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一种白鹤芋的组培快繁方法技术

技术编号:14034607 阅读:179 留言:0更新日期:2016-11-20 15:56
本发明专利技术属于植物组织培养领域,具体涉及一种白鹤芋的组培快繁方法,包括如下步骤:取2~3年白鹤芋生苗的顶芽及茎段为外植体,分别进行①外植体用0.1%升汞消毒,②茎段切成1~2mm厚的切片,与顶芽一起接入添加了6‑BA、VC的诱导与分化培养基中培养,③愈伤或不定芽团块接入到添加了6‑BA与IAA的培养基,其中用于诱导生根苗的不定芽团块直接接入添加了6‑BA、IAA及TIBA的培养基中,④株高≥30mm的单芽或3个主芽株高≥25mm的团块接入添加了活性炭的生根培养基中。本发明专利技术提供的一种白鹤芋组培快繁方法,可以在短时间内获得大量无性繁殖的白鹤芋组培苗。

A method of tissue culture and rapid propagation of Spathiphyllum.

The invention belongs to the field of plant tissue culture method, particularly relates to a tissue culture and rapid propagation of Spathiphyllum, which comprises the following steps: 2~3 students and stem bud Spathiphyllum plantlets as explants were the explants with 0.1% HgCl2 disinfection, the stems cut into 1 ~ 2mm thick slices, add together with the access terminal the induction and differentiation medium for 6 BA and VC, the callus and adventitious buds were added to medium access to 6 BA and IAA, which is used to induce adventitious bud seedling of mass medium added direct access to BA, IAA and TIBA 6 in single bud or 3 the main shoot height is greater than or equal to 25mm the height of more than 30mm of the mass access added activated carbon rooting medium. The present invention provides a Bai Heyu tissue culture rapid propagation method, which can obtain a large number of asexual propagation of tissue culture seedlings in a short period of time.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物组织培养领域,涉及一种白鹤芋的组培快繁方法
技术介绍
白鹤芋为天南星科白鹤芋属多年生常绿草本植物。白鹤芋翠绿叶片,洁白佛焰苞,非常清新幽雅,是当今世界最受欢迎的观赏花卉之一,具有很高的观赏价值和经济价值。目前,白鹤芋的繁殖的方法主要有分株、播种和组培。分株繁殖,一般在5~6月份进行,生长健壮的植株两年可以分株1次,繁殖系数极低,难以规模化扩增。播种繁殖,白鹤芋在自然状态下很难结果,需经人工授粉才能得到种子,种子采收后,应立即播种,发芽温度为30℃,播后10~15d发芽,如发芽时遇温度过低,种子易腐烂。组培繁殖,始于20世纪70年代末和80年代初的美国、德国,以幼嫩花序和侧芽为外植体,经消毒后接种在添加10mg/L 6-苄基氨基嘌呤和2mg/L吲哚乙酸的MS培养基上,40~45d后长出愈伤组织和不定芽。把不定芽转移到添加2 mg/L吲哚乙酸的MS培养基上,30~40d诱导生根,成为完整植株。目前,国内外对白鹤芋组培快繁的研究报道不多,主要是以侧芽、茎段、叶、叶柄、花丝体细胞、花序体细胞等器官进行愈伤组织诱导,然后再诱导愈伤组织分化不定芽,再由不定芽形成完整植株。目前适用于规模化生产的依然是以侧芽、茎段为外植体的快繁模式,如专利CN201110244807,以侧芽为外植体,经消毒、愈伤与不定芽分化诱导、增殖、生根,形成完整植株,目前已规模化生产。以叶、叶柄、花丝体细胞、花序体细胞为外植体的快繁模式依然处于实验室阶段,且对叶与叶柄的诱导效果并不理想,形成愈伤的时间长,且愈伤化程度低,不适合于规模化生产。花丝体细胞与花序体细胞诱导技术难度大,需进行显微操作,一旦显微操作不慎,极易诱导产生不同基因型的植株,亦不适合于规模化生产。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种白鹤芋的组培快繁方法,通过对白鹤芋顶芽特别是茎段切片的诱导,获得大量的白鹤芋再生植株。本专利技术方法特别适用于2~3年生白鹤芋植株的茎段切片进行诱导丛生芽。本专利技术提供一种白鹤芋组培快繁的方法,包括如下步骤:采集2~3年生白鹤芋顶芽与茎段为外植体,依次进行①外植体消毒,②愈伤组织诱导与不定芽分化,③继代增殖,④不定芽生根,获得白鹤芋再生植株。所述采集2~3年生白鹤芋植株顶芽与茎段,是在3~4月份,植株生长旺盛的季节采集,要求2~3年生、茎段直径≥1cm。所述①外植体消毒,是以顶芽及茎段为外植体,以0.1%升汞为消毒剂,顶芽消毒40~50min,茎段消毒60~70min,之后分别用无菌水漂洗2~3次。所述②愈伤组织诱导与不定芽分化,是将消毒后的顶芽接入诱导与分化化培养基中;将消毒后的茎段切成1~2mm厚的切片,接入诱导与分化培养基中,1个顶芽或1片切片/杯,26±2℃,300~1500lux培养,光照12h/d,1个月转代1次。顶芽培养20d后开始萌动,培养40d后,顶芽下部切口膨大为黄绿色愈伤组织,培养60d后,黄绿色愈伤组织抽出不定芽;切片培养15d后开始膨大为绿色愈伤组织,培养30d后,绿色愈伤组织抽出不定芽。所述诱导与分化培养基是以MS培养基为基础,含有1~3mg/L 6-BA(6-苄基氨基嘌呤,Benzylaminmopurine)、1~2mg/L VC(抗坏血酸,Ascorbic acid), 30g/L蔗糖, 5.5g /L琼酯,pH6.0。所述③继代增殖,是将愈伤或不定芽团块接入纯增殖培养中,不定芽团接入边增殖边生根培养基中,3~4芽/团,10团/杯,23±2℃,1500~3500lux培养,光照12h/d。纯增殖培养30~35d后,愈伤或不定芽团块增殖率≥3;边增殖边生根培养30~35d后,愈伤或不定芽团块增殖率≥3,生根系数≥0.3。所述纯增殖培养基是以MS培养基为基础,含有1~3mg/L的6-BA(6-苄基氨基嘌呤,Benzylaminmopurine)、0.3~0.5mg/L IAA(吲哚乙酸,Indoleacetic acid),30g/L蔗糖, 5.5g /L琼酯,pH6.0;所述边增殖边生根培养基是以MS培养基为基础,含有1~3mg/L的6-BA(6-苄基氨基嘌呤,Benzylaminmopurine)、0.3~0.5mg/LIAA(吲哚乙酸,Indoleacetic acid)、0.2~1Tmg/L TIBA(三碘苯甲酸,2,3,5-Triiodobenzoic acid), 30g/L蔗糖, 5.5g /L琼酯,pH6.0。所述④不定芽生根,单芽株高≥30mm,茎粗≥2mm,展开叶≥2,根≥1条时,切下接入生根培养基中,60株/杯;团块中3个主芽株高≥25mm,根≥1条时,切下接入生根培养基中,30团/杯。21±2℃,1500~3500lux培养,光照12h/d。所述生根培养基是以MS培养基为基础,含有0.1g/L AC(活性炭,Acticarbon) , 30g/L蔗糖, 5.5g /L琼酯,pH6.0。培养10~15d后,即可炼苗移栽。本专利技术的创新之处是公开了白鹤芋顶芽及茎段切片愈伤诱导、不定芽分化、增殖、生根的培养基配方及其规模化组培快繁的一种方法,其中茎段切片快繁方法,目前国内外未见同类报道。本专利技术有利于规模化繁殖优良观赏植物白鹤芋种苗,满足人们提高生活质量对白鹤芋盆花的要求,满足城镇化园林景观建设对白鹤芋植株的需求。具体实施方式一种白鹤芋组培快繁方法,该方法包括以下步骤。实施例1:①取外植体:选取2年生生长健壮无病虫害的绿巨人白鹤芋为母株,取顶芽与茎段为外植体,去除叶、苞叶、根,用手术刀削除茎段外周表皮,备用。②外植体消毒:在超净工作台上,将顶芽与茎段分别装到不同的无菌空瓶中,以0.1%升汞为消毒剂,顶芽消毒45min,茎段消毒60min,之后分别用无菌水漂洗3次。顶芽无菌率83.6%,切片无菌率91.3%。③愈伤组织诱导与不定芽分化:消毒后的顶芽接入诱导与分化培养基中;消毒后的茎段切成1~2mm厚的切片,接入诱导与分化培养基中,1个顶芽或1片切片/杯,26±2℃,1000lux培养,光照12h/d,1个月转代1次。诱导分化培养基:MS+3mg/L 6-BA+2mg/L VC+30g/L蔗糖+5.5g /L琼酯,pH6.0。顶芽培养20d后开始萌动,培养40d后,顶芽下部切口膨大为黄绿色愈伤组织,培养60d后,黄绿色愈伤组织抽出不定芽;切片培养15d后开始膨大为绿色愈伤组织,培养30d后,绿色愈伤组织抽出不定芽。④继代增殖:愈伤或不定芽团块接入纯增殖培养中,不定芽团接入边增殖边生根培养基中,3~4芽/团,23±2℃,3000lux培养,光照12h/d。纯增殖培养30d后,愈伤或不定芽团块增殖率≥3;边增殖边生根培养30d后,愈伤或不定芽团块增殖率≥3,生根系数≥0.3。纯增殖培养基:MS+3mg/L 6-BA+0.3mg/L IAA+30g/L蔗糖+5.5g /L琼酯,pH6.0;边增殖边生根培养基:MS+2mg/L的6-BA+0.4mg/LIAA+0.4mg/L TIBA+30g/L蔗糖+5.5g /L琼酯,pH6.0。⑤不定芽生根:单芽株高≥30mm,茎粗≥2mm,展开叶≥2,根≥1条时,切下接本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种白鹤芋的组培快繁方法,包括如下步骤:在3~4月份,取2~3年生白鹤芋顶芽与茎段为外植体,依次进行①外植体消毒②愈伤组织诱导与不定芽分化③继代增殖④不定芽生根。

【技术特征摘要】
1.一种白鹤芋的组培快繁方法,包括如下步骤:在3~4月份,取2~3年生白鹤芋顶芽与茎段为外植体,依次进行①外植体消毒②愈伤组织诱导与不定芽分化③继代增殖④不定芽生根。2.根据权利要求1,所述白鹤芋的组培快繁方法,其特征在于:所述①外植体消毒,以顶芽及切片为外植体,以0.1%升汞为消毒剂,消毒时间40~70min,之后无菌水漂洗2~3次。3.根据权利要求1,所述白鹤芋的组培快繁方法,其特征在于:所述②愈伤组织诱导与不定芽分化,将消毒后的顶芽接入诱导分化培养基中;将消毒后的茎段切成1~2mm厚的切片,接入诱导与分化培养基中,26±2℃,300~1500lux培养,光照12h/d;顶芽培养20d后开始萌动,培养40d后,顶芽下部切口膨大为黄绿色愈伤组织,培养60d后,黄绿色愈伤组织抽出不定芽;切片培养15d后开始膨大为绿色愈伤组织,培养30d后,绿色愈伤组织抽出不定芽。4.根据权利要求3,所述白鹤芋的组培快繁方法,其特征在于,所述诱导与分化培养基是以MS培养基为基础,含有1~3mg/L 6-BA(6-苄基氨基嘌呤,Benzylaminmopurine)、1~2mg/L VC(抗坏血酸,Ascorbic acid), 30g/L蔗糖, 5.5g /L琼酯,pH6.0。5.根据权利要求1,所述白鹤芋的组培快繁方法,其特征在于:所述③继代增殖,愈伤或不定芽团块接入纯增殖培养中,不定芽团接入边增殖边生根培养基中,3~4芽/团,23±2℃,1500~3500lux培养,光照12h/d;纯增殖培养30~35d...

【专利技术属性】
技术研发人员:吴子平纪超群
申请(专利权)人:吴子平
类型:发明
国别省市:福建;35

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