一种红豆杉的组织培育方法技术

本发明专利技术公开了一种红豆杉的组织培育方法，包括以下步骤：（1）选取东北红豆杉新生枝条的中层细胞，处理成2cm的组织切片，经过消毒在B5培养基中培养15‑20天，形成10‑12cm的组织，选取中间5‑6cm进行下一步培养；（2）将上述愈伤组织移植到生根培养基中进行生根培养，并且前3天保持黑暗环境，3天之后，保持光照时间12‑14h/d，直到长出3cm的主根。本发明专利技术提供的一种红豆杉的组织培育方法，选用东北红豆杉新生枝条的中层细胞，紫杉醇含量丰富，并且中层细胞增殖能力旺盛，使得红豆杉的组织培育周期短，成活率高；选用的培养基简单易得，适合大规模培育红豆杉幼苗。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物培育
，具体涉及一种红豆杉的组织培育方法。
技术介绍
从红豆杉植物中提取的紫杉醇是近年来开发的一种新型抗癌药物，对癌症有较好的治疗效果，同时红豆杉是国家一级保护濒危珍惜物种，尤其是野生红豆杉已经被滥砍滥伐消耗殆尽。由于市场上对抗癌药物的巨大需求，红豆杉的人工种植显得尤为重要。目前红豆杉的人工培育方法主要分为三种:先育种植法、组织培养法、人工扦插法。采用先育种植法和人工扦插法会受到种苗资源的限制，加之发芽率和成活率低，生长周期缓慢，严重影响红豆杉的产业化生产。组织培养法利用植物细胞的全能性和可克隆性，适合大批量的生产和培育特定的植物组织和幼苗。为了满足市场对于红豆杉的大规模需求，采用合适的组织培养法大规模快速培育红豆杉幼苗显得格外重要。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术方案是提供一种红豆杉的组织培育方法，具有周期短，成活率高、适合大规模培育的优良特点。为了实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：一种红豆杉的组织培育方法，其中，包括以下步骤：（1）选取东北红豆杉新生枝条的中层细胞，处理成2cm的组织切片，经过消毒在B5培养基中培养15-20天，形成10-12cm的组织，选取中间5-6cm进行下一步培养；（2）将上述愈伤组织移植到生根培养基中进行生根培养，并且前3天保持黑暗环境，3天之后，保持光照时间12-14h/d，直到长出3cm的主根。上述的红豆杉的组织培育方法，其中，所述消毒先用3%的高锰酸钾进行擦拭，再用90%的乙醇溶液擦拭。上述的红豆杉的组织培育方法，其中，所述B5培养基中含有0.3-0.5mg/L的1-萘乙酸和1.3-1.5%的水解络蛋白，并且保持温度为20-22℃，室内湿度为60-62%。上述的红豆杉的组织培育方法，其中，所述生根培养基中含有2-3mg/L的1-萘乙酸，1-2mg/L的吲哚乙酸，0.5-1.0mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸。本专利技术相比现有技术的有益效果为：选用东北红豆杉新生枝条的中层细胞，紫杉醇含量丰富，并且中层细胞增殖能力旺盛，使得红豆杉的组织培育周期短，成活率高；选用的培养基简单易得，适合大规模培育红豆杉幼苗。具体实施方式为了加深对本专利技术的理解，下面结合具体实施例进一步阐述本专利技术，以下实施例仅用来解释本专利技术，并不构成对本专利技术保护范围的限定。实施例1（1）选取东北红豆杉新生枝条的中层细胞，处理成2cm的组织切片，先用3%的高锰酸钾进行擦拭，再用90%的乙醇溶液擦拭进行消毒；在B5培养基中加入0.3mg/L的1-萘乙酸和1.5%的水解络蛋白，并且保持温度为20℃，室内湿度为62%，将消毒后的组织切片在上述B5培养基中培养15天，形成12cm的组织，选取中间5cm进行下一步培养；（2）在生根培养基中加入2mg/L的1-萘乙酸， 2mg/L的吲哚乙酸，0.5mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸；将上述愈伤组织移植到生根培养基中进行生根培养，并且前3天保持黑暗环境，3天之后，保持光照时间14h/d，直到长出3cm的主根。实施例2（1）选取东北红豆杉新生枝条的中层细胞，处理成1cm的组织切片，先用3%的高锰酸钾进行擦拭，再用90%的乙醇溶液擦拭进行消毒；在B5培养基中加入0.5mg/L的1-萘乙酸和1.3%的水解络蛋白，并且保持温度为22℃，室内湿度为60%，将消毒后的组织切片在上述B5培养基中培养20天，形成10cm的组织，选取中间6cm进行下一步培养；（2）在生根培养基中加入3mg/L的1-萘乙酸，1mg/L的吲哚乙酸， 1.0mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸；将上述愈伤组织移植到生根培养基中进行生根培养，并且前3天保持黑暗环境，3天之后，保持光照时间12h/d，直到长出30mm的主根。实施例3（1）选取东北红豆杉新生枝条的中层细胞，处理成2cm的组织切片，先用3%的高锰酸钾进行擦拭，再用90%的乙醇溶液擦拭进行消毒；在B5培养基中加入0.4mg/L的1-萘乙酸和1.4%的水解络蛋白，并且保持温度为21℃，室内湿度为61%，将消毒后的组织切片在上述B5培养基中培养17天，形成11cm的组织，选取中间5-6cm进行下一步培养；（2）在生根培养基中加入2.5mg/L的1-萘乙酸，1.5mg/L的吲哚乙酸，0.7mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸；将上述愈伤组织移植到生根培养基中进行生根培养，并且前3天保持黑暗环境，3天之后，保持光照时间13h/d，直到长出3cm的主根。本专利技术的有益效果为：（1）选用东北红豆杉新生枝条的中层细胞，紫杉醇含量丰富，并且中层细胞增殖能力旺盛，使得红豆杉的组织培育周期短，成活率高；（2）选用的培养基简单易得，适合大规模培育红豆杉幼苗。应该理解的是，本专利技术的实施例仅仅是用于说明本专利技术，而不是对本专利技术的限制，在不脱离本专利技术精神和范围的前提下，本专利技术还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本专利技术范围内。本专利技术要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种红豆杉的组织培育方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）选取东北红豆杉新生枝条的中层细胞，处理成2cm的组织切片，经过消毒在B5培养基中培养15‑20天，形成10‑12cm的组织，选取中间5‑6cm进行下一步培养；（2）将上述愈伤组织移植到生根培养基中进行生根培养，并且前3天保持黑暗环境，3天之后，保持光照时间12‑14h/d，直到长出3cm的主根。

【技术特征摘要】
1.一种红豆杉的组织培育方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）选取东北红豆杉新生枝条的中层细胞，处理成2cm的组织切片，经过消毒在B5培养基中培养15-20天，形成10-12cm的组织，选取中间5-6cm进行下一步培养；（2）将上述愈伤组织移植到生根培养基中进行生根培养，并且前3天保持黑暗环境，3天之后，保持光照时间12-14h/d，直到长出3cm的主根。2.根据权利要求1所述的红豆杉的组织培育方法，其特征在于，所述消毒先用...

【专利技术属性】
技术研发人员：夏学云，
申请(专利权)人：夏学云，
类型：发明
国别省市：重庆;50