本发明专利技术公开了一种筛选高效菌株处理高盐度石油开采废水的方法。通过高盐度目标碳源菌的筛选分离纯化；以降解高盐度石油开采废水的ＣＯＤ为目标的优势菌株的第一次复筛；将得到的优势菌株置于实际高盐度石油开采废水中进行驯化；分离出驯化后的优势菌株进行以降解高盐度石油开采废水的ＣＯＤ为目标的第二次复筛，经过多次筛选得到的优势菌株进行组合处理得到最佳混合高效菌；将高效混合菌液接种到废水中。本发明专利技术操作简便易行，且节约成本。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种筛选高效菌抹处理高盐度石油开采废水的方法。
技术介绍
原油及石油制品是交通运输、电力、机械制造等工业的重要能源，也是石 油化工、轻工、纺织和食品等工业所必需的原料。在石油开采过程中，采出的原油含有大量的水分， 一般情况下含水率高达70-95%。采油废水主要是随原油 一起被开采出来，经过油气分离和脱水处理后脱出的废水，采油废水普遍具有 以下特点1、含石油类等高分子难降解有机污染物。2、含表面活性剂等多种 有机化学药剂。3、含盐度高，具一定的腐蚀性。4、含杀菌剂。高盐度石油开 采废水是目前难处理的废水之一。这种废水不仅含有油、有机物、重金属和放 射性物质等多种物质，还含有大量如C1—、 S0广、Na+、 Ca"等溶解性无机盐物质， 而水中所含溶解性盐越多，离子强度愈大， 一般的微生物愈难以生长繁殖。目前利用筛选高效菌抹处理高盐度石油开采废水的方法较少。
技术实现思路
本专利技术的目的就是在长期受高盐度的污染的污泥中，采用高盐度基础培养 基和筛选培养基进行分离纯化，利用处理高盐度石油开采废水的C0D为目标进 行复筛，得到高效菌抹，利用高效菌株处理高盐度石油开采废水。通常的分离纯化法选取的基础培养基利用NaCl试剂调节培养基中的盐度， 篩选培养基是以目标碳源加一定的其他营养成分制备得到的培养基，而对于我 们所做的制高盐度基础培养基的方法，基础培养基通过加实际处理的高盐度废 水调节培养基的盐度的方法，筛选培养基直接利用高盐度石油开采废水加琼脂 制备，这样简化了反应步骤，改变工艺条件，使得操作筒便易行，且节约成本。本专利技术具体步骤为(1) 在无菌操作条件下，分别称取选取的不同污泥，按lg污泥/90ml废水的 比例进行稀释混匀；再按1(T进行稀释，分别取lml菌液接种到高盐度基础培养 基上，放于34-35。C恒温培养箱中培养2天；在菌落生长明显的平板上挑取长势 良好的菌落接种于含有高盐度选择性筛选培养基的培养皿中，再置于恒温培养 箱中培养。其后再反复进行平板划线分离，直至得到高盐度目标降解菌；(2) 将粗篩后得到的高盐度目标降解菌接种到基础培养基中，在温度为34-35°C,转速为105-110r/min的摇床中进行富集培养23-24h,取lml富集培 养菌液接入到高盐度石油开采废水中，降解23-24h，考察废水中投菌前后COD 的变化，筛选出处理效果较好的菌抹；(3) 第一次复筛得到处理效果较好的菌抹以高盐度基础培养基富集后取 10.1-10.3ml接种1: 3的废水中进行第 一 阶段驯化，即放入到转速 110-120r/min,温度为34-35。C的摇床中培养48小时，取lmL接种到2: 3的废 水中进行第二阶^:的驯化，条件同第一阶段。46-48小时后取10ml接种到全部 的废水中驯化两天，条件同第一阶段，分离出驯化后的菌抹，将菌林保存在-4。C;(4) 将驯化后得到的优势菌林接种到基础培养基中，在温度为34-35°C,转 速为105-110r/min的摇床中进行富集培养24h,取lml富集培养菌液接入到高 盐度石油开采废水中，降解70-72h,考察废水中投菌前后COD的变化，筛选出 处理效果较好的菌株；(5) 挑处理效果较好的菌株接种到基础培养基中于34-35°C、 105-110r/min 的条件下，振荡培养23-24h,于3900-4000r/min离心IO分钟，倒去上清液， 用无菌水洗涤菌体，摇匀5-6分钟，于3900-4000r/min离心，倒去上清液，用 高盐度无菌水稀释菌体，摇匀按不同菌种均匀组合后，制成混合菌液，使混合 菌液的OD值维持在0. 085-0. 90左右，摇匀后取lml混合菌液接种到100ml废 水中，在34-35。C、 105-110r/min的条件下，于摇床中降解23-24 h，考察废水 中投菌前后COD的变化，得到高效混合菌林；(6) 选取高效混合菌株，稀释10倍的单一菌液的OD值为0.085-0. 90左右， 在无菌条件下，将菌液按(0.8-1.1): (0.8-1.1): (0. 8-1.1)比例混合均匀,用 10°/。稀盐酸溶液和10%氢氧化钠溶液调节废水pH为0. 085-0. 90，将菌液按接种量 为0. 65-0. 75°/。接种到废水中，在35°C、 105-110r/min的条件下，振荡培养 23-24h。本专利技术操作简便易行，且节约成本。具体实施方式 实施例(l)在无菌操作条件下，称取lg选取的污泥，倒入盛有90ml无菌水的250ml 锥形瓶中(内含玻璃珠)用手振摇20min，按10—工进行稀释;从各稀释的试管中分 別取lml菌液接种到高盐度基础培养基上，放于35。C恒温培养箱中培养2天。 在菌落生长明显的平板上挑取长势良好的菌落接种于含有高盐度选择性筛选培养基的培养皿中，再置于恒温培养箱中培养。其后再反复进行平板划线分离， 直至得到高盐度目标降解菌。(2) 将粗筛后得到的高盐度目标降解菌接种到基础培养基中，在温度为35°C,转速为110r/min的摇床中进行富集培养24h,取lml富集培养菌液接入 到高盐度石油开采废水中，降解24h，考察废水中投菌前后COD的变化，筛选出 处理效果较好的菌抹。(3) 第一次复筛得到的菌林以高盐度基础培养基富集后取10. 3ml接种1: 3 的废水中进行第一阶段驯化，即放入到转速110r/min，温度为35。C的摇床中培 养48小时，取lmL接种到2: 3的废水中进行第二阶段的驯化，条件同第一阶 段。48小时后取10ml接种到全部的废水中驯化两天，条件同第一阶段，分离出 驯化后的菌抹，将菌抹保存在-4°C。(4) 将驯化后得到的优势菌林接种到基础培养基中，在温度为35°C,转速为 110r/min的摇床中进行富集培养24h，取lml富集培养菌液接入到高盐度石油 开采废水中，降解72h,考察废水中投菌前后COD的变化，筛选出处理效果较好 的菌株。(5) 挑处理效果较好的菌抹接种到基础培养基中于35°C、 110r/min的条件 下，振荡培养24h，于4000r/min离心IO分钟，倒去上清液，用无菌水洗涤菌 体，摇匀6分钟，于4000r/min离心，倒去上清液，用高盐度无菌水稀释菌体， 摇匀按不同菌种均匀组合后，制成混合菌液，使混合菌液的OD值维持在O. 90， 摇匀后取lml混合菌液接种到100ml废水中，在35。C、 110r/min的条件下，于 摇床中降解24 h,考察废水中投菌前后COD的变化，得到高效混合菌株。(6)选取高效混合菌抹，稀释10倍的单一菌液的OD值为0. 90，在无菌条 件下，将菌液按1: 1: 1比例混合均匀，用10°/。稀盐酸溶液和10°/。氢氧化钠溶液 调节废水pH为9,将菌液按接种量为0. 7°/。接种到废水中，在35。C、 110r/min的 条件下，振荡培养24h。废水COD从300. Omg/L下降到123. 22mg/L, COD去除率 达到了 59. 6%。权利要求1.一种，其特征在于具体步骤为(1)在无菌操作条件下，分别称取选取的不同污泥，按1g污泥/90ml废水的比例进行稀释混匀；再按10-1进行稀释，分别取1ml菌液接种到高盐度基础培养基上，放于34-35℃恒本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种筛选高效菌株处理高盐度石油开采废水的方法，其特征在于具体步骤为：（１）在无菌操作条件下，分别称取选取的不同污泥，按１ｇ污泥／９０ｍｌ废水的比例进行稀释混匀；再按１０↑［－１］进行稀释，分别取１ｍｌ菌液接种到高盐度基础培养基上，放于３４－３５℃恒温培养箱中培养２天；在菌落生长明显的平板上挑取长势良好的菌落接种于含有高盐度选择性筛选培养基的培养皿中，再置于恒温培养箱中培养；其后再反复进行平板划线分离，直至得到高盐度目标降解菌；（２）将粗筛后得到的高盐度目标降解菌接种到基础培养基中，在温度为３４－３５℃，转速为１０５－１１０ｒ／ｍｉｎ的摇床中进行富集培养２３－２４ｈ，取１ｍｌ富集培养菌液接入到高盐度石油开采废水中，降解２３－２４ｈ，考察废水中投菌前后ＣＯＤ的变化，筛选出处理效果较好的菌株；（３）第一次复筛得到处理效果较好的菌株以高盐度基础培养基富集后取１０．１－１０．３ｍｌ接种１∶３的废水中进行第一阶段驯化，即放入到转速１１０－１２０ｒ／ｍｉｎ，温度为３４－３５℃的摇床中培养４８小时，取１ｍＬ接种到２∶３的废水中进行第二阶段的驯化，条件同第一阶段；４６－４８小时后取１０ｍｌ接种到全部的废水中驯化两天，条件同第一阶段，分离出驯化后的菌株，将菌株保存在－４℃；（４）将驯化后得到的优势菌株接种到基础培养基中，在温度为３４－３５℃，转速为１０５－１１０ｒ／ｍｉｎ的摇床中进行富集培养２４ｈ，取１ｍｌ富集培养菌液接入到高盐度石油开采废水中，降解７０－７２ｈ，考察废水中投菌前后ＣＯＤ的变化，筛选出处理效果较好的菌株；（５）挑处理效果较好的菌株接种到基础培养基中于３４－３５℃、１０５－１１０ｒ／ｍｉｎ的条件下，振荡培养２３－２４ｈ，于３９００－４０００ｒ／ｍｉｎ离心１０分钟，倒去上清液，用无菌水洗涤菌体，摇匀５－６分钟，于３９００－４０００ｒ／ｍｉｎ离心，倒去上清液，用高盐度无菌水稀释菌体，摇匀按不同菌种均匀组合后，制成混合菌液，使混合菌液的ＯＤ值维持在０．０８５－０．９０左右，摇匀后取１ｍｌ混合菌液接种到１００ｍｌ废水中，在３４－３５℃、１０５－１１０ｒ／ｍｉｎ的条件下，于摇床中降解２３－２４ｈ，考察废水中投菌前后ＣＯＤ的变化，得到高效混合菌株；（６）选取高效混合菌株，稀释１０倍的单一菌液的ＯＤ值为０．０８５－０．９０左右，在无菌条件下，将菌液按（０．８－１．１）∶（０．８－１．１）∶（０．８－１．１）比例混合均匀，用１０％稀...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：李艳红，雷云，解庆林，张学洪，王敦球，申泰铭，
申请(专利权)人：桂林工学院，
类型：发明
国别省市：45[中国|广西]
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