一种基于微孔膜的血型检测卡、血型检测系统技术方案

技术编号:14355613 阅读:92 留言:0更新日期:2017-01-08 22:54
本发明专利技术提供一种基于微孔膜的血型检测卡,由多个微柱管和固定于所述微柱管中部的微孔膜组成,所述微柱管用于容纳待测的红细胞和包含抗体的检测试剂,所述微孔膜的孔径为0.1微米至10微米,孔密度为105‑108个/cm2,根据血型检测的需要,选择所述微孔膜的孔径使得未与抗体结合的红细胞通过微孔膜沉降至所述微柱管底部,与抗体结合后的红细胞被阻隔在所述微孔膜上方,根据所述红细胞的红色位置来判定血型。本发明专利技术的血型检测卡具有保质期长、成本低、几乎可以检测所有的血型相关鉴定试验的特点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及血型测试领域,具体涉及一种血型检测卡、血型检测系统。
技术介绍
血型是对血液分类的方法,通常是指红细胞的分型,其依据是红细胞表面是否存在某些可遗传的抗原物质。抗原物质可以是蛋白质、糖类、糖蛋白或者糖脂。通常一些抗原来自同一基因的等位基因或密切连锁的几个基因的编码产物,这些抗原组成一个血型系统。在人类目前已经发现并为国际输血协会承认的血型系统有30种,如ABO血型系统、Rh血型系统、MNS血型系统、P血型系统等,而其中又以ABO血型系统和Rh血型系统最为重要。目前临床实验室最常用的血型的鉴定方法是血凝实验和微柱凝胶试验(MGT)。ABO血型系统是所有已知血型系统中最重要的血型系统。已确定的ABO血型抗原为:A,B,AB,A1,红细胞膜具有A抗原称为A型红细胞,A型还可再区分为A1、和A2亚型。在A1亚型红细胞上含有A和A1抗原,而A2型红细胞上仅含有A抗原;红细胞膜具有B抗原称为B型红细胞,A、B抗原都有称为AB型红细胞,如两者皆无,则称为O型红细胞。Rh血型是最具多态性的血型系统,目前发现的抗原有40多个,但涉及临床问题的主要有5个抗原,即D、C、c、E、e及其相应的特异性抗体。抗原强弱次序为D>E>c>C>e。同时,该血型是除ABO血型外最具临床意义的血型系统,在输血治疗和胎母免疫引起的新生儿溶血病的诊断、治疗中发挥重要的意义。在Rh血型系统中,D抗原的抗原性最强,50%~75%的Rh阴性的个体输入D抗原阳性红细胞后免疫产生抗D抗体,D抗原的重要性仅次于A和B抗原。常规情况下Rh血型检测对受血者只检测D抗原,对献血者需要进一步检查和确定其弱D抗原。患者在输血中所接受的血液不仅要检测ABO和Rh血液或血液成分是否相容外,对其体内不规则抗体、高频率和低频率等抗原的检查筛选也是非常必要的。这主要考虑到不同人的血液在免疫学算不同的抗原,在输血过程中可能会发生一定的不良反应,特别是迟发性溶血性输血反应。此外,对孕妇而言,不规则抗体会引起新生儿溶血病,影响新生儿脏器的发育,并使其智力发育受到伤害,严重者则会危及新生儿的生命安全。因此,抗体筛选是很必要而且必须的。所谓不规则抗体是指不符合ABO血型系Landsteiner法则的血型抗体,也就是抗-A、抗-B以外的血型抗体。ABO系中的亚型,变异型抗-A或某种抗-B等抗体,也称为不规则抗体。其多为IgG抗体。在盐水介质中不能凝集而只能致敏相应抗原的红细胞,必须通过特殊介质(酶、抗人球蛋白、polybrene等),才能使致敏红细胞出现凝集反应。抗体筛选的目的是发现有临床意义的不规则抗体,有针对性地选择合适的血液,不至于盲目的配血。目前越来越多的医院对受血者的血清做常规的抗体筛选试验。抗球蛋白法包括直接抗球蛋白试验(DAT)和间接抗球蛋白试验(IAT)。抗体分子和补体成分是球蛋白,用人球蛋白免疫动物后,刺激其产生针对外来蛋白的抗体。动物血清经过灭活补体后吸收去除不想关的凝集素即可与人球蛋白(AHG)发生特异性反应。AHG会与结合在红细胞上或游离在血清中的人球蛋白反应。向含有包被的红细胞和游离球蛋白的系统内加入AHG,游离球蛋白会中和AHG。AHG包被的红细胞经洗涤后,AHG分子的Fab片段与包被在红细胞上的人球蛋白分子Fc片段结合。这样红细胞通过AHG搭桥而凝集。凝集的过程与包被在红细胞上的球蛋白的量成正比,未包被的红细胞则不会凝集。在输血前,一定要检查病人(受血者)和输血人(供血者)的血型,并且要进行交叉配血试验。输血是一种纠正血液却反的安全和暂时有效的方法,交叉配血是决定是否可以输血的检查项目最重要的一项,是输血前必须进行的工作。准确的血型鉴定及交叉配血是临床安全、有效输血的重要保证。在临床医学中,除输血、移植免疫外,对新生儿溶血病、自身免疫性溶血性贫血特异性抗体的检查,也都需要血型知识和有关技术。血型不仅在输血上有重要意义,而且在人种学、遗传学、法医学、移植免疫、疾病抵抗力(或易感性)等方面也有重要的应用价值。血型鉴定的常用方法主要有:1.血凝试验血凝试验是指红细胞和血清中血型抗原和抗体在液体介质中发生肉眼可见的凝集反应,用血凝试验进行ABO血型鉴定大致包括三种方法:玻片法、试管法及自动化法。玻片法和试管法的实验原理基本相同,二者的共同点是操作简便,但是,与玻片法只做正定型相比,用试管法进行ABO血型鉴定的正定型和反定型,有了正反定型对照,避免了因血型抗原或抗体的原因而出现的血型错误,又因为用试管法进行ABO血型鉴定时,对待测的红细胞进行洗涤稀释(2~5%的浓度),减少了因红细胞浓度太浓而出现的假阳性,传统的血型鉴定玻片法和试管法虽然费时费力、敏感差、操作不易自动化、批量化、结果不易保存,但是,试管法ABO血型的鉴定因其操作简便、结果准确可靠,目前仍广泛用于ABO血型鉴定工作中。2.微柱凝胶法微柱凝胶技术1994年获美国FDA批准,是建立在传统血型血清学基础上的一项免疫学检测技术。微柱凝胶法是一种改良的血凝试验,实验时红细胞抗原与相应抗体的反应在微柱凝胶介质中进行,微柱凝胶具有凝胶分子筛的作用,如果红细胞抗原与相应抗体结合,形成的凝集块经离心后不能通过凝胶分子筛而留在凝胶介质的上层;如果红细胞与抗体没有结合,反应后没有形成凝集块,则离心后红细胞可以通过凝胶分子筛沉淀凝胶层底部,从而达到鉴定ABO血型的目的。微柱凝胶试验省略了洗涤红细胞等操作,工作程序和结果的判读易于标准化,自动化。该实验方法还具有所需标本少、结果准确、抗干扰能力强、溶血、脂血影响少、重复性好等优点,正是由于微柱凝胶试验的以上优点,该方法已成为发达国家常规的ABO血型鉴定方法,国内也有越来越多的单位用其进行ABO血型鉴定。中国专利申请CN101718794A提供了一种ABO/RhD血型定型检测试剂卡的制备方法,试剂卡上具有微柱凝胶管,凝胶管含有聚丙烯酰胺葡聚糖凝胶,无凝集的红细胞可完全通过凝胶颗粒间隙,凝集的红细胞则不能通过。中国专利CN101701961A提供了一种ABO血型定型检测试剂卡的制备方法,同样是凝胶管含有聚丙烯酰胺葡聚糖凝胶。但微柱凝胶法血型检测卡除了抗人球蛋白卡可检测3种外,其他每个实验只能使用专用检测卡进行检测。目前最优的微柱凝胶法血型检测卡只能在2-25℃保存1年。
技术实现思路
为了解决上述问题,本专利技术的目的在于克服上述不足,提供一种保质期长、成本低、几乎可以检测所有的血型相关鉴定试验的血型检测卡、血型检测系统。本专利技术的目的是提供一种基于微孔膜的血型检测卡,所述检测卡中的微孔膜允许单个游离红细胞通过,因与抗体结合而发生凝集的红细胞则无法通过,会截留在膜表面形成红色的红细胞层。在所述检测卡中的微柱管中加入红细胞和抗体,待红细胞与抗体反应后梯度离心。如果抗体与红细胞发生反应而凝集,则会被截留在微孔膜表面形成红色的红细胞层,判定为阳性结果;如果抗体与红细胞未发生反应,则游离红细胞会通过滤膜而聚集在微柱管底部,判定为阴性结果。本专利技术的又一个目的是提供一种基于微孔膜的血型检测系统。根据本专利技术的一方面,一种血型检测卡,由多个微柱管和固定于所述微柱管中部的微孔膜组成,所述微柱管用于容纳待测的红细胞和包含抗体的检测试剂,所述微孔膜的孔径为0.1微本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种血型检测卡,由多个微柱管和固定于所述微柱管中部的微孔膜组成,所述微柱管用于容纳待测的红细胞和包含抗体的检测试剂,所述微孔膜的孔径为0.1微米至10微米,孔密度为105‑108个/cm2,根据血型检测的需要,选择所述微孔膜的孔径使得未与抗体结合的红细胞通过微孔膜沉降至所述微柱管底部,与抗体结合后的红细胞被阻隔在所述微孔膜上方,根据所述红细胞的红色位置来判定血型。

【技术特征摘要】
1.一种血型检测卡,由多个微柱管和固定于所述微柱管中部的微孔膜组成,所述微柱管用于容纳待测的红细胞和包含抗体的检测试剂,所述微孔膜的孔径为0.1微米至10微米,孔密度为105-108个/cm2,根据血型检测的需要,选择所述微孔膜的孔径使得未与抗体结合的红细胞通过微孔膜沉降至所述微柱管底部,与抗体结合后的红细胞被阻隔在所述微孔膜上方,根据所述红细胞的红色位置来判定血型。2.如权利要求1所述的血型检测卡,其特征在于所述微孔膜由选自聚醚砜、尼龙、聚丙烯、聚乙烯、聚对苯二甲酸乙二醇酯、聚碳酸酯、聚四氟乙烯、聚偏氟乙烯、聚四氟乙烯分散树脂、聚氨酯、聚氯乙烯、聚酰亚胺、玻璃纤维膜、混合纤维素和有机硅膜的材料制成。3.如权利要求2所述的血型检测卡,其特征在于所述微孔膜由选自聚对苯二甲酸乙二醇酯、聚碳酸酯、聚丙烯和聚酰亚胺的材料制成。4.如权利要求3所述的血型检测卡,其特征在于所述微孔膜由下述方法制备:1)基膜成像:以厚度为6μm~50μm的聚对苯二甲酸乙二醇酯、聚碳酸酯、聚丙烯、聚酰亚胺材料的膜为基膜;2)辐照:选用能量为1MeV-500MeV、流强为0.1纳安-10微安的重离子束流从一面辐照基膜,辐照时间为0.1秒到9小时;3)敏化:利用波长200-365nm的紫外线灯对辐照后的基膜进行照射,紫外线灯功率为50瓦-2000瓦,灯与基膜的距离为0.1厘米-50厘米,敏化时间为10秒-180分钟;4)蚀刻:将敏化后的基膜放入浓度为0.1个当量-30个当量的...

【专利技术属性】
技术研发人员:宋小冬王胜岚周征宇崔清臣张家骥李思哲李峰
申请(专利权)人:中山生物工程有限公司中山双安微医疗科技有限公司
类型:发明
国别省市:广东;44

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