本发明专利技术涉及一种面粉中糖脂含量的测定方法及其应用,该测定方法包括以下步骤:(1)采用比色法测定面粉中相应组分的总糖含量;(2)结合步骤(1)中得到的总糖含量,根据方程y1=0.0271x‑0.0288计算出双半乳糖甘油二脂的含量,其中x为总糖含量,y1为双半乳糖甘油二脂含量;结合步骤(1)中得到的总糖含量,根据方程y2=2.3567x‑1.2032计算出单半乳糖甘油二脂的含量,其中x为总糖含量,y2单半乳糖甘油二脂含量。该方法测量简便、快捷,能够准确地测定面粉或淀粉中极性糖脂含量。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于食品
,具体涉及到一种面粉中糖脂含量的测定方法及其应用。
技术介绍
植物半乳糖脂是指广泛存在于植物体内含有半乳糖残基的极性脂类。半乳糖脂广泛分布于植物界,是植物组织中最主要的糖脂成分,主要成分是单半乳糖脂和双半乳糖脂。面粉中含有0.5%-3%的脂质,其中糖脂占26.4%。而单半乳糖甘油二脂和双半乳糖甘油二脂又占糖脂的69%。面粉中极性脂类能改善面团的持气性,对增加面包体积起良好作用。脂类和碳水化合物都存在于小麦籽粒中,它们的互作对食品的烘烤品质起着重要作用。脂类影响了淀粉凝胶的流变学特性,拖延面包心纹理结构的形成,使面包膨胀时间延长。同时,在对小麦籽粒的硬度研究中发现面粉中极性脂,尤其是淀粉表面极性脂与籽粒硬度紧密相关。软质蛋白Friabilin其类脂结合区域是一个富含色氨酸结构域,和淀粉表面易于结合,从而影响小麦硬度。色氨酸区d-螺旋间形成膜固着环与淀粉表面双分子极性脂紧密结合,软麦淀粉表面束缚态极性脂(糖脂和磷脂)含量明显高于硬麦。在半乳糖脂定量分析方面,多数是先通过柱层析和薄层析(TLC)分离纯化得到半乳糖脂,然后进行甲基化酸水解,再利用气液色谱技术析脂肪酸甲酯含量,最后换算成半乳糖脂的含量。但操作繁琐,技术要求高,结果重现性差,成功率低。也有用高分辨质谱ESI-QTOF/MS来定量分析,但是这种方法所使用的仪器比较昂贵,不能大批量和大范围条件下应用。另外,也有利用半乳糖脂含有大量的多不饱和脂肪酸,在200nm波长左右处有光吸收高峰的特点,用反相高效液相色谱法(HPLC)来分析测定;这种测定方法快捷方便,但设备费用较高,限制了其应用的范围。为了快速方便的测量面粉和淀粉中的糖脂含量,也有人提出直接测定总糖含量的方法来估算其糖脂含量,但这种方法不够精确,误差较大。因此,建立一种准确、快速、且成本低的测定面粉和淀粉中糖脂含量的方法十分必要。
技术实现思路
本专利技术目的在于提供一种面粉中糖脂含量的测定方法及其应用,该方法能够快速准确地测定面粉或淀粉中极性糖脂含量。为实现以上目的,本专利技术采用的技术方案是:本专利技术提供了一种面粉中糖脂含量的测定方法,包括以下步骤:(1)采用比色法测定面粉中相应组分的总糖含量;(2)结合步骤(1)中得到的总糖含量,根据方程y1=0.0271x-0.0288计算出双半乳糖甘油二脂的含量,其中x为总糖含量,y1为双半乳糖甘油二脂含量;结合步骤(1)中得到的总糖含量,根据方程y2=2.3567x-1.2032计算出单半乳糖甘油二脂的含量,其中x为总糖含量,y2单半乳糖甘油二脂含量。上述的面粉中糖脂含量的测定方法在小麦粉中的应用,具体步骤如下:(1)先将40~80目的小麦粉加水饱和的正丁醇溶液中搅拌浸渍得到混合物a,小麦粉与水饱和的正丁醇溶液的质量比为1:(6~7),浸渍时间为1~2h;然后将混合物a于温度30~40℃下振荡浸提48~72h,接着于3000~4000rpm离心15~20min,得到黄色透明的上清液;(2)将步骤(1)得到的上清液于温度35~40℃浓缩至4~5mL,得到浓缩液b;(3)将步骤(2)得到的浓缩液b用萃取剂c进行萃取,萃取剂c是由氯仿、甲醇和水按照体积比为2:1:0.75混合配置而成,萃取后分为上相层和下相层,取下相层黄色溶液备用;(4)步骤(3)中上相层的混合液接着采用萃取剂c进行萃取分相,下相层黄色溶液,上相层的混合液接着采用萃取剂c进行萃取,重复用萃取剂c操作2~4次,合并下相层黄色溶液得到混合液d,接着使用氮气将混合液d吹干得到混合物e;(5)取1.5~2.5mL氯仿溶液洗涤混合物e,氮气吹干;(6)重复步骤(5)操作2~3次,得到物质f;(7)将步骤(6)得到的物质f溶于0.8~2mL甲醇中得到粗脂;(8)取200~500μL步骤(7)中得到的粗脂,在规格200mm*200mm的硅胶板上距离底部1~3cm处点样,在展开剂的作用下展板,展开剂是由氯仿:甲醇:冰乙酸:丙酮:水按照体积比为10:2:2:2:1配置而成;(9)在紫外灯254nm波长照射下能看到不同的斑点,在标准品的对照下,分别找出目的物单半乳糖甘油二脂和双半乳糖甘油二脂所在条带,挖下;(10)分别将目的物所在的条带置于离心管中,用10~20mL溶解液g于温度40℃下溶解5~10min,溶解液g是由氯仿与甲醇按照体积比为2:1配置而成,然后过滤,将滤液置于称重后的离心管中;(11)重复步骤(10),然后分别合并滤液;(12)将步骤(11)中得到的滤液用氮气吹干,对离心管进行称重;(13)用差量法分别计算出目的物的总重量;(14)将目的物分别溶解于1MKOH-乙醇溶液中,目的物与1MKOH-乙醇溶液的质量比为1:(1~2),接着于温度70℃保温20~30min,然后加入3~4mL1mol/L盐酸,接着于温度99℃保温15min,最后加入7.5~14mL1mol/LKOH;(15)移取2~6ml的步骤(14)得到溶液中的上清液置于不同离心管中,于温度在60~80℃下蒸干,分别用3~4ml蒸馏水洗涤,向每一个离心管中均加入3~4ml菲林试剂,于温度99℃保温10min,加入4mL硫酸-钼酸铵显色剂,分别定容至10mL;(16)将步骤(15)的溶液分别在600nm波长下测定吸光值;(17)根据步骤(16)测定的吸光值按照半乳糖标线计算不同离心管中总糖含量;(18)结合步骤(17)中得到的总糖含量,根据方程y1=0.0271x-0.0288计算出双半乳糖甘油二脂的含量,其中x为总糖含量,y1为双半乳糖甘油二脂含量;结合步骤(17)中得到的总糖含量,根据方程y2=2.3567x-1.2032计算出单半乳糖甘油二脂的含量,其中x为总糖含量,y2单半乳糖甘油二脂含量。本专利技术与与其他方法相比优点在于:本专利技术方法测量简便、快捷、准确,提供一种简便快速准确的测定糖脂含量的方法。具体实施方式实施例1一种面粉中糖脂含量的测定方法在小麦粉中的应用,具体步骤如下:(1)先将40~80目10.000g小麦品种天民198面粉加60mL水饱和的正丁醇溶液中搅拌浸渍得到混合物a,浸渍时间为1.5h;然后将混合物a于温度35℃下振荡浸提48h,接着于4000rpm离心15min,得到黄色透明的上清液;(2)将步骤(1)得到的上清液于温度35℃浓缩至5mL,得到浓缩液b;(3)将步骤(2)得到的浓缩液b用萃取剂c进行萃取,萃取剂c是由氯仿、甲醇和水按照体积比为2:1:0.75混合配置而成,萃取后分为上相层和下相层,取下相层黄色溶液备用;(4)步骤(3)中上相层的混合液接着采用萃取剂c进行萃取分相,下相层黄色溶液,上相层的混合液接着采用萃取剂c进行萃取,重复用萃取剂c操作2次,合并下相层黄色溶液得到混合液d,接着使用氮气将混合液d吹干得到混合物e;(5)取1.5mL氯仿溶液洗涤混合物e,氮气吹干;(6)重复步骤(5)操作2次,得到物质f;(7)将步骤(6)得到的物质f溶于1.6mL甲醇中得到粗脂;(8)取400μL步骤(7)中得到的粗脂,在规格200mm*200mm的硅胶板上距离底部2cm处点样,在展开剂的作用下展板,展开剂是由氯仿:甲醇:冰乙酸:丙酮:水按照体积比为10:2:2:2:1配置而成;在距离层本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种面粉中糖脂含量的测定方法,其特征在于包括以下步骤:(1)采用比色法测定面粉中的相应组分的总糖含量;(2)结合步骤(1)中得到的各组分总糖含量,根据方程y1=0.0271x‑0.0288计算出双半乳糖甘油二脂的含量,其中x为总糖含量,y1为双半乳糖甘油二脂含量;结合步骤(1)中得到的各组分总糖含量,根据方程y2=2.3567x‑1.2032计算出单半乳糖甘油二脂的含量,其中x为总糖含量,y2单半乳糖甘油二脂含量。
【技术特征摘要】
1.一种面粉中糖脂含量的测定方法,其特征在于包括以下步骤:(1)采用比色法测定面粉中的相应组分的总糖含量;(2)结合步骤(1)中得到的各组分总糖含量,根据方程y1=0.0271x-0.0288计算出双半乳糖甘油二脂的含量,其中x为总糖含量,y1为双半乳糖甘油二脂含量;结合步骤(1)中得到的各组分总糖含量,根据方程y2=2.3567x-1.2032计算出单半乳糖甘油二脂的含量,其中x为总糖含量,y2单半乳糖甘油二脂含量。2.如权利要求1中所述的面粉中糖脂含量的测定方法在小麦粉中的应用,其特征在于具体步骤如下:(1)先将40~80目的小麦粉加水饱和的正丁醇溶液中搅拌浸渍得到混合物a,小麦粉与水饱和的正丁醇溶液的质量比为1:(6~7),浸渍时间为1~2h;然后将混合物a于温度30~40℃下振荡浸提48~72h,接着于3000~4000rpm离心15~20min,得到黄色透明的上清液;(2)将步骤(1)得到的上清液于温度35~40℃浓缩至4~5mL,得到浓缩液b;(3)将步骤(2)得到的浓缩液b用萃取剂c进行萃取,萃取剂c是由氯仿、甲醇和水按照体积比为2:1:0.75混合配置而成,萃取后分为上相层和下相层,取下相层黄色溶液备用;(4)步骤(3)中上相层的混合液接着采用萃取剂c进行萃取分相,下相层黄色溶液,上相层的混合液接着采用萃取剂c进行萃取,重复用萃取剂c操作2~4次,合并下相层黄色溶液得到混合液d,接着使用氮气将混合液d吹干得到混合物e;(5)取1.5~2.5mL氯仿溶液洗涤混合物e,氮气吹干;(6)重复步骤(5)操作2~3次,得到物质f;(7)将步骤(6)得到的物质f溶于0.8~2mL甲醇中得到粗脂;(8)取200~500μL步骤(7)中得到的粗脂,在规格200mm*200mm的硅胶板上距离底部1~3cm处点样,在展开剂的作用下展...
【专利技术属性】
技术研发人员:马冬云,秦海霞,侯俊峰,黄鑫,王晨阳,杨国玉,韩巧霞,郭天财,
申请(专利权)人:河南农业大学,
类型:发明
国别省市:河南;41
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