中加入80％的水合肼1mmol,在0-5的低温环境中15分钟，之后向圆底烧瓶中逐滴加入1mmol二硫化碳；继续反应30分钟，随后加入3ml溶解有1mmol二吡啶酮或吡啶醛的无水乙醇溶液和一滴冰乙酸，回流1.5小时，浓缩，冷却，得到红棕色的粉末，即得二吡啶酮腙二硫代甲酸钾，将所得的0.5mmol二吡啶酮腙或吡啶醛腙二硫代甲酸钾溶于5ml乙醇与0.5mmol3-溴代丙酸室温反应1小时，过滤并用冷乙醇洗涤得黄色的二吡啶酮腙或吡啶醛腙二硫代甲酸丙酸酯固体，经硅胶柱(乙酸乙酯/石油醚＝3:1)层析纯化。本专利技术还提供了一种按照上述方法制得二硫代甲酸衍生物。本专利技术进一步提供了吡啶醛腙二硫代甲酸丙酸酯或吡啶酮腙二硫代甲酸丙酸酯在制备抗肿瘤药物中的应用。本专利技术还提供了吡啶醛腙二硫代甲酸丙酸酯或吡啶酮腙二硫代甲酸丙酸酯在制备抑制血管形成药物中的应用。附图说明图1二吡啶酮腙二硫代甲酸丙酸酯对肝癌细胞的生长抑制作用图2二吡啶酮腙二硫代甲酸丙酯对HUVEC细胞的生长抑制作用图3a是对照组。图3b是0.2μM二吡啶酮腙二硫代甲酸丙酸酯对HUVEC细胞形成圆环的抑制作用。图3c是0.39μM吡啶酮腙二硫代甲酸丙酸酯对HUVEC细胞形成圆环的抑制作用。图4是二吡啶酮腙二硫代甲酸丙酸酯诱导ROS作用。图5是WesternBlotting分析二吡啶酮腙二硫代甲酸丙酸酯细胞处理后，凋亡相关蛋白的变化。具体实施方式下面结合附图对本专利技术做详细说明。实例一，二吡啶酮腙二硫代甲酸丙酸酯的制备1、本专利技术实施例中使用的试剂如下：无水乙醇(天津市德恩化学试剂有限公司)，溴丙酸(萨恩化学技术(上海)有限公司)，KOH(天津市德恩化学试剂有限公司)，80％水合肼(天津市天力化学试剂有限公司)，二硫化碳(天津市天力化学试剂有限公司)，二吡啶酮(Sigma)，。2、2-二吡啶酮腙二硫代甲酸丙酸酯的制备合成方法取1mmol的KOH(56.1mg)置于圆底烧瓶，用乙醇-水混合物(5:1)溶解放置在冰水浴，向其中加入80％的水合肼1mmol(50.1mg),在0-5的低温环境中15分钟之后向圆底烧瓶中逐滴加入1mmol(76.2mg)二硫化碳。继续反应30分钟。随后加入3ml溶解有1mmol二吡啶酮的无水乙醇溶液和一滴冰乙酸，回流1.5小时，浓缩，冷却，得到红棕色的粉末，即得二吡啶酮腙二硫代甲酸钾。产率：80％，熔点：mp:140.5℃.NMR(D6-DMSO):13.35(s,NH),8.85(d,H,J＝4Hz),8.63(d,H,J＝4Hz),8.03(m,2H,J＝8Hz),7.95(d,H,J＝8Hz),7.63(dd,H,J＝4Hz),7.59(d,H,J＝8Hz),7.54(dd,H,J＝4Hz).IR(KBr压片,cm-1):3430,1624,1587,1519,1461,1430,1217,1187,1133,1051,1012,992,800,753,731,712,648,618,590.ESI-MS(m/z):350.9540(M-H+2K,calcd:350.9525).将所得的二吡啶腙二硫代甲酸钾(0.5mmol)溶于5ml乙醇与0.5mmol3-溴代丙酸室温反应1小时，过滤并用冷乙醇洗涤得黄色的二吡啶酮腙二硫代甲酸丙酸酯固体。产率(90％)，熔点155℃.1HNMR(Bruker,D6-DMSO):15.0(s,NH),8.85(d,H,J＝4Hz),8.63(d,H,J＝4Hz),8.03(m,2H,J＝8Hz),7.95(d,H,J＝8Hz),7.63(dd,H,J＝4Hz),7.59(d,H,J＝8Hz),7.54(dd,H,J＝4Hz),3.43(tri,2H,J＝8Hz),2.71(tri,H,J＝8Hz).IR(cm-1):IR(KBr,cm-1):3404,1701,1587,1458,1356,1329,1288,1234,1207,1133,1061,1034,1014,803,753,701,654,593.ESI-MS(microTOF-QIII,Bruker):m/z:385.0203(M+K,calcd:385.01954).实例二，抗肿瘤活性实验1、试剂及检测仪器：MTT(Sigma)，胰酶(北京拜尔迪生物技术有限公司)。培养基(北京索莱宝生物技术有限公司)，血清(浙江天杭生物科技有限公司)，DMSO(天津市德恩化学试剂有限公司)。酶标仪(TheromoScientific)2、MTT法评估目标化合物的抗肿瘤活性以HepG2(肝癌)、Bel-7402(肝癌)细胞为测试细胞株，选用对数生长期的贴壁肿瘤细胞，经胰酶消化后，用10％胎牛血清的RPMI1640培养基配成5×103个/ml的细胞悬液，接种到96孔培养板，每孔接种100微升，37，5％CO2培养24小时。设立阴性对照组、阳性对照组及实验组。细胞贴壁后实验组更换新的含有不同浓度被测样品的培养基。阳性组对照给予顺铂，阴性对照组则换为含有等体积溶剂的培养基。每组设三个复孔，37，5％CO2培养48小时。弃去上清液，每孔加入10微升新鲜配制的10mg/mlMTT的无血清培养基。37继续培养4小时。小心弃上清，并加入100微升DMSO，在平板震荡器震荡均匀后，在酶标仪上测定每孔在570纳米的吸光度(OD)值。按下列公式计算药物对肿瘤细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】
二硫代甲酸衍生物的制备方法，其特征在于，其合成路线如下式所示，所述二硫代甲酸衍生物是吡啶醛腙二硫代甲酸丙酸酯或吡啶酮腙二硫代甲酸丙酸酯。

【技术特征摘要】
1.二硫代甲酸衍生物的制备方法，其特征在于，其合成路线如下式所示，所述二硫代甲酸衍生物是吡啶醛腙二硫代甲酸丙酸酯或吡啶酮腙二硫代甲酸丙酸酯。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，其具体过程包括：取1mmol的KOH置于圆底烧瓶，用体积比为5:1的乙醇-水混合物溶解放置在冰水浴，向其中加入80％的水合肼1mmol，在0-5的低温环境中15分钟，之后向圆底烧瓶中逐滴加入1mmol二硫化碳；继续反应30分钟，随后加入3ml溶解有1mmol二吡啶酮或吡啶醛的无水乙醇溶液和一滴冰乙酸，回流1.5...

【专利技术属性】
技术研发人员：李长正，黄腾飞，李翠萍，刘友勋，付云，周素凤，王婷婷，
申请(专利权)人：新乡医学院，
类型：发明
国别省市：河南;41