The invention discloses a method for culturing aseptic seedling of rice, which relates to the technical field of plant tissue culture. The specific method is: take the cultivation of rice seed, seed soaking; preparing cup, cup pad in the cultivation of 4 layers of wet gauze, sterilized 25 35 minutes; rice seeds after soaking in a sterile beaker, poured into the beaker to make alcohol, alcohol for 1 2 minutes; but to add formaldehyde to alcohol. The beaker, let the seed soak 3 formaldehyde for 5 minutes; but to formaldehyde, add sterile water cleaning seed amount to a beaker, after the seeds were washed in sterile seeds will pave the way to cultivate the 4 layers of gauze cup sterile membrane seal, for germination and the medium cup is arranged in the temperature of 25 DEG C 32 in the environment. To solve the problem of rice seed disinfection now in the laboratory, and subsequent tissue culture and transgenic provide pretreatment technology, provide experimental material as well as the study of organic nutrition and root exudates of rice.
【技术实现步骤摘要】
:本专利技术涉及一种水稻无菌苗培养的方法,属于植物组织培养
技术介绍
:“无菌苗”法是植物组织培养技术的延伸,无菌苗是植物有机营养及根系分泌物研究等试验的必备生物材料,而水稻无菌苗的有效培养是开展后续组织培养和转基因工作的前提和基础。水稻种子消毒是一项麻烦的工作,这是由于水稻种子中的内生菌较多,而且种子外有一层与胚结合紧密的壳包裹着,这就给消毒带来了麻烦,使消毒液不易渗入种子内杀死微生物。在现代研究
中,水稻种子消毒的方法比较少,目前效果比较好的方法只有周颖君等人的先将水稻种子去壳后,再用5%的次氯酸钠消毒45分钟,这种方法不但繁琐,增加工作量,而且会损伤种子的胚,影响发芽率,所以说目前寻找一种适合水稻种子的消毒方法是比较重要的。
技术实现思路
:针对上述问题,本专利技术要解决的技术问题是提供一种水稻无菌苗培养的方法。本专利技术的水稻无菌苗培养的具体方法为:1、取一定量的水稻种子,用水选法汰除空秕粒后,用水浸种4-8小时;2、准备几个大烧杯或培养皿、几瓶去离子水以及实验所需直径为4-5cm杯底垫有4层湿纱布的培养杯,将其包好后置于120-130℃下灭菌25-35分钟;3、待浸种完成后,在超净工作台内进行如下操作:3-1、将浸种后的水稻种子置于无菌的烧杯中,向烧杯中倒入适量的70%-75%酒精,使其完全没过水稻种子,让酒精浸泡1-2分钟;3-2、待酒精消毒完成后,倒去酒精,再向烧杯中加入适量的35%-40%甲醛,使其完全没过水稻种子,让甲醛浸泡种子3-5分钟;3-3、待甲醛消毒完成后,倒去甲醛,再向烧杯中加入适量的无菌水(去离子水灭菌所得)清洗 ...
【技术保护点】
一种水稻无菌苗培养的方法,其特征在于:它的具体培养方法为:(1)、取一定量的水稻种子,用水选法汰除空秕粒后,用水浸种4‑8小时;(2)、准备几个大烧杯或培养皿、几瓶去离子水以及实验所需直径为4‑5cm杯底垫有4层湿纱布的培养杯,将其包好后置于120‑130℃下灭菌25‑35分钟;(3)、待浸种完成后,在超净工作台内进行如下操作:(3‑1)、将浸种后的水稻种子置于无菌的烧杯中,向烧杯中倒入适量的70%‑75%酒精,使其完全没过水稻种子,让酒精浸泡1‑2分钟;(3‑2)、待酒精消毒完成后,倒去酒精,再向烧杯中加入适量的35%‑40%甲醛,使其完全没过水稻种子,让甲醛浸泡种子3‑5分钟;(3‑3)、待甲醛消毒完成后,倒去甲醛,再向烧杯中加入适量的无菌水清洗种子,清洗三次;(3‑4)、待种子洗净后,将种子置于铺垫4层纱布的无菌培养杯中以无菌培养膜封口,再将培养杯置于温度25℃‑32℃的环境中进行催芽。
【技术特征摘要】
1.一种水稻无菌苗培养的方法,其特征在于:它的具体培养方法为:(1)、取一定量的水稻种子,用水选法汰除空秕粒后,用水浸种4-8小时;(2)、准备几个大烧杯或培养皿、几瓶去离子水以及实验所需直径为4-5cm杯底垫有4层湿纱布的培养杯,将其包好后置于120-130℃下灭菌25-35分钟;(3)、待浸种完成后,在超净工作台内进行如下操作:(3-1)、将浸种后的水稻种子置于无菌的烧杯中,向烧杯中倒入适量的70...
【专利技术属性】
技术研发人员:唐建洲,龚亮,何昊城,朱天彧,张志元,
申请(专利权)人:长沙学院,
类型:发明
国别省市:湖南;43
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