甲异靛在制备抗炎药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了甲异靛在制备抗炎药物中的应用，属于药物化合物和药物技术领域。本发明专利技术利用转基因斑马鱼模型（Tg：zlyz‑EGFP）发现甲异靛具有良好的抗炎活性；并利用甲异靛处理人类单核细胞系THP‑1细胞，发现甲异靛能抑制人类炎性细胞趋化性迁移；这些结果表明甲异靛或含甲异靛的药物组合物可用于制备抗炎药物。含甲异靛的药物组合物包含甲异靛或甲异靛药学上允许的盐和甲异靛药学上可接受的载体。本发明专利技术首次发现甲异靛在炎症模型中显示出较强的抗炎活性，能抑制人类炎性细胞趋化性迁移，其可用于制备抗炎药物。本发明专利技术为研制新一代抗炎药物奠定了基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于药物化合物和药物
，具体涉及甲异靛(Meisoindigo)在制备抗炎药物中的应用。
技术介绍
1976年，中国医学科学院血液学研究所从中药复方“当归芦荟丸”中筛选发现，一种来源于中药青黛的双吲哚类化合物靛玉红是治疗慢性粒细胞白血病(Chronic myeloid leukemia,CML)的有效成分(钱林生，薛艳萍，张小妹，杨天楹，严文伟，王志澄.1991.靛玉红治疗57例慢性粒细胞白血病长期疗效的观察.中华血液学杂志12:125-127.)，其能抑制多种肿瘤细胞的增殖并促进其凋亡过程(Blazevic,T.,E.H.Heiss,A.G.Atanasov,J.M.Breuss,V.M.Dirsch,and P.Uhrin.2015.Indirubin and Indirubin Derivatives for Counteracting Proliferative Diseases.Evid Based Complement Alternat Med 2015:654098.)。基于靛玉红的化学结构，我国科学家将靛玉红的-NH基团(第1位N原子)甲基化为-N-CH3(如图1)，而最终合成衍生物甲异靛(Meisoindigo)，并对甲异靛进行构效关系研究，确定了甲异靛关键药效基团及结构优化潜在的可能性(3)。进一步研究表明，甲异靛较靛玉红的生物活性及水溶性均有较大的提高，其亦能促进细胞凋亡过程(刘兵城，肖志坚.2008.甲异靛对K562细胞bcr-abl信号通路的影响以及诱导细胞凋亡机制研究.中华血液学杂志29:815-818.)，成为临床治疗慢性粒细胞白血病的安全有效的药物。临床试验表明，甲异靛治疗CML的远期缓解效果与抗肿瘤药物羟基脲相当，其与羟基脲联合治疗较单药应用甲异靛或羟基脲获得更好的治疗效果(刘兵城，王一，郝长来，刘英慧，钱林生.2001.慢性粒细胞白血病远期疗效的观察.中华血液学杂志22:61-63.)。由此可见，甲异靛是一种安全有效的治疗慢性粒细胞白血病的小分子药物，然而当前对甲异靛的其他生物学功能及应用知之甚少，尚无甲异靛抗炎作用及相关机制方面的报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供甲异靛或含有甲异靛的药物组合物在制备抗炎药物中的应用。本专利技术的目的通过下述技术方案实现：本专利技术利用转基因斑马鱼模型(Tg：zlyz-EGFP)发现甲异靛具有良好的抗炎活性，25-75μM浓度甲异靛表现出明显抗炎活性。并利用甲异靛处理人类单核细胞系THP-1细胞(人类炎性细胞系)，发现甲异靛能抑制人类炎性细胞趋化性迁移。基于此，甲异靛在炎症疾病的治疗方面具有较好的应用前景，甲异靛或含甲异靛的药物组合物可用于制备抗炎药物。所述的含甲异靛的药物组合物包含甲异靛或甲异靛药学上允许的盐和甲异靛药学上可接受的载体。所述的甲异靛药学上允许的盐，可以列举例如甲异靛与盐酸、硝酸、硫酸、磷酸、氢溴酸等无机酸，或者马来酸、富马酸、酒石酸、乳酸、柠檬酸、乙酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、己二酸、棕榈酸、单宁酸等有机酸，或者锂、钠、钾等碱金属，钙、镁等碱土金属，或者赖氨酸等碱性氨基酸生成的盐。所述的甲异靛药学上可接受的载体是一种或多种固体、半固体和液体稀释剂、填料以及药物制品辅料。甲异靛用作药物时，可以直接使用，或者以含甲异靛的药物组合物的形式使用。该药物组合物含有0.1-99％，优选为0.5-90％的甲异靛或甲异靛药学上允许的盐，其余为药学上可接受的、对人和动物无毒和惰性的可药用载体。用甲异靛或含甲异靛的药物组合物制备的抗炎药物可采用的剂型是惯用的盖伦给药剂型，例如：药膏、片剂、丸剂、栓剂乳剂、输入液和注射液等。这些剂型按照众所周知的方法，使用传统的添加剂和赋型剂制得。由此制得的药物根据需要可按局部、非肠道、口服等途径给药。甲异靛或含甲异靛的药物组合物的施用量可根据用药途径、患者的年龄、体重、所治疗的疾病的类型和严重程度等变化，甲异靛日剂量可以是0.01-10mg/kg体重，优选0.1-5mg/kg体重；可以一次或多次施用。本专利技术的优点和有益效果是：本专利技术首次发现甲异靛在炎症模型中显示出较强的抗炎活性，能抑制人类炎性细胞趋化性迁移，其为一新颖的潜在的抗炎活性化合物，可用于制备抗炎药物。本专利技术为研制新一代抗炎药物奠定了基础。附图说明图1是甲异靛(Meisoindigo)的化学结构图。图2是转基因斑马鱼Tg：zlyz-EGFP胚胎尾部炎性切口与药物孵育后的荧光显微图，M为甲异靛缩写。图3是图2中方框区域炎性细胞数目统计图，M为甲异靛缩写。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术作进一步详细的描述，但本专利技术的实施方式不限于此，其他的任何未背离本专利技术的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本专利技术的保护范围之内。抗炎活性试验例：此前研究显示，转基因斑马鱼系Tg：zlyz-EGFP胚胎期炎性细胞(中性粒细胞和巨噬细胞等)能特异性表达GFP蛋白，利用荧光显微镜可以活体观察胚胎炎性细胞生物学行为(ZhangY,Bai XT,Zhu KY,Jin Y,Deng M,Le HY,Fu YF,Chen Y,Zhu J,Look AT,Kanki J,Chen Z,Chen SJ,Liu TX(2008)In vivo interstitial migration of primitive macrophages mediated by JNK-matrix metalloproteinase 13signaling in response to acute injury.J Immunol 181:2155-2164)。在该斑马鱼胚胎尾部用无菌刀片制造一个炎性切口，将诱发斑马鱼胚胎切口处的炎性反应，炎性细胞将向切口处迁移，通过统计斑马鱼炎性细胞迁移至切口处的数目，定量评价炎性反应程度。具体的实验方法是：收集转基因斑马鱼Tg：zlyz-EGFP发育时相为3天的胚胎，用无菌刀片于胚胎尾部制造一个炎性切口，然后将切尾后的斑马鱼胚胎与25、50、75μM甲异靛或空白对照(Vehicle，为含有0.5％DMSO的斑马鱼胚胎培养基(60μg/mL“Instant”海盐))孵育6h，最后拍照并对高度炎性区域中的炎性细胞数目进行统计，结果见图2和图3。图2显示药物处理6小时后，炎性细胞迁移至切口附近的状态；图3为各组胚胎尾部高度炎性区域(即图2方框区域)炎性细胞数目统计图。图2结果显示，25、50、75μM甲异靛浓度处理斑马鱼胚胎，迁移至高度炎性区域的炎性细胞的数目随着药物浓度的增高而逐渐减少；图3显示甲异靛对炎症细胞迁移的抑制作用具有剂量依赖性，且有统计学差异。由此可见，甲异靛能有效的抑制斑马鱼的炎性反应，具有抗炎活性，具备制备抗炎药物的潜在可能性。利用甲异靛处理人类单核细胞系THP-1细胞(人类炎性细胞系)，发现甲异靛对趋化因子MCP-1诱导的THP1细胞趋化性迁移具有显著性的抑制作用，表明甲异靛能抑制人类炎性细胞趋化性迁移，与斑马鱼胚胎中的结果一致，提示甲异靛具有潜在的抗炎作用，可用于制备抗炎药物。制剂实施例1：将甲异靛利用有机酸(酒石酸、柠檬酸、甲酸、乙二酸等)或无机酸(盐酸、硫酸、磷酸等)本文档来自技高网...

【技术保护点】
甲异靛在制备抗炎药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.甲异靛在制备抗炎药物中的应用。2.含甲异靛的药物组合物在制备抗炎药物中的应用。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述的组合物包含甲异靛和甲异靛药学上可接受的载体。4.根据权利要求2所述的应用，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：叶柏新，
申请(专利权)人：武汉大学，
类型：发明
国别省市：湖北;42