阿德福韦单硫代L‑氨基酸酯单胆酸酯衍生物及其制备方法技术

本发明专利技术公开了具有下列化学结构的化合物及其药学上可接受的盐、盐结晶水合物、盐结晶溶剂合物，其中：R1是H或OH；R2是H或OH；R3是碳原子数为1‑4的烃基。抗病毒活性与原代肝细胞摄取实验证明，这类化合物具有较阿德福韦酯更好的抗病毒活性与肝细胞转运特异性，可用于制备治疗乙型肝炎病毒感染药物。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于药物化学领域，具体地说，涉及一种阿德福韦单硫代L-氨基酸酯单胆酸酯衍生物及其制备方法。
技术介绍
乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus，HBV)属于嗜肝DNA病毒科(Hepadnaviridae)，是最易感染人类的病毒之一。WHO报告目前全世界约有3.5-4亿为HBV感染者，而在他们之中有近30％可能发展为肝硬化，原发性肝癌。这两种病变每年导致约有50-100万慢性乙型肝炎患者死亡(Dienstag J.L.et al.N.Engl.J.Med.2008,359,1486-1500)。阿德福韦酯(Adefovir dipivoxil)为FDA在2002年批准上市的由Gilead Science公司研制的第一个非环核苷膦酸酯类抗HBV药物。临床研究表明阿德福韦酯的优点为：明显改善慢性乙型肝炎患者肝脏组织学性质，降低血清乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)及转氨酶(ALT)水平，增加e抗原(HBeAg)转化率；能有效绕过病毒编码激酶催化的首次磷酸化过程，因此对拉米呋啶(lamivudine)，泛昔洛维(famcicloir)及恩曲他滨(emtricitabine)等核苷类似物产生耐药的变异HBV能产生较好的抑制效果(Anneke K R.et al.Expert Opin Investig Drugs.2003,12,1281-1295；Segovia M.C.et al.Expert Opin Pharmacother.2012,13,245-254)。但是阿德福韦酯临床应用中发现其主要不足是产生剂量依赖性肾毒性包括Fanconi综合症，血清肌酐增高，肾性糖尿及蛋白尿等(Law S.T.et al.Am J Ther.2013,20,713-716；Tanji N.et al.Human Pathology 2001,32,734-740)，另外其口服给药生物利用度较低，药物在胃肠道中稳定性较差，释放原药过程中产生具有细胞毒性的特戊酸和甲醛，同时由于分解产生的原药肝细胞摄取率较低，使该药仅具有中等抗HBV活性(Sweet D.H.et al.Am J Physiol Renal Physiol.2001,281,F 197-F 205)，这些不足限制了阿德福韦酯在临床上的应用。由于阿德福韦酯的上述不足，目前世界主要制药公司正致力于研制、开发新型抗病毒非环核苷膦酸类前药，这些侯选药物包括：Mitsubishi-Lilly公司研制的阿拉莫韦(Alamifovir)；Gilead Science公司研制的替诺福韦酯(Tenofovir diisoproxil)与阿德福韦苯基膦酰丙氨酸酯(Phenyl phosphoralaninate,PMEA)；Ribapharm公司研制的瑞莫福韦(Remofovir)，以及由LG Life Sciences公司研制的PMCDG dipivoxil(LB 80380)等，目前替诺福韦酯与瑞莫福韦已经上市，阿拉莫韦、PMCDG dipivoxil已分别进入II期临床研究。尽管这些前药相对于阿德福韦酯抗HBV活性有所提高、细胞毒性有所降低，但是这些前药仍存在不足。它们设计上的共同特点表现为：1)将不同的外源性片段与非环核苷膦酸通过膦酯或膦酰胺键相连接，以改善分子亲脂性，提高生物利用度，但是所设计的前药在释放原药的过程中仍然可能会产生具有细胞毒性的载体分子；2)前药设计上没有考虑到是否可以利用其结构中引入的载体片段来实现药物的肝靶向性传输，降低其在非靶器官(肾脏、骨髓)浓度，从而降低其毒副作用。这些不足的存在一定程度上可能限制这些前药的临床应用。鉴于以上情况，设计含有内源性载体，能实现药物肝靶向性富集，同时毒副作用降低的阿德福韦前药对于研制、开发具有自主知识产权的新型抗HBV药物具有重要价值。胆汁酸(包括胆酸、去氧胆酸与熊去氧胆酸等)是内源性的肝细胞特异性天然配基。胆汁酸在肝细胞内生成后随胆汁流入小肠，参与脂类物质吸收，之后在回肠末端被迅速重吸收，通过门静脉重新进入肝脏，形成肝肠循环(Enterohepatic circulation,EC)(Meier P.J.et al.Annu Rev Physiol.2002,64,635-661)，该过程中其仅有少量胆汁酸(＜5％)进入血液，因此胆汁酸具有高度的器官特异性。成人体内肝肠循环每天重复6～15次，参与循环的胆酸总量达到17～40克，表明胆汁酸同时具有极高的转运能力。报道显示，胆汁酸是目前唯一口服有效的小分子肝靶向性药物载体，其作为药物投送载体最大的优势在于肝肠循环效率高、器官特异性高，药物与胆汁酸偶联后，由于可被胆汁酸转运蛋白识别，参与进胆汁酸的肝肠循环，从而能够提高药物的吸收及在肝脏中的浓度，赋予药物肝脏的选择性。同时由于胆酸作为内源性的天然配基，具有良好的生物相容性，适合于作为靶向性药物的载体(Trauner M.et al.Physiol Rev.2003,83,633-671；Enhsen A.et al.Drug Discov.Today 1998,3,409-418)。在胆汁酸的肠肝循环中位于回肠末端上皮细胞顶端刷状缘膜中的钠离子依赖性胆酸转运体(human apical sodium-dependent bile acid transporter,hASBT)介导胆酸由回肠重吸收进入门静脉血液，位于肝细胞表面的钠离子-牛磺胆酸转运多肽(Na+/taurocholate cotransporting polypeptide,NTCP)介导血液中的胆酸吸收进入肝细胞，这两种转运蛋白是胆汁酸肠肝循环中最重要的转运载体(Schaap F.G.et al.Nat Rev Gastroenterol Hepatol.2014,11,55-67；Balakrishnan A.et al.Mol Pharm.2006,3,223-230)。研究表明药效基团与胆酸的偶联物可以被这两种蛋白转运，从而提高药物被肠道和肝脏吸收的能力。以胆汁酸为载体的前药设计策略在药物设计上的成功应用表现在以下方面：Kullak-Ublick等将苯丁酸氮芥连接到牛磺胆酸的3位羟基上，得到胆酸-苯丁酸氮芥偶合物。肝细胞胆酸转运研究结果表明，药物胆酸偶合物能被肝癌细胞表面高度表达的钠离子-牛磺胆酸转运多肽(NTCP)转运进入肝肿瘤细胞内，相对于原药能够更迅速地被肝细胞转运吸收，两者对肝肿瘤细胞半数抑制浓度存在明显差异：药物胆汁酸偶合物IC50＝3～5μmol/L，原药>100μmol/L，这显示偶合物具有胆汁酸的转运特性，赋予药物肝靶向性富集能力(Kullak-Ublick G.A.et al.Gastroenterology.1997,113,1295-1305)。Fiorucci等设计合成的目前正处于II临床研究阶段的硝基化阿魏酸与熊去氧胆酸(Ursodeoxycholic acid,UA)的偶联物NCX1000也采用了胆汁酸载体前药策略，该化合物能够通过胆酸的特异性转运机制，选择性地在肝细胞内代谢释放出一氧化氮，在发挥治疗作用的同时，减少或避免一氧化氮的全身作用(Fiorucci S.et 本文档来自技高网...

【技术保护点】
具有下列化学结构的化合物及其药学上可接受的盐、盐结晶水合物、盐结晶溶剂合物，其中：R1是H或OH；R2是H或OH；R3是碳原子数为1‑4的烃基。

【技术特征摘要】
1.具有下列化学结构的化合物及其药学上可接受的盐、盐结晶水合物、盐结晶溶剂合物，其中：R1是H或OH；R2是H或OH；R3是碳原子数为1-4的烃基。2.如权利要求1所述的化合物及其药学上可接受的盐、盐结晶水合物、盐结晶溶剂合物，其特征在于，所述化合物具体为：9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤单硫代L-丙氨酸丙基酯，单熊去氧胆酸丙基酯；9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤单硫代L-缬氨酸丙基酯，单熊去氧胆酸丙基酯；9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤单硫代L-异亮氨酸丙基酯，单熊去氧胆酸丙基酯；9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤单硫代L-亮氨酸丙基酯，单熊去氧胆酸丙基酯；9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤单硫代L-丙氨酸丙基酯，单去氧胆酸丙基酯；9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤单硫代L-缬氨酸丙基酯，单去氧胆酸丙基酯；9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤单硫代L-异亮氨酸丙基酯，单去氧胆酸丙基酯；9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤单硫代L-亮氨酸丙基酯，单去氧胆酸丙基酯。3.一种权利要求1所述化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)制备N-叔丁氧羰基硫代L-氨基酸-3-溴-1-丙基酯取N-叔丁氧羰基-L-氨基酸和硫化氢在N-甲基吗啉和异丁基氯甲酸酯条件下，-20℃～-10℃反应制备得到N-叔丁氧羰基硫代-L-氨基酸，所述N-叔丁氧羰基硫代-L-氨基酸与1,3-二溴丙烷在氢化钠条件下制备得到N-叔丁氧羰基硫代L-氨基酸-3-溴-1-丙基酯；2)制备胆酸-3-溴-1-丙基酯取胆酸和3-溴-1-丙醇为反应原料，在对-二甲氨基吡啶与N,N-二环己基碳二亚胺条件下通过缩合反应制备得到胆酸-3-溴-1-丙基酯；3)阿德福韦单L-氨基酸酯，单羧酸酯类前药的制备采用一锅法合成目标化合物，取9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤与所述胆酸-3-溴-1-丙基酯在极性非质子溶剂中，以N,N′-二环己基-4-吗啉基-脒或1,8-二氮杂双环[5、4、0]十一烷-7烯为缩合剂，反应得到化合物9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤单胆酸丙基酯，然后加入所述N-叔丁氧羰基硫代L-氨基酸-3-溴-1-丙基酯，升高反应温度得到的9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤单N-叔丁氧羰基硫代L-氨基酸丙基酯，单胆酸丙基酯；所述9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤单N-叔丁氧羰基硫代L-氨基酸丙基酯，单胆酸丙基酯在极性或非极性溶剂中加入磷酸溶液，反应得到终产物9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤单硫代L-氨基酸丙基酯，单胆酸丙基酯。4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述胆酸包括去氧胆酸或熊...

【专利技术属性】
技术研发人员：傅晓钟，王永林，苏航，兰燕宇，李勇军，王爱民，黄勇，陈雅，罗敏，张文政，
申请(专利权)人：贵州医科大学，
类型：发明
国别省市：贵州;52