本发明专利技术是关于一种鲍氏不动杆菌(Acinetobacter baumannii)的多肽抗原，该多肽抗原包括至少一选自下列群组中的氨基酸序列：(a)SEQ ID NO：1至5的氨基酸序列；(b)依据SEQ ID NO：1、3、4、5进行20％以下氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列；(c)依据SEQ ID NO：2进行40％以下氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列；以及(d)依据(a)至(c)氨基酸序列的片段；其中，依据(b)至(d)氨基酸序列的多肽是具有免疫刺激活性。借由本发明专利技术所提供鲍氏不动杆菌的共同抗原，可应用于制备预防鲍氏不动杆菌感染的通用疫苗，并通过相对应抗体的制备可应用于鲍氏不动杆菌的检测与治疗。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术是关于一种用以产生免疫反应的抗原，尤其是关于一种鲍氏不动杆菌多肽抗原。本专利技术亦是关于包括该鲍氏不动杆菌多肽抗原的疫苗组合物，以及可专一性结合鲍氏不动杆菌多肽抗原的抗体。同时，本专利技术亦是关于编码该鲍氏不动杆菌多肽抗原的分离核酸，包括该分离核酸的表达载体以及包括该表达载体的宿主细胞。
技术介绍
不动杆菌属(Acinetobacter spp.)细菌广泛地分布于自然界当中，其大约分有20个种，属于革兰氏阴性杆菌。其中，鲍氏不动杆菌(Acinetobacter baumannii)是最常见且被研究的菌种，他们能够在各种湿润或干燥的物体表面上生存，目前已是医院环境里最常引起院内感染的病原之一。鲍氏不动杆菌是一伺机性病原菌，其对于免疫力正常的宿主而言是无害的，但在宿主免疫力下降时，此细菌就容易引起感染，造成疾病。举凡手套、针筒、针头、推车、呼吸器、床铺、柜架、水槽、地板、空调出风回风口，甚至连听诊器、病历都可能存有鲍氏不动杆菌，而在潮湿温暖的饮水、食物以及和排水道中，或是人体上，例如皮肤、腋下、结膜、口腔、上呼吸道、鼻咽及肠胃道、尿道等，更是容易见到鲍氏不动杆菌的踪迹。接触到这些细菌的病患或家属，经常就在抵抗力变弱时成为发病的宿主。特别的是，伺机性病原菌在进行侵入性治疗例如插管、手术时，更增加了院内感染的机率，成为病人健康与医护的一大隐忧。一般对于细菌的感染，其治疗方法是使用抗生素。然而，由于抗生素的滥用，该些细菌逐渐产生抗药性而难以消灭，目前，为了对抗越来越多院内感染而对抗生素具有抗药性的细菌，患者必须更换抗生素种类或使用昂贵的新型抗生素，若细菌的抗药性继续发展演化，将来恐怕会面临无有效抗生素可用的状况。关于造成院内感染的鲍氏不动杆菌，目前临床上已分离出具有多重抗药性的菌株，由于其在物体表面上仍可存活相当一段时日，因此若无适当的治疗或预防方法，未来势必成为院内感染防治的棘手难题。如前所述，鲍氏不动杆菌的无所不在与其抗药性已逐渐成为院内感染防治的重大难题，因此若能对人体施打疫苗产生预防力，即可有效避免鲍氏不动杆菌的感染。一般疫苗是利用失去活性或减毒的病原体，注入人体内，借由人体免疫系统产生体液性(例如抗体)与细胞性(例如：细胞毒性、辅助型或调节型T细胞)等免疫反应，而可在将来病原体进入宿主生物体后将该病原体中和后清除。然而，利用失去活性或减毒的病原体疫苗，对于某些疾病的预防是危险的，尤其是缺乏该些病原体相关的病理条件与减毒特性时。因此，利用病原体上能够产生免疫刺激反应的抗原作为疫苗组合物，而不是引入整个的致病病原体，已是目前制备较具安全性疫苗的主要方法之一。然而，如何找寻到鲍氏不动杆菌中具特异性的抗原而用以制作疫苗却是困难的。虽然在先前的研究中，Pantophlet等人曾利用不动杆菌脂多醣体的O抗原和相对应的抗体，用以鉴定不动杆菌菌株(Pantophlet R.et al.，Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology，9，60-65，2002)，但其并未揭露其他抗原以及任何关于疫苗的应用，而美国公告第6,562,958号虽然也公开了大约4000种与鲍氏不动杆菌相关的核苷酸和氨基酸序列，但这些序列极大部分并不清楚其是否为可表达的基因，也不知其功能为何。因此，为了预防鲍氏不动杆菌的感染同时建立起精确的检测诊断方式，找寻并利用能有效产生免疫反应的抗原目标以及具专一性的检测、治疗用抗体，有其迫切的需求。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种鲍氏不动杆菌间共有的多肽抗原，用以制备疫苗组合物以预防鲍氏不动杆菌或具有相类似抗原病原菌的感染。本专利技术的另一目标则同时提供一种可专一性对抗该多肽抗原的抗体，以作为检测或治疗之用。为了实现前述的目的，本专利技术提供一种分离的鲍氏不动杆菌(Acinetobacter baumannii)多肽抗原，该多肽抗原包括至少一选自下列群组中的氨基酸序列：(a)SEQ ID NO：1至5的氨基酸序列；(b)依据SEQ ID NO：1、3、4、5进行20％以下氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列；(c)依据SEQ ID NO：2进行40％以下氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列；以及(d)依据(a)至(c)氨基酸序列的片段；其中，依据(b)至(d)氨基酸序列的多肽具有免疫刺激活性。前述SEQ ID NO：1至5的氨基酸序列请参见序列表。在一实施例中，本专利技术提供一种对抗鲍氏不动杆菌的抗体，该抗体可专一性地与前述的多肽抗原相结合。其中，该抗体可为多克隆抗体或单克隆抗体。此外，该抗体除了具二轻链、二重链的一般完整抗体结构外，其亦可为经重组克隆但具有相同抗原识别专一性的抗体片段(antibody fragment)，例如Fab、F(ab’)2、Fv或ScFv片段抗体。在另一实施例中，本专利技术提供一种医药组合物，包括前述对抗鲍氏不动杆菌多肽抗原的抗体以及一药学上可接受的载体。在本专利技术再一实施例中，提供一种检测鲍氏不动杆菌的方法，其步骤包括：提供一如前述可专一性地与前述的多肽抗原相结合的抗体，将其与待测样品接触后，利用检测试剂或仪器，分析该抗体的结合状况，以判定待测样品中是否存有鲍氏不动杆菌。该检测方式可为西方墨点法或ELISA等常用的免疫反应检测方法。在本专利技术一实施例中，同时提供一种检测鲍氏不动杆菌的试剂盒，其包括如前所述的抗体。在另一实施例中，本专利技术进一步提供一种利用如前所述的鲍氏不动杆菌多肽抗原作为疫苗的用途，以及一种包括至少一前述鲍氏不动杆菌多肽抗原的疫苗组合物。该疫苗组合物，可进一步包括药学上可接受载体与/或佐剂。其中，“药学上可接受载体”是指不影响有效成分药理活性且对于投予的生物体无毒性的任何载体，除依据剂型种类所选用的赋形剂外，可包括但不限于：稀释剂、稳定剂、防腐剂、抗氧化剂、分散剂、增溶剂、抗菌剂、抗真菌剂与佐剂等免疫刺激剂，以及以上之组合。“佐剂”则是指不同于疫苗所使用的抗原组份，但可增加抗原反应的物质。佐剂可为但不限于戈布佐剂(Gerbu adjuvant)、分枝杆菌或棒状杆菌、霍乱毒素、破伤风类毒素或各种油水乳化物(例如：IDEC-AF)。此外该佐剂也可包括矿物盐或矿物凝胶(例如：氢氧化铝、磷酸铝和钙磷酸盐)、表面活性物质(例如：卵磷脂)以及免疫刺激物质(例如：皂甙)、寡核苷酸、白细胞介素-2等。为了制备如前所述的多肽抗原，本专利技术在一实施例中，更提供一种分离的核酸，其编码至少一选自下列群组中的氨基酸序列，该氨基酸序列为鲍氏不动杆菌(Acinetobacter baumannii)多肽抗原：(a)SEQ ID NO：1至5之氨基酸序列；(b)依据SEQ ID NO：1、3、4、5进行20％以下氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列；(c)依据SEQ ID NO：2进行40％以下氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列；以及(d)依据(a)至(c)氨基酸序列的片段；其中，依据(b)至(d)氨基酸序列的多肽具有免疫刺激活性。在一实施例中，前述的分离的核酸可包括至少一选自由SEQ ID NO：6至10所组成的群组的序列。进一步，本专利技术提供一种表达载体，可将前述的核酸克隆于该载体中，并连接有一可调控其表达的转录调节因子，借以表达多肽抗原。此处“调控”可直本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种分离的鲍氏不动杆菌(Acinetobacter baumannii)多肽抗原，其特征在于，该多肽抗原包括至少一选自下列群组中的氨基酸序列：(a)SEQ ID NO：1至5的氨基酸序列；(b)依据SEQ ID NO：1、3、4、5进行20％以下氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列；(c)依据SEQ ID NO：2进行40％以下氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列；以及(d)依据(a)至(c)氨基酸序列的片段；其中，依据(b)至(d)氨基酸序列的多肽具有免疫刺激活性。
【技术特征摘要】
2015.06.11 TW 1041189401.一种分离的鲍氏不动杆菌(Acinetobacter baumannii)多肽抗原，其特征在于，该多肽抗原包括至少一选自下列群组中的氨基酸序列：(a)SEQ ID NO：1至5的氨基酸序列；(b)依据SEQ ID NO：1、3、4、5进行20％以下氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列；(c)依据SEQ ID NO：2进行40％以下氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列；以及(d)依据(a)至(c)氨基酸序列的片段；其中，依据(b)至(d)氨基酸序列的多肽具有免疫刺激活性。2.一种抗鲍氏不动杆菌的抗体，其特征在于，该抗体可专一性地与如权利要求1所述的多肽抗原相结合。3.如权利要求2所述的抗体，其特征在于，该抗体是一单克隆抗体，或该抗体是该单克隆抗体的抗体片段。4.一种医药组合物，其包括如权利要求2或3所述的抗体以及药学上可接受的载体。5.一种检测鲍氏不动杆菌的方法，其步骤包括：提供一如权利要求2所述的抗体，...
【专利技术属性】
技术研发人员：杨秋英，
申请(专利权)人：薛富盛，
类型：发明
国别省市：中国台湾;71
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