一种粪大肠菌群培养基及其应用制造技术

本发明专利技术公开一种粪大肠菌群显色培养基及应用，属于医学检验技术领域，是由下述组分组成：蛋白胨10～20g/L，动物组织消化物2～4g/L，乳糖5～15g/L，胆盐0.5～1.5g/L，十二烷基硫酸钠0.2～0.4/L，溴甲酚紫0.03～0.06g/L，卵磷脂1～3g，吐温80 10～15g/L，其余为去离子水，pH值7.4±0.2。本发明专利技术的培养基用于检测化妆品中的粪大肠菌群，检测灵敏度高、特异性好，直接根据培养基颜色就可对菌株作出鉴别，检测周期短，适用于处理大批量的样本、易于产业化生产，可对化妆品中的粪大肠菌群进行全面、系统、准确的检测和初步的鉴定，为化妆品检测提供了新的途径。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医学检验
，特别涉及一种粪大肠菌群培养基及其应用。
技术介绍
粪大肠菌群为总大肠菌群的一个亚种；粪大肠菌群细菌来源于人和温血动物的粪便。检出粪大肠菌群表明该化妆品已被粪便污染，有可能存在其他肠道致病菌或寄生虫等病原体的危险。考虑到总大肠菌群中的细菌除生活在肠道中外，在自然环境(水与土壤)中亦经常存在。在粪大肠菌群这一组群细菌中大肠埃希氏菌(E.coli)数量最多，是较理想的指示菌，但欲正确鉴定此细菌，手续较繁复，因此在化妆品检验中采用粪大肠菌群列为重要的卫生指标菌。中华人民共和国卫生部在1987-7-1就颁布实施了在化妆品中必须要检测粪大肠菌群，但许多检验人员对这项目的检验技术要求细节存在着的这样那样的问题，菌落的判断及识别主要依赖于检验人员的肉眼观察和经验判断，对于不典型形态特征的菌落可能会造成漏检。因此，开发一种培养时间短、特异性好、对主观依赖较小的粪大肠菌群的培养基意义重大。
技术实现思路
本专利技术提供一种粪大肠菌群培养基，解决现有的化妆品粪大肠菌群检测中依赖于检验人员的主观判断的问题、检测准确性不高的问题。为解决上述技术问题，本专利技术的技术方案为：一种粪大肠菌群显色培养基，是由下述组分组成：蛋白胨10～20g/L，动物组织消化物2～4g/L，乳糖5～15g/L，胆盐0.5～1.5g/L，十二烷基硫酸钠0.2～0.4/L，溴甲酚紫0.03～0.06g/L，卵磷脂1～3g，吐温80 10～15g/L，其余为去离子水，pH值7.4±0.2。其中，优选地，所述动物组织消化物为肝浸粉。其中，优选地，一种粪大肠菌群显色培养基，是由下述组分组成：蛋白胨12～18g/L，动物组织消化物2～4g/L，乳糖8～12g/L，胆盐0.8～1.2g/L，十二烷基硫酸钠0.2～0.4/L，溴甲酚紫0.04～0.06g/L，卵磷脂1～3g，吐温80 12～14g/L，其余为去离子水，pH值7.4±0.2。一种粪大肠菌群显色培养基，是由下述组分组成：蛋白胨15g/L，动物组织消化物3g/L，乳糖10g/L，胆盐1.0g/L，十二烷基硫酸钠0.3/L，溴甲酚紫0.05g/L，卵磷脂2g，吐温80 13g/L，其余为去离子水，pH值7.4±0.2。一种粪大肠菌群显色培养基在检测粪大肠菌群中的应用。其中，优选地，是将粪大肠菌群接种至显色培养基，44±0.5℃中培养24～48小时，培养基变黄色的含有粪大肠菌群，培养基为紫色不变色不含有粪大肠菌群。因自然环境中生活的大肠菌群培养的最合适温度为25℃左右，如在37℃培养则仍可生长，但如将培养温度再升高至44.5℃，则不再生长，而直接来自粪便的大肠菌群细菌也就是粪大肠菌群，习惯于37'C左右生长，如将培养温度升高至44.5℃仍可继续生长。因此，可用提高培养温度方法将自然环境中的大肠菌群与粪便中的大肠菌群区分。加入中和剂卵磷脂和吐温80后，含中和剂的乳糖胆盐培养基中能够检出粪大肠菌群的最低细菌浓度，比标准乳糖胆盐培养基下降了1个级数。其中，胆盐和十二烷基硫酸钠具有抑制革兰氏阳性菌的作用，二者共同使用，有效的抑制其它杂菌的生长，提高了检测的准确性。胆盐的品种来源及用量不同，其抑菌效果也不同。本专利技术中的胆盐为猪、牛或羊的胆盐。本专利技术的有益效果：本专利技术的粪大肠菌群显色培养基粪大肠菌群的培养时间为24～48小时，培养时间短，且检测灵敏度高、特异性好，直接根据培养基颜色就可对菌株作出鉴别，检测周期短，适用于处理大批量的样本、易于产业化生产，可对化妆品中的粪大肠菌群进行全面、系统、准确的检测和初步的鉴定，为化妆品检测提供了新的途径。具体实施方式下面对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1本实施例提供一种粪大肠菌群显色培养基，是由下述组分组成：蛋白胨15g/L，肝浸粉3g/L，乳糖10g/L，胆盐1.0g/L，十二烷基硫酸钠0.3/L，溴甲酚紫0.05g/L，卵磷脂2g，吐温8013g/L，其余为去离子水，pH值7.4±0.2。其中，所述胆盐的猪的胆盐。上述培养基的使用方法：1.称取本培养基75.0g，加入去离子水1L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装至带导管的试管中，每管装培养基10ml，115℃，20min高压蒸汽灭菌，备用。2.取合适稀释度的化妆品10ml(含有粪大肠菌群)，加到含有培养基的试管中，混匀，于44±0.5℃中培养24～48小时，并将活化后的金黄色葡萄球菌、变形杆菌、变形杆菌、蜡样芽孢杆菌分别加入上述培养基中，44±0.5℃中培养24～48小时。结果：菌种类别生长情况培养基颜色化妆品(含有粪大肠菌群)+++黄色金黄色葡萄球菌++紫色绿脓杆菌--紫色变形杆菌++紫色沙门氏菌+紫色实施例2本实施例提供一种粪大肠菌群显色培养基，是由下述组分组成：蛋白胨10g/L，肝浸粉4g/L，乳糖5g/L，胆盐1.5g/L，十二烷基硫酸钠0.2/L，溴甲酚紫0.06g/L，卵磷脂1g，吐温8015g/L，其余为去离子水，pH值7.4±0.2。其中，所述胆盐的猪的胆盐。上述培养基的使用方法：1.称取本培养基75.0g，加入去离子水1L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装至带导管的试管中，每管装培养基10ml，115℃，20min高压蒸汽灭菌，备用。2.取合适稀释度的化妆品10ml(不含有粪大肠菌群)，加到含有培养基的试管中，混匀，于44±0.5℃中培养24～48小时，并将活化后的金黄色葡萄球菌、变形杆菌、变形杆菌、蜡样芽孢杆菌分别加入上述培养基中，44±0.5℃中培养24～48小时。结果：菌种类别生长情况培养基颜色化妆品(含有粪大肠菌群)+++紫色金黄色葡萄球菌++紫色绿脓杆菌--紫色变形杆菌++紫色沙门氏菌+紫色实施例3本实施例提供一种粪大肠菌群显色培养基，是由下述组分组成：蛋白胨20g/L，肝浸粉2g/L，乳糖15g/L，胆盐0.5g/L，十二烷基硫酸钠0.4g/L，溴甲酚紫0.03g/L，卵磷脂3g，吐温8010g/L，其余为去离子水，pH值7.4±0.2。其中，所述胆盐的猪的胆盐。上述培养基的使用方法：1.称取本培养基75.0g，加入去离子水1L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装至带导管的试管中，每管装培养基10ml，115℃，20min高压蒸汽灭菌，备用。2.取合适稀释度的化妆品10ml(含有粪大肠菌群)，加到含有培养基的试管中，混匀，于44±0.5℃中培养24～48小时，并将活化后的金黄色葡萄球菌、变形杆菌、变形杆菌、蜡样芽孢杆菌分别加入上述培养基中，44±0.5℃中培养24～48小时。结果：菌种类别生长情况培养基颜色化妆品(含有粪大肠菌群)+++黄色金黄色葡萄球菌++紫色绿脓杆菌--紫色变形杆菌++紫色沙门氏菌+紫色实施例4本实施例提供一种粪大肠菌群显色培养基，是由下述组分组成：蛋白胨12g/L，肝浸粉4g/L，乳糖8g/L，胆盐1.2g/L，十二烷基硫酸钠0.2g/L，溴甲酚紫0.06g/L，卵磷本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种粪大肠菌群显色培养基，其特征在于是由下述组分组成：蛋白胨10～20g/L，动物组织消化物2～4g/L，乳糖5～15g/L，胆盐0.5～1.5g/L，十二烷基硫酸钠0.2～0.4/L，溴甲酚紫0.03～0.06g/L，卵磷脂1～3g，吐温8010～15g/L，其余为去离子水，pH值7.4±0.2。

【技术特征摘要】
1.一种粪大肠菌群显色培养基，其特征在于是由下述组分组成：蛋白胨10～20g/L，动物组织消化物2～4g/L，乳糖5～15g/L，胆盐0.5～1.5g/L，十二烷基硫酸钠0.2～0.4/L，溴甲酚紫0.03～0.06g/L，卵磷脂1～3g，吐温8010～15g/L，其余为去离子水，pH值7.4±0.2。2.根据权利要求1所述的一种粪大肠菌群显色培养基，其特征在于：所述动物组织消化物为肝浸粉。3.根据权利要求1所述的一种粪大肠菌群显色培养基，其特征在于：所述胆盐为猪、牛或羊的胆盐。4.根据权利要求1所述的一种粪大肠菌群显色培养基，其特征在于是由下述组分组成：蛋白胨12～18g/L，动物组织消化物2～4g/L，乳糖8～12g/L，胆盐0.8～1.2g/L，十...

【专利技术属性】
技术研发人员：李杰，
申请(专利权)人：郑州点石生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：河南;41