本发明专利技术属于环境污染物生物处理技术领域，具体公开了一株可降解多环芳烃的新鞘脂菌（Novosphingobium sp.）1MP25菌株，所述新鞘脂菌1MP25菌株于2016年7月13日保藏于广东省微生物菌种保藏中心（GDMCC），保藏编号为GDMCC No：60058。本发明专利技术提供的1MP25菌株能够显著快速降解烷基化多环芳烃 1‑甲基菲，其在14天后可以实现对1‑甲基菲的完全降解，显示出较强的烷基化多环芳烃降解能力，在生物降解原油污染严重的土壤和水体中等领域中具有很好的应用前景。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于环境污染物生物处理
，更具体地，涉及一株可降解多环芳烃的新鞘脂菌Novosphingobium sp.1MP25菌株。
技术介绍
多环芳烃是指两个或两个以上苯环以线状、角状或簇状排列的多元环化合物，是有机物不完全燃烧或高温裂解的副产物。广泛存在于原油、煤炭等生物燃料中，具有潜在的致畸性、致癌性。而且，多环芳烃的结构稳定，半衰期长，一般很难被生物利用。多环芳烃在自然界中的有多种可能的去除途径，例如光氧化、化学氧化、生物积累、土壤吸附和微生物降解等。已有大量研究证明微生物降解是去除环境中多环芳烃的最主要途径。微生物长期生活在多环芳烃污染的土壤中，经过自然驯化，逐渐进化出以多环芳烃作为碳源获取能源的能力，得以生长和繁殖，从而减少多环芳烃对生态环境的影响。在环境中，烷基化的多环芳烃的含量占总多环芳烃的很大一部分，特别是在原油污染严重的土壤和水体中。而烷基化多环芳烃因其烷基化基团的存在，使其更加难以被微生物利用，因此，具有降解烷基化多环芳烃能力的新菌种是非常具有研究价值和开发潜力的。新鞘脂菌属的菌种已被报道具有降解多种有机污染物的能力，如母体多环芳烃(参见文献Balkwill等，1997；Gao等，2015；Yuan等，2009；Suzuki和Hiraishi，2007；Sohn等，2004；Liu等，2005)，氯乙酰胺，六六六等。但此前尚未发现该属菌种具有降解烷基化多环芳烃的能力。
技术实现思路
本专利技术的目的在于根据现有技术中的不足，提供了一株可降解多环芳烃的新鞘脂菌(Novosphingobium sp.)1MP25菌株。本专利技术的目的通过以下技术方案实现：本专利技术提供了一株可降解多环芳烃的新鞘脂菌(Novosphingobium sp.)1MP25菌株，所述新鞘脂菌1MP25菌株于2016年7月13日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，保藏编号为GDMCC No：60058，保藏地址：中国广州市先烈中路100号大院59号楼5楼广东省微生物研究所。新鞘脂菌1MP25菌株属于变形菌门，α-变形菌纲，鞘脂单胞菌目，新鞘脂菌属。本专利技术的1MP25菌株是从广东省广州市广州石化厂区的废油污染土壤中筛选、分离、纯化获得，鉴定结果显示，所述新鞘脂菌1MP25菌株是革兰氏阴性菌，在LB培养基平板上菌落呈圆形，湿润，透明，呈黄色；透射电镜下细胞呈杆状，长2.0±0.4μm，宽0.8±0.2μm，有鞭毛。进一步地，所述新鞘脂菌1MP25菌株能够降解的多环芳烃为烷基化多环芳烃。更进一步地，所述烷基化多环芳烃为1-甲基菲。另外，一种由上述1MP25菌株制备的可以降解烷基化多环芳烃的微生物制剂也在本专利技术的保护范围之内。本专利技术所提供的新鞘脂菌1MP25菌株可以快速降解烷基化多环芳烃1-甲基菲，14天可完全去除无碳源培养基中的1-甲基菲，显示了较强的降解效果。本专利技术的新鞘脂菌1MP25菌株应用于降解多环芳烃的方法，包括如下步骤：S1：将所述新鞘脂菌1MP25菌株进行培养，得到培养液；S2：将S1中培养液离心去除上清后，用生理盐水重悬浮成菌悬液，加入到含多环芳烃的待处理样品中进行降解处理。进一步优选地，S2中的菌悬液用生理盐水稀释到吸光度0.5～2，再加入到待处理样品中进行降解。更优选地，S2中的菌悬液用生理盐水稀释到吸光度为1.0，再加入到待处理样品中进行降解。优选地，S2中的菌悬液和待处理样品的体积比为0.2～1：25。更优选地，S2中的菌悬液和待处理样品的体积比为0.5：25。优选地，所述待处理样品中多环芳烃的溶度为80～120mg/L。更优选地，所述待处理样品中多环芳烃的溶度为100mg/L。优选地，所述多环芳烃为烷基化的多环芳烃。优选地，步骤S1所述培养所用的培养基为LB培养基。优选地，步骤S1所述培养的时间为20～30h。更优选地，步骤S1所述培养的时间为24h。优选地，步骤S2离心所用方法为5000～8000g离心8～15min。更优选地，步骤S2离心所用方法为6000g离心10min。与现有技术相比，本专利技术具有以下优点及有益效果：本专利技术提供了一株可降解多环芳烃的新鞘脂菌1MP25菌株，所述菌株能够显著降解烷基化多环芳烃1-甲基菲，其在14天后可以实现对1-甲基菲的完全降解，显示出较强的烷基化多环芳烃降解能力，在生物降解原油污染严重的土壤和水体中等领域中具有很好的应用前景。附图说明图1为1MP25菌株的细胞透射电镜图。图2为1MP25菌株Neighbour-Joining算法系统进化树图，图2中黑点标注的分支表示该分支在Maximum-likelihood算法中依然保守。图3为1MP25菌株的极性脂组分图。图4为1MP25菌株对1-甲基菲的降解曲线图。具体实施方式以下结合具体实施例和附图来进一步说明本专利技术，但实施例并不对本专利技术做任何形式的限定。除非特别说明，本专利技术采用的试剂、方法和设备为本
常规试剂、方法和设备。除非特别说明，本专利技术所用试剂和材料均为市购。实施例1新鞘脂菌1MP25菌株的分离、培养与鉴定1、菌株分离与培养(1)收集菌落：取新鲜土壤样品(采集地：广东省广州市广州石化厂区的废油污染土壤)5g至50ml灭菌的2.8g/L焦磷酸钠溶液中，在摇床中(150rpm，28℃)摇晃过夜。(2)驯化菌群：吸取上述菌液5ml至含有1-甲基菲100mg/L的45ml MS培养基(Mineral salts medium)中，进行驯化，150rpm，28℃培养14天。14天后吸取0.5ml接入新的1-甲基菲MS培养基中，重复8次，得到菌群G8。(3)获得纯菌株：将菌群G8涂板，得到单菌落，选取其中对1-甲基菲降解效果最好的单菌落，经过进一步涂板纯化后，得到一株纯菌株，命名为1MP25菌株。菌株的扩大培养用LB液体培养基，长期保存在-80℃冰箱中，保护剂为含有40％甘油的LB培养基。2、菌株形态学鉴定(1)1MP25菌株在LB平板上菌落呈圆形，湿润，透明，黄色。(2)革兰氏染色：KOH-Test法，结果显示，该菌株为革兰氏阴性菌。(3)透射电镜：JEM-100CXII，日本电子株式会社。采用负染法(0.5％磷钨酸盐)对样品进行处理。透射电镜下观察，细胞呈杆状，长2.0±0.4μm，宽0.8±0.2μm，有鞭毛(透射电镜图如附图1所示)。3、分子鉴定(1)首先进行16S rRNA测序：用DNA提取试剂盒提取1MP25菌株的基因组DNA后，对16S rRNA基因片段进行扩增，送到生物公司进行测序。获得1MP25菌株的16S rRNA的序列。(2)在EzTaxon数据库(http://www.ezbiocloud.net/eztaxon)中收集所有新鞘脂菌属的菌种16S rRNA的序列，并选取一个其他属的菌种作为参考(Rhodospirillum rubrum ATCC 11170T)。所有的序列采用软件CLUSTAL_X进行对齐和剪切，采用软件MEGA 5.0构建进化树，算法为Neighbour-joining和Maximum-likelihood算法(Bootstrap：1000replications)。利用序列比对进行系统发育分析，进化树见图2。结果显示，该1MP25菌株属于新本文档来自技高网...
【技术保护点】
一株可降解多环芳烃的新鞘脂菌（Novosphingobium sp.）1MP25菌株，其特征在于，所述新鞘脂菌1MP25菌株于2016年7月13日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No：60058。
【技术特征摘要】
1.一株可降解多环芳烃的新鞘脂菌（Novosphingobium sp.）1MP25菌株，其特征在于，所述新鞘脂菌1MP25菌株于2016年7月13日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No：60058。2.根据权利要求1所述的可降解多环芳烃的新鞘脂菌（Novosphingobium sp.）1MP25 菌株，其特征在于，所述多环芳烃为烷基化多环芳烃。3. 根据权利要求2所述的可降解多环芳烃的新鞘脂菌（Novosphingobium sp.）1MP25 ...
【专利技术属性】
技术研发人员：沙莎，林里，陈保卫，王晓玮，杨丽华，罗丽娟，原珂，钟佳南，王雯雯，栾天罡，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：广东;44
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。