用作糖尿病预测生物标志物的精氨酸加压素激素原制造技术

本发明专利技术涉及用作糖尿病预测生物标志物的精氨酸加压素激素原。更具体而言，本发明专利技术的主题是用于预测对象发生代谢综合征和/或糖尿病的风险和用于诊断代谢综合征的测定方法和体外方法，其包含测定对象样品中的精氨酸加压素激素原或其片段的水平。

【技术实现步骤摘要】
本申请为国际申请日2009年10月29日、国际申请号PCT/EP2009/007923于2011年5月3日进入中国国家阶段、申请号200980143882.4、专利技术名称“用作糖尿病预测生物标志物的精氨酸加压素激素原”的分案申请。专利
本专利技术属于预后生物标志物和预后测定方法领域。具体来说，本申请涉及糖尿病的预测和代谢综合征的诊断。
技术介绍
精氨酸加压素(AVP)，也称为抗利尿激素(ADH)，在下丘脑中产生，并在高血浆重量克分子渗透压浓度、低血浆体积和低血压的情况下从神经垂体腺释放。AVP结合到三种不同受体上(V1aR、V1bR和V2R)。V1aR广泛表达(Nature 1993:356:523-526)，而V1bR和V2R更特异地分别表达在垂体腺和肾脏集合管中(Nature 1992:336-339和FEBS Lett 1994:356:215-220)。AVP的抗利尿效应通过V2R介导，并且V2R的药物阻断在低钠血症和心力衰竭的治疗中具有有利效应，而可在临床上用于出血和低血压病症的AVP的血栓前和血管收缩效应，主要通过V1aR介导。此外，已经提出AVP的作用与调节ACTH释放(V1bR)、刺激肝脏糖原生成(V1aR)以及刺激胰岛素和胰高血糖素分泌(V1aR)相关(Morel等，Nature 1992；356(6369):523-6；de Keyzer等，FEBS letters 1994；356(2-3):215-20；Ventura等，Journal of molecular endocrinology 1999；22(3):251-60)。以前对人类和动物模型的研究，已经表明了AVP系统在葡萄糖体内平衡、胰岛素抗性和糖尿病中的作用。在具有控制不良的糖尿病和高重量克分子渗透压浓度的患者中，血浆AVP显著升高(Lolait等，Nature 1992；357(6376):336-9)，并且在健康对象中，AVP灌输导致血糖水平增加(Schrier等，N Engl J Med 2006；355(20):2099-112)。缺少V1aR的小鼠显示出受损的葡萄糖耐受性、胰岛素抗性和升高的AVP水平(Gheorghiade等，Jama 2007；297(12):1332-43；Federici等，Annals of medicine 2007；39(5):346-58)，而缺少V1bR的小鼠具有与正常小鼠相比较低的禁食血浆葡萄糖水平和胰岛素灵敏性升高的相反表型(Dunser等，Circulation 2003；107(18):2313-9)。血管加压素基因编码前体蛋白(pre-pro-AVP)，其包含19个氨基酸的信号序列、精氨酸加压素和两个相关蛋白，即后叶激素运载蛋白II和一种糖肽——和肽素。和肽素是AVP前体C-端的无生物活性的切割产物，并以与AVP等摩尔的量产生。然而，与AVP相反，和肽素稳定、具有长的半衰期、不与血小板结合，因此与AVP相比以明显更高的浓度在血浆中发现，并且已经提出将它作为评估血管加压素释放的可替选的诊断靶(Struck J,Morgenthaler NG,Bergmann A.“和肽素，一种源自于血管加压素前体的稳定的肽，在脓毒症患者的血清中升高”(Copeptin,a stable peptide derived from the vasopressin precursor,is elevated in serum of sepsis patients)，Peptides.2005Dec；26(12):2500-4)。已经将AVP描述为糖尿病的诊断标志物，并且使用I型糖尿病动物模型，已经了解到AVP水平作为急性或慢性应激物与糖尿病相关(Sun Shin Yi等，“在2型糖尿病大鼠的下丘脑室旁核和视上核中精氨酸加压素(Avp)的增强表达”(Enhanced expressions of arginine vasopressin(Avp)in the hypothalamic paraventricular and supraoptic nucleic of type 2diabetic rats,Neurochem Res(2008)33:833-841)。
技术实现思路
本专利技术人令人吃惊地发现，在精氨酸加压素(AVP)激素原或其片段的相对增加的水平与存在代谢综合征和发生糖尿病的风险之间存在关联。在此背景下，由本专利技术提供了包含至少一种单克隆抗体的灵敏精确的和肽素测定方法。因此，本专利技术的主题是用于预测对象发生糖尿病和/或代谢综合征的风险，或用于鉴定具有发生糖尿病和/或代谢综合征的高风险的对象，或用于诊断对象代谢综合征的体外方法，所述方法包含下列步骤：a.提供来自所述对象的样品，b.测定所述样品中精氨酸加压素激素原或其片段的水平，c.使用精氨酸加压素激素原或其片段的所述水平预测对象发生糖尿病和/或代谢综合征的可能性，或用于从其推断出所述对象发生糖尿病和/或代谢综合征的风险，或用于诊断所述对象的代谢综合征。本专利技术的另一个主题是灵敏精确的和肽素测定方法。具体实施方式本专利技术涉及用于预测对象发生糖尿病和/或代谢综合征的风险，或用于鉴定具有发生糖尿病和/或代谢综合征的高风险的对象，或用于诊断对象代谢综合征的方法，所述方法包含下列步骤：a.提供来自所述对象的样品，b.测定所述样品中精氨酸加压素激素原或其片段的水平，c.使用精氨酸加压素激素原或其片段的所述水平预测对象发生糖尿病和/或代谢综合征的可能性，或用于从其推断出所述对象发生糖尿病和/或代谢综合征的风险，或用于诊断所述对象代谢综合征。在本文中，“使用精氨酸加压素激素原或其片段的所述水平预测对象发生糖尿病和/或代谢综合征的可能性，或用于从其推断出所述对象发生糖尿病和/或代谢综合征的风险，或用于诊断所述对象代谢综合征”，可以具有“将精氨酸加压素激素原或其片段的所述水平与对象发生糖尿病和/或代谢综合征或与诊断所述对象代谢综合征相关联”的意义。在本专利技术所有情况的优选实施方案中，所述对象是表观健康的。当在本文中使用时，“表观健康的”是指个体不患有糖尿病。在某些实施方案中，表观健康的对象患有代谢综合征。本专利技术的方法可用于诊断对象是否患有代谢综合征。当在本文中使用时，术语“对象”是指活的人类或非人类生物体。在本文中，优选情况下对象是人类对象。优选情况下，所述对象是非糖尿病人。在非常特定的实施方案中，表观健康的对象是以前没有或没有意识到具有心血管或冠状动脉事件或心力衰竭或未患有心血管疾病的个体。冠状动脉事件被定义为致死性或非致死性急性冠状动脉综合征，包括心肌梗塞或由缺血性心脏病引起的死亡。心血管事件被定义为致死性或非致死性急性冠状动脉综合征，包括心肌梗塞、致死性或非致死性中风或由心血管疾病引起的死亡。此外，在非常特定的实施方案中，表观健康的对象可以不患有急性传染病。在另一个非常特定的实施方案中，表观健康的对象可能患有心血管疾病和/或可能已具有心血管或冠状动脉事件或心力衰竭。在某些实施方案中，他们可能患有传染病。在一个实施方案中，对象表现出受损的禁食血糖(受损的禁食葡萄糖)，即血液中的禁食葡萄糖水平(禁食血糖(FBG)或禁食血液糖(本文档来自技高网...

【技术保护点】
精氨酸加压素激素原或其片段在制备通过包括下列步骤的方法用于预测对象发生糖尿病和/或代谢综合征的风险，或用于鉴定具有发生糖尿病和/或代谢综合征的高风险的对象的试剂中的应用，其中所述对象是非糖尿病人并且是表观健康的，并且其中精氨酸加压素激素原的片段不是成熟的AVP：a.提供来自所述对象的样品，b.测定所述样品中精氨酸加压素激素原或其片段的水平，c.使用精氨酸加压素激素原或其片段的所述水平预测对象发生糖尿病和/或代谢综合征的可能性，或用于从其推断出所述对象发生糖尿病和/或代谢综合征的风险。

【技术特征摘要】
2008.10.31 EP 08168096.91.精氨酸加压素激素原或其片段在制备通过包括下列步骤的方法用于预测对象发生糖尿病和/或代谢综合征的风险，或用于鉴定具有发生糖尿病和/或代谢综合征的高风险的对象的试剂中的应用，其中所述对象是非糖尿病人并且是表观健康的，并且其中精氨酸加压素激素原的片段不是成熟的AVP：a.提供来自所述对象的样品，b.测定所述样品中精氨酸加压素激素原或其片段的水平，c.使用精氨酸加压素激素原或其片段的所述水平预测对象发生糖尿病和/或代谢综合征的可能性，或用于从其推断出所述对象发生糖尿病和/或代谢综合征的风险。2.权利要求1的应用，其中所述对象是禁食血糖低于6.1mmol/L但高于5.4mmol/L的非糖尿病人。3.权利要求1的应用，其中所述对象是禁食血糖低于5.4mmol/L的对象。4.权利要求1-3任一项的应用，其中确定对象发生II型糖尿病的风险。5.权利要求1-4任一项的应用，其中对象发生糖尿病和/或代谢综合征的风险的预测，通过附加地测定并使用至少一种实验室参数或其他标志物的水平来改进，所述其他标志物选自：禁食血液或血浆葡萄糖、甘油三酯、HDL胆固醇或其亚级分、LDL胆固醇或其亚级分、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C、胰岛素、CRP、A型和B型利尿钠肽以及包括ANP、proANP、NT-proANP、MR-proANP、BNP、proBNP、NT-proBNP的它们的前体及其片段、GDF15、ST2、降钙素原及其片段、肾上腺髓质素原及其包括ADM、PAMP、MR-proADM、CT-proADM的片段、内皮素原-1及其包括CT-proET-1、NT-proET-1、大内皮素-1和内皮素-1的片段。6.权利要求1-5任一项的应用，其中附加地测定选自下列的至少一种临床参数：年龄、性别、收缩压、舒张压、抗高血压治疗(AHT)、体重指数、腰围、腰臀比、当前吸烟、糖尿病遗传性和以前的心血管疾病(CVD)。7.前述权利要求任一项的应用，其中精氨酸加压素激素原或其片段的水平单独地或与其他预后有用的实验室或临床参数组合，通过可以选自下列可选方案的方法，用于预测对象发生糖尿病和/或代谢综合征的风险：-与表观健康对象群体中全部预定样品中的精氨酸加压素激素原或其片段的水平的中位数进行比较，-与表观健康对象群体中全部预定样品中的...

【专利技术属性】
技术研发人员：约阿希姆·斯特鲁克，安德烈亚斯·贝格曼，奥勒·米兰德，克里斯托弗·牛顿陈，托马斯·J·王，
申请(专利权)人：BRAHMS有限公司，通用医疗公司，
类型：发明
国别省市：德国;DE