藏红花脱毒种球的生产方法技术

技术编号:14050083 阅读:142 留言:0更新日期:2016-11-24 04:13
一种藏红花脱毒种球的生产方法,包括如下步骤:一,用氯气对藏红花种球进行表面消毒,然后接种到生长培养基中;二,种球发芽后切取只带一个叶缘基的生长点进行脱毒处理,然后接种到生长培养基中成苗;三,生长点成苗后进行病毒检测;四,选择不带病毒的植株,继代到诱导培养基中,产生微型种球;五,将微型种球接种到含有扩繁培养基的生物反应器内扩繁;六,将扩繁后得到的微型种球放4℃保存备用。采用本发明专利技术的生产方法,藏红花脱毒效果好,脱毒材料繁殖速度快在生产上有较大的应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物工程技术,尤其是涉及一种藏红花脱毒种球的生产方法
技术介绍
藏红花又名西红花、番红花,属名贵紧缺中药材,因含有藏红花素而备受关注,被誉为世界上最贵的药用植物、世界上最好的染料、世界上最高档的香料。国家中医药管理局列为重点发展的中药材品种。近年来藏红花在医疗、保健、化工等方面的价值被全面开发,由于用量巨大,市场供不应求,主要依赖进口。藏红花为三倍体,不结实,所以采用无性繁殖,“种球”在繁殖过程中很容易感染植物病毒,一经染毒很难去除而且会越来越严重,极大降低了藏红花的产量和质量。经对现有技术的检索发现,藏红花脱毒后增产效果明显,但藏红花生长点剥离困难,另外微型种球的生长缓慢,这成为了限制藏红花脱毒技术大面积推广的一个瓶颈。
技术实现思路
本专利技术的目的,就是为了解决上述问题,提供一种藏红花脱毒种球的生产方法。为了达到上述目的,本专利技术采用了以下技术方案:一种藏红花脱毒种球的生产方法,包括如下步骤:步骤一,用氯气对藏红花种球进行表面消毒,然后接种到生长培养基中;步骤二,种球发芽后切取只带一个叶缘基的生长点进行脱毒处理,然后接种到生长培养基中成苗;步骤三,生长点成苗后进行病毒检测;步骤四,选择不带病毒的植株,继代到诱导培养基中,产生微型种球;步骤五,将微型种球接种到含有扩繁培养基的生物反应器内扩繁;步骤六,将扩繁后得到的微型种球放4℃保存备用。所述生长培养基为添加1-2mg/L赤霉素和0.8-1.5mg/L 6-苄氨基嘌呤的MS培养基。所述诱导培养基为添加10-15mg/L病毒唑的MS培养基。所述微型种球的扩繁方法为:使用鼓泡式生物反应器进行连续培养。所述种球的扩繁培养基为添加1-2.0mg/L 6-苄氨基嘌呤的MS培养基。上述MS培养基为Murashige和Skoog(1962)公开的培养基,其中1/2MS培养基为大量元素减半的MS培养基。MS培养基在现有的生物以及农业等领域有着广泛的应用。采用本专利技术的生产方法,藏红花脱毒效果好,脱毒材料繁殖速度快,在生产上有较大的应用价值。具体实施方式下面通过实施例对本专利技术作进一步说明。实施例的藏红花种子来自中国药科大学。实施例所用MS培养基采用Murashige和Skoog(1962)公开的培养基,具体成分如表1所示。表1实施例:步骤一,用75毫升次氯酸钠与25毫升浓盐酸生成的氯气对藏红花种球表面消毒20分钟后,接种到添加1mg/L赤霉素和1mg/L 6-苄氨基嘌呤的MS培养基中,获得无菌材料;步骤二,种球发芽后切取带一个叶原基的生长点,接种到添加1mg/L赤霉素和1mg/L 6-苄氨基嘌呤的MS培养基中成苗;步骤三,生长点成苗后用PCR和扫描电镜检测进行病毒检测;步骤四,选择不带病毒的植株,转入添加15mg/L病毒唑的MS培养基生产微型种根;步骤五,将扩繁后的微型种球接种到鼓泡式生物反应器内扩繁,扩繁培养基为添加1.5mg/L 6-苄氨基嘌呤的MS培养基;本实施例中,12个种球表面消毒成功,生长点剥离后得到55个脱毒苗,诱导出的脱毒种球用5升的鼓泡式反应器进行扩繁,通气速率为0.3vvm。微球型根在反应器中27天内数量增加了两倍,并于4℃下保存6个月后发芽率达到100%。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种藏红花脱毒种球的生产方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤一,用氯气对藏红花种球进行表面消毒,然后接种到生长培养基中;步骤二,种球发芽后切取只带一个叶缘基的生长点进行脱毒处理,然后接种到生长培养基中成苗;步骤三,生长点成苗后进行病毒检测;步骤四,选择不带病毒的植株,继代到诱导培养基中,产生微型种球;步骤五,将微型种球接种到含有扩繁培养基的生物反应器内扩繁;步骤六,将扩繁后得到的微型种球放4℃保存备用。

【技术特征摘要】
1.一种藏红花脱毒种球的生产方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤一,用氯气对藏红花种球进行表面消毒,然后接种到生长培养基中;步骤二,种球发芽后切取只带一个叶缘基的生长点进行脱毒处理,然后接种到生长培养基中成苗;步骤三,生长点成苗后进行病毒检测;步骤四,选择不带病毒的植株,继代到诱导培养基中,产生微型种球;步骤五,将微型种球接种到含有扩繁培养基的生物反应器内扩繁;步骤六,将扩繁后得到的微型种球放4℃保存备用。2.根据权利要求1所述的藏红花脱毒种球的生产方法,其特征在于,所...

【专利技术属性】
技术研发人员:王贵荣
申请(专利权)人:上海交通大学
类型:发明
国别省市:上海;31

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