枸杞糖蛋白的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种枸杞糖蛋白的制备方法，包括以下步骤：(1)将枸杞加入水中浸泡，然后搅拌提取，过滤，滤液备用；将固体残渣按照上述步骤再进行3次提取，最后一次提取后，离心取上清液，合并上清液和前三次提取得到的滤液，得提取液；(2)将提取液于≤80℃的温度下真空浓缩，加入乙醇，静置使沉淀生成，得到枸杞糖蛋白沉淀液；(3)将枸杞糖蛋白沉淀液在离心，得到沉淀，将沉淀冷冻干燥，得到枸杞糖蛋白。本发明专利技术提取效率高，由于热提取前，将枸杞残渣浸泡，可使水分子充分进入枸杞细胞，枸杞细胞内的多糖成份容易释放到水溶液中，降低了枸杞热水提取时间，并且本发明专利技术从枸杞中同时提取到多糖和蛋白，为枸杞调节免疫和延缓衰老提供了物质基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物质高效利用及中药中有效成分高效提取的
，具体涉及一种枸杞中枸杞糖蛋白的提取。
技术介绍
枸杞为茄科植物宁夏枸杞Lycium barbarum L.的干燥成熟果实，是名贵的中药材,也是传统的药食同源植物,具有多种生理活性和保健功能,传统医药学的经典论著中有诸多枸杞功效叙述,如：“枸杞子味甘,性平,能补肾润肺,生精益气”。枸杞产生药理作用的物质基础研究引起了医药学及食品科学研究者的高度重视，现代分析表明，枸杞中含有多种化学成分，如：脂肪，油，蛋白质，枸杞多糖(Polysaccharide from Lycium barbarum，简称PLB)维生素和矿物质等。枸杞是枸杞提取枸杞油后的副产物，常常作为废渣。而枸杞是我国传统的药食两用药材，对枸杞的深度开发是枸杞资源高效综合利用的重要手段。现代医学研究表明，枸杞的滋肝养肾、延缓衰老、调节机体免疫、明目等作用与与枸杞多糖有很大的关系，因此对枸杞中枸杞多糖的提取分离有着重要的应用价值。枸杞传统应用方式为药用或食用,无论是药用或食用,都先采摘新鲜枸杞,经晒干或风干之后使用。泡酒、或煎煮入药是传统的药用方式；而泡茶和煲汤则是传统的食用方式。传统药用方式和泡茶方式无法充分利用枸杞中的枸杞多糖等有效成分，而煲汤过程中长时间加热的，枸杞多糖有所流失，致使枸杞多糖的利用率有所降低。就植物多糖的提取方法而言，国内外有各种各样的方法，如水提乙醇沉淀法、稀碱浸提法、酶法、超滤法、微波辅助浸提法以及超声波法等，其中，水提醇沉法因工艺简单、稳定、费用低受到广泛的使用。利用好水提醇沉法的关键是得高含量的多糖初溶液以及控制好植物多糖溶液和乙醇溶液的比例。枸杞糖蛋白糖是一种天然酸性杂多糖同多肽或蛋白质构成的复合性多糖。枸杞糖蛋白糖溶于水而不溶于有机溶剂，含有4种组分，分子量从几千到几百万。不同分子量的枸杞多糖分子量长短不一致，在水溶液总的凝聚态有所不一致。由于枸杞糖蛋白糖是一种特殊的糖蛋白，故表现出免疫功能具有调节作用，清除自由基以及抗衰老的作用。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是解决至少上述问题和/或缺陷，并提供至少后面将说明的优点。为了实现根据本专利技术的这些目的和其它优点，提供了一种枸杞糖蛋白的制备方法，包括以下步骤：步骤一、将枸杞加入1～10倍重量份的水中，在0℃～10℃下浸泡1～6小时，然后在50℃～80℃下搅拌进行第一次提取，提取时间为20～80分钟，然后过滤，滤液备用；将固体残渣加入1～8倍重量份的水中，在50℃～80℃下搅拌进行第二次提取，提取时间为20～80分钟，过滤，滤液备用；将固体残渣按照上述步骤再进行第三次和第四次提取，第四次提取后，离心取上清液，合并上清液和前三次提取得到的滤液，得提取液；步骤二、将提取液于≤80℃的温度下真空浓缩至步骤一枸杞重量的1～3倍，加入乙醇，使乙醇在提取液中的体积浓度达到70％～85％，在0℃～10℃下静置48小时使沉淀生成，得到枸杞糖蛋白沉淀液；步骤三、将枸杞糖蛋白沉淀液在3000～4500RPM，0℃～10℃条件下离心15min，得到沉淀，将沉淀冷冻干燥，得到枸杞糖蛋白。优选的是，所述搅拌提取的搅拌速度为2000～3000转/分钟。优选的是，所述第一次提取枸杞与水的重量比为1:10；第二次提取固体残渣与水的重量比为1:8；第三次提取固体残渣与水的重量比为1:5；第四次提取固体残渣与水的重量比为1:3。优选的是，所述步骤二中真空浓缩的温度为80℃。优选的是，所述步骤三中冷冻干燥的的温度为-75～-50℃，冷冻干燥的时间为12～48℃。优选的是，将步骤二替换为：将步骤一中得到的提取液输入高压脉冲电场处理室中，利用高压脉冲电场进行处理；将处理后的提取液采用电喷方法喷射到盛有乙醇的接收装置中，以300～500r/min搅拌1～3小时，然后静置48小时，得到枸杞糖蛋白沉淀液；所述电喷方法为：将提取液注入带不锈钢喷头的喷射容器内，然后用高压电源将电压施加在不锈钢喷头上，并利用与喷射容器连接的推进泵将喷射容器内的提取液通过不锈钢喷头喷射至接收装置中；电喷方法采用的喷射条件为：环境温度为40～60℃、高压电源的输出电压为5～8kv、接收装置与不锈钢喷头之间距离为10～15cm、流速为0.5～2.0mL/h；所述乙醇的体积分数为95％。优选的是，所述高压脉冲电场处理室外围设置有冷水循环系统，其中循环冷水温度为1～5℃，水循环速度为2～5m/s；所述高压脉冲电场处理室中两极板的间距为1～3cm。优选的是，所述高压脉冲电场处理的参数为：脉冲幅度为8～12KV，脉冲频率为800～1000Hz，脉冲宽度为8～12us，处理时间为60-90min。优选的是，所述接收装置的外部设置有循环冷却水，循环冷却水的温度为1～5℃；循环冷却水使接收装置中的乙醇的温度保持在1～5℃。优选的是，所述不绣钢喷头的内径为0.5～1.2mm。本专利技术至少包括以下有益效果：(1)本专利技术提取效率高，由于热提取前，将枸杞残渣浸泡，可使水分子充分进入枸杞细胞，枸杞细胞内的多糖成份容易释放到水溶液中，降低了枸杞热水提取时间，从实验中发现，如图2所示，枸杞糖蛋白的热分解温度为76.4℃，枸杞热提取过程中的最高温度不超过75℃，所以枸杞糖蛋白的提取过程中增加了有效成份的溶出量，降低了枸杞糖蛋白的分解，故枸杞糖蛋白的提取效率大大提高；(2)本专利技术从枸杞中提取到的枸杞糖蛋白可达46％以上，蛋白质的含量可达18％，可满足含有枸杞多糖及枸杞蛋白的保健食品及药品的开发需求。(3)本专利技术采用冷冻干燥的方式，解决了因枸杞糖蛋白的玻璃化转变温度低(4.69℃)如图3所示，醇沉物浸膏状的难干燥问题，同时解决了高温干燥后枸杞糖蛋白降解的问题；(4)本专利技术从枸杞中同时提取到多糖和蛋白，为枸杞调节免疫和延缓衰老提供了物质基础。本专利技术的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本专利技术的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。附图说明：图1为本专利技术枸杞糖蛋白的制备方法的流程示意图；图2为本专利技术制备的枸杞糖蛋白的热重曲线图；图3为本专利技术制备的枸杞糖蛋白的差示扫描量热曲线图。具体实施方式：下面结合附图对本专利技术做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。应当理解，本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不配出一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。实施例1：一种枸杞糖蛋白的制备方法，包括以下步骤：步骤一、将枸杞加入1倍重量份的水中，在0℃下浸泡1小时，然后在50℃下搅拌进行第一次提取，提取时间为20分钟，然后过滤，滤液备用；将固体残渣加入1倍重量份的水中，在50℃下搅拌进行第二次提取，提取时间为20分钟，过滤，滤液备用；将固体残渣按照上述步骤再进行第三次和第四次提取，第四次提取后，离心取上清液，合并上清液和前三次提取得到的滤液，得提取液；所述搅拌提取的搅拌速度为2000转/分钟；步骤二、将提取液于80℃的温度下真空浓缩至步骤一枸杞重量的1倍，加入乙醇，使乙醇在提取液中的体积浓度达到70％，在0℃下静置48小时使沉淀生成，得到枸杞糖蛋白沉淀液；步骤三、将枸杞糖蛋白沉淀液在3000RPM，0℃条件下离心15min，得到沉淀，将沉淀在-75℃下，冷冻干本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种枸杞糖蛋白的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、将枸杞加入1～10倍重量份的水中，在0℃～10℃下浸泡1～6小时，然后在50℃～80℃下搅拌进行第一次提取，提取时间为20～80分钟，然后过滤，滤液备用；将固体残渣加入1～8倍重量份的水中，在50℃～80℃下搅拌进行第二次提取，提取时间为20～80分钟，过滤，滤液备用；将固体残渣按照上述步骤再进行第三次和第四次提取，第四次提取后，离心取上清液，合并上清液和前三次提取得到的滤液，得提取液；步骤二、将提取液于≤80℃的温度下真空浓缩至步骤一枸杞重量的1～3倍，加入乙醇，使乙醇在提取液中的体积浓度达到70％～85％，在0℃～10℃下静置48小时使沉淀生成，得到枸杞糖蛋白沉淀液；步骤三、将枸杞糖蛋白沉淀液在3000～4500RPM，0℃～10℃条件下离心15min，得到沉淀，将沉淀冷冻干燥，得到枸杞糖蛋白。

【技术特征摘要】
1.一种枸杞糖蛋白的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、将枸杞加入1～10倍重量份的水中，在0℃～10℃下浸泡1～6小时，然后在50℃～80℃下搅拌进行第一次提取，提取时间为20～80分钟，然后过滤，滤液备用；将固体残渣加入1～8倍重量份的水中，在50℃～80℃下搅拌进行第二次提取，提取时间为20～80分钟，过滤，滤液备用；将固体残渣按照上述步骤再进行第三次和第四次提取，第四次提取后，离心取上清液，合并上清液和前三次提取得到的滤液，得提取液；步骤二、将提取液于≤80℃的温度下真空浓缩至步骤一枸杞重量的1～3倍，加入乙醇，使乙醇在提取液中的体积浓度达到70％～85％，在0℃～10℃下静置48小时使沉淀生成，得到枸杞糖蛋白沉淀液；步骤三、将枸杞糖蛋白沉淀液在3000～4500RPM，0℃～10℃条件下离心15min，得到沉淀，将沉淀冷冻干燥，得到枸杞糖蛋白。2.如权利要求1所述的枸杞糖蛋白的制备方法，其特征在于，所述搅拌提取的搅拌速度为2000～3000转/分钟。3.如权利要求1所述的枸杞糖蛋白的制备方法，其特征在于，所述第一次提取枸杞与水的重量比为1:10；第二次提取固体残渣与水的重量比为1:8；第三次提取固体残渣与水的重量比为1:5；第四次提取固体残渣与水的重量比为1:3。4.如权利要求1所述的枸杞糖蛋白的制备方法，其特征在于，所述步骤二中真空浓缩的温度为80℃。5.如权利要求1所述的枸杞糖蛋白的制备方法，其特征在于，所述步骤三中冷冻干燥的的温度为-75～-50℃，冷冻干燥的时间为12～48小...

【专利技术属性】
技术研发人员：龙晓燕，罗学刚，黄家佳，
申请(专利权)人：西南科技大学，
类型：发明
国别省市：四川;51