一种柴辛感冒注射液的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种柴辛感冒注射液的检测方法，该方法包括对黄樟醚的薄层色谱检查和/或含量限度检测，薄层色谱检查：按所含细辛药材量计，当供试品点样量不高于100倍细辛对照药材点样量时，供试品色谱中如显黄樟醚斑点，与细辛对照药材色谱中所显的黄樟醚斑点比较，不得更深；含量限度检测：每1ml注射液含黄樟醚不得超过8μg。本发明专利技术建立的检测方法有利于控制柴辛感冒注射液的安全性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及中药领域，尤其涉及一种柴辛感冒注射液的检测方法。
技术介绍
柴辛感冒注射液收载于国家中成药标准汇编内科肺系(一)分册，它是由柴胡和细辛两味药材制成的，具有解表退热的功效，用于感冒引起的鼻塞流涕，喷嚏、咳嗽、头痛，恶寒发热，全身不适等症。柴辛感冒注射液现行标准(WS-11114(ZD-1114)-2002)中鉴别(1)为对细辛药材的鉴别，规定：柴辛感冒注射液供试品色谱中，与细辛对照药材色谱相应的位置上，应显相同颜色的主斑点。申请人在对多批次产品的检验过程中发现，供试品色谱与对照药材色谱相比较，经常出现少一个斑点或者斑点很不明显的情况，对产品质量的判断造成困扰。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种柴辛感冒注射液的检测方法，该方法有助于提高柴辛感冒注射液的安全可控性。本专利技术中所述的柴辛感冒注射液是由柴胡和细辛两味药材经提取加工制成的灭菌水溶液。本专利技术提供的柴辛感冒注射液的检测方法，包括对黄樟醚的薄层色谱检查和/或含量限度检测，薄层色谱检查：按所含细辛药材量计，当供试品点样量不高于100倍细辛对照药材点样量时，供试品色谱中如显黄樟醚斑点，与细辛对照药材色谱中所显的黄樟醚斑点比较，不得更深；含量限度检测：每1ml注射液含黄樟醚不得超过8μg，优选不超过3μg。黄樟醚薄层色谱检查方法优选：取柴辛感冒注射液20ml，用乙醚振摇提取2次，每次15ml，分取乙醚液，挥至近干，残渣立即加石油醚0.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取细辛对照药材1g，置圆底烧瓶中，连接挥发油测定器，自测定器上端加水，至溢流入烧瓶中为止，再加入石油醚1ml，连接回流冷凝器，加热至沸，并保持微沸2小时，放冷，取石油醚液作为对照药材溶液；照《中国药典》2015年版一部附录ⅥB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照药材溶液1μl～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为15∶1的正己烷—醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中如显黄樟醚斑点，与细辛对照药材色谱中所显的黄樟醚斑点比较，不得更深。黄樟醚含量限度检测可以采用高效液相色谱法、气相色谱法等检测方法。当采用高效液相色谱法测定黄樟醚含量时，可以采用梯度洗脱也可以采用等度洗脱，采用梯度洗脱的色谱条件优选：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，梯度洗脱，洗脱过程流动相A和B的比例变化为：0～20min，A相40％，B相60％；20～30min，A相40％-45％，B相60％-55％；30～35min，A相45％-47％，B相55％-53％；柱温：25-35℃；检测波长为230nm～240nm；采用等度洗脱的色谱条件优选：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比为40:60～44:56的乙腈-水为流动相；柱温：25-35℃；检测波长为230nm～240nm。当采用气相色谱法测定黄樟醚含量时，优选色谱条件为：非极性或中等极性毛细管柱，程序升温：初始温度100℃，保持12分钟，以每分钟5℃的速率升温至130℃，再以每分钟25℃的速率升温至290℃，保持3分钟，进样口温度150℃～300℃，检测器温度200℃～300℃。本专利技术的创新之处在于：本专利技术针对原标准中鉴别(1)存在的供试品色谱中经常比对照药材色谱少一个斑点或是斑点不明显的问题，通过制备薄层色谱和硅胶柱色谱方法进行分离纯化，并采用气质联用分析，确定该斑点对应的化学成分为黄樟醚，并建立了黄樟醚的薄层检查方法和含量限度检测方法，对柴辛感冒注射液中黄樟醚的含量进行了控制，提高了产品的安全可控性。下面将通过实验例对本专利技术作进一步说明。实验例1 化学成分归属研究1、利用薄层色谱收集目标成分将细辛挥发油点于制备硅胶G薄层板上，以正己烷—醋酸乙酯(15∶1)为展开剂，上行法展开，晾干，刮板，洗脱，得目标成分粗产物。2、对目标成分粗产物进行纯化目标成分粗产物，经硅胶柱色谱，正己烷—醋酸乙酯(30∶1)洗脱，薄层色谱检查，合并相同流分，得目标成分。3、目标成分化学成分归属目标成分经GC-MS分析，目标成分的分子量与文献报道的黄樟醚一致，再经薄层色谱、气相色谱和液相色谱检测验证，目标成分确定为黄樟醚。实验例2 液相色谱法测定黄樟醚含量一、样品与试剂黄樟醚对照品；柴辛感冒注射液(批号：20150826-1、20150826-2、20150826-3，江西天施康中药股份有限公司提供)；甲醇(分析纯)二、对照品溶液及样品的配制1.对照品溶液配制：精密称取黄樟醚对照品11.15mg置于10ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度，即得1.115mg/ml储备液Ⅰ；精密量取储备液Ⅰ1ml于50ml容量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，即得22.3μg/ml储备液Ⅱ；精密量取储备液Ⅱ1ml于10ml容量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，即得2.23μg/ml对照品溶液。2.样品的配制：取样品过0.22μm微孔滤膜，取续滤液，即得。三、色谱条件仪器：岛津HPLC(LC-20A)色谱柱：依利特Hypersil ODS C18柱(4.6mm×250mm，5μm)柱温：30℃流速：1ml/min检测波长：235nm进样量：20μl流动相：乙腈(A)-水(B)时间/minA％B％04060204060304555354753四、方法学考察1.系统适用性按上述色谱条件测定，阴性对照无干扰。2.色谱条件的考察2.1流动相的考察仪器：岛津HPLC(LC-20A)色谱柱：依利特Hypersil ODS C18柱(4.6mm×250mm，5μm)柱温：30℃流速：1ml/min检测波长：235nm进样量：20μl流动相如下：选用流动相6时，分离度最好，所以选择流动相6作为测定黄樟醚含量的流动相。2.2 检测波长的选择由于黄樟醚在287nm和235nm处有最大吸收，样品在287nm处黄樟醚的峰有干扰，而在235nm处没有干扰，所以选择检测波长为235nm。3.线性范围分别取对照品储备液Ⅱ2ml,1ml,1ml,2ml,5ml,1ml至5ml，5ml,10ml,25ml,100ml,25ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，定容，摇匀，即将对照品储备液Ⅱ分别稀释2.5,5,10.12.5,20,25倍，按照色谱条件进行检测，记录色谱图。以峰面积(A)为纵坐标(Y)，黄樟醚浓度(X,μg/mL)为横坐标绘制标准曲线，得回归方程Y＝28175X-4643，r＝0.99985。黄樟醚在0.89μg/ml～8.92μg/ml浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系。4.精密度试验取同一对照品溶液，按照色谱条件连续进样6针，测定黄樟醚的保留时间和峰面积，结果见表1.表1精密度试验测定结果小结：精密度试验结果RSD<2％(RSD＝1.30％，n＝6)，表明仪器精密度较好。5..供试品溶液稳定性试验按色谱条件测定供试品溶液一份，分别于0、2、4、8、12、24小时后进样，结果见表2.表2溶液稳定性试验结果小结：供试品溶液在24小时内稳定性不是很好，但是在12小时内稳定性较好，RSD＝1.76％，n＝5。6.加样回收率试验分别精密量取0.6、0.8、0.9ml浓度为2.23μg/ml对照品溶液置2ml量本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种柴辛感冒注射液的检测方法，其特征在于包括对黄樟醚的薄层色谱检查和/或含量限度检测，薄层色谱检查：按所含细辛药材量计，当供试品点样量不高于100倍细辛对照药材点样量时，供试品色谱中如显黄樟醚斑点，与细辛对照药材色谱中所显的黄樟醚斑点比较，不得更深；含量限度检测：每1ml注射液含黄樟醚不得超过8μg。

【技术特征摘要】
1.一种柴辛感冒注射液的检测方法，其特征在于包括对黄樟醚的薄层色谱检查和/或含量限度检测，薄层色谱检查：按所含细辛药材量计，当供试品点样量不高于100倍细辛对照药材点样量时，供试品色谱中如显黄樟醚斑点，与细辛对照药材色谱中所显的黄樟醚斑点比较，不得更深；含量限度检测：每1ml注射液含黄樟醚不得超过8μg。2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述薄层色谱检查方法如下：取柴辛感冒注射液20ml，用乙醚振摇提取2次，每次15ml，分取乙醚液，挥至近干，残渣立即加石油醚0.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取细辛对照药材1g，置圆底烧瓶中，连接挥发油测定器，自测定器上端加水，至溢流入烧瓶中为止，再加入石油醚1ml，连接回流冷凝器，加热至沸，并保持微沸2小时，放冷，取石油醚液作为对照药材溶液；照《中国药典》2015年版一部附录Ⅵ B薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10µl、对照药材溶液1µl～10µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为15∶1的正己烷—醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中如显黄樟醚斑点，与细辛对照药材色谱中所显的黄樟醚斑点比较，不得更深。3.如...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴安明，吴孔松，何杨虎，黄经球，
申请(专利权)人：江西天施康中药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：江西;36