双酰化GLP‑1化合物制造技术

本发明专利技术涉及GLP‑1肽的衍生物，或其药学上可接受的盐、酰胺或酯，该肽包含在与GLP‑1(7‑37)(SEQ ID NO:1)的位置36相对应的位置处的第一Lys残基、在与GLP‑1(7‑37)(SEQ ID NO:1)的位置37相对应的位置处的第二Lys残基和最多七个与GLP‑1(7‑37)(SEQ ID NO:1)相比的氨基酸改变；该衍生物包含两个各自经由连接体分别附接至所述第一和第二Lys残基的延长体；其中该延长体选自：化学式1：HOOC‑C6H4‑O‑(CH2)y‑CO‑*，和化学式2：HOOC‑(CH2)x‑CO‑*，其中y为8‑11范围内的整数，且x为12；并且该连接体包含以下至少一个：化学式3：*‑NH‑CH(COOH)‑(CH2)2‑CO‑*，化学式4：*‑NH‑CH((CH2)2‑COOH)‑CO‑*，和/或化学式5：*‑NH‑(CH2)2‑[O‑(CH2)2]k‑O‑[CH2]n‑CO‑*，其中k为1‑5范围内的整数，且n为1‑5范围内的整数。本发明专利技术还涉及其药学用途，如用于糖尿病和肥胖症的治疗，以及涉及构成这些衍生物的一部分的GLP‑1肽，其具有在位置36和37处的Lys残基而没有其他Lys残基，及其GLP‑1(9‑37)片段。此外，本发明专利技术还涉及包含3‑羧基苯氧基‑壬酸的中间产物，其在壬酸的羧基处具有任选地经由连接体连接的保护基团。该衍生物具有极好的效力和长半衰期，使得它们潜在地可用于例如口服给药。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及胰高血糖素样肽1(GLP-1)的类似物的衍生物，更具体地涉及在36Lys和37Lys处被酰化的双酰化GLP-1衍生物及其药学用途。本专利技术还涉及具有36Lys和37Lys而没有其他Lys残基的GLP-1类似物，并涉及包含3-羧基苯氧基-壬酸的中间产物，其在壬酸的羧基处具有任选地经由连接体连接的保护基团。序列表的援引并入于2015年3月9日创建且为14070个字节的标题为“序列表”的序列表通过引用并入本文。
技术介绍
WO 2011/080103、WO 2012/062803、WO 2012/062804、WO 2012/140117、WO 2013/037690、WO 2013/167455和WO 2013/167454公开了各种双酰化的GLP-1衍生物，并且US 7291594B2公开了各种GLP-1肽类似物，包括在位置36和37处具有Lys残基的一些GLP-1肽类似物。
技术实现思路
本专利技术涉及双酰化GLP-1衍生物。利拉鲁肽(Liraglutide)是一种用于每日给药一次的单酰化的GLP-1衍生物，其由Novo Nordisk A/S以的商品名销售。该化合物在WO 98/08871A1(实施例37)中公开。WO 06/097537A2除其他GLP-1衍生物外还公开了司美鲁肽(semaglutide)(实施例4)，其是一种正由Novo Nordisk A/S进行临床开发的用于每周给药一次的单酰化GLP-1衍生物。本专利技术的GLP-1衍生物是双酰化的。更具体地，本专利技术的GLP-1衍生物是具有在两个相邻位置，即与GLP-1(7-37)(SEQ ID NO:1)的位置36和37相对应的位置处共价附接的两条侧链的GLP-1肽。每条侧链均包含连接体和延长体(protractor)。该延长体可以是脂肪二酸的基团，或具有远端羧基苯氧基的脂肪酸的基团。该连接体是并入*-NH基团和*-CO基团的二价基团(di-radical)。通过参考本文的线和结构式，该*-NH基团在该分子的左手端，而该*-CO基团在该分子的右手端。优选的连接体包括一个或多个Glu残基，和/或一个或多个Ado残基(Ado为8-氨基-3,6-二氧杂辛酸)。所述延长体和连接体经由酰胺键互相连接。所述连接体经由酰胺键与所述肽的36Lys或37Lys的ε-氨基连接。并入本专利技术衍生物中的GLP-1肽是GLP-1(7-37)(SEQ ID NO:1)的类似物，该类似物包含在与GLP-1(7-37)(SEQ ID NO:1)的位置36相对应的位置处的第一Lys残基(“36Lys”)，以及在与GLP-1(7-37)(SEQ ID NO:1)的位置37相对应的位置处的第二Lys残基(“37Lys”)。与GLP-1(7-37)(SEQ ID NO:1)相比，本专利技术衍生物的GLP-1肽总共可具有最多七个氨基酸改变，其中36Lys和37Lys被认为是两个氨基酸改变。最多五个额外的改变可独立地是一个或多个延伸、一个或多个插入、一个或多个缺失和/或一个或多个置换。更具体地，在第一个方面，本专利技术涉及GLP-1肽的衍生物，或其药学上可接受的盐、酰胺或酯，该肽包含在与GLP-1(7-37)(SEQ ID NO:1)的位置36相对应的位置处的第一Lys残基、在与GLP-1(7-37)(SEQ ID NO:1)的位置37相对应的位置处的第二Lys残基以及最多七个与GLP-1(7-37)(SEQ ID NO:1)相比的氨基酸改变；该衍生物包含两个各自经由连接体分别附接至所述第一和第二Lys残基的延长体；其中该延长体选自：化学式1：HOOC-C6H4-O-(CH2)y-CO-*，和化学式2：HOOC-(CH2)x-CO-*，其中y为8-11范围内的整数，且x为12；并且该连接体包含以下至少一个：化学式3：*-NH-CH(COOH)-(CH2)2-CO-*，化学式4：*-NH-CH((CH2)2-COOH)-CO-*，和/或化学式5：*-NH-(CH2)2-[O-(CH2)2]k-O-[CH2]n-CO-*，其中k为1-5范围内的整数，并且n为1-5范围内的整数。在实验部分中公开了被指定为化学式21至化学式48的本专利技术的优选GLP-1衍生物。在第二个方面，本专利技术涉及一种GLP-1类似物，其包含在与GLP-1(7-37)(SEQ ID NO:1)的位置36相对应的位置处的第一Lys残基、在与GLP-1(7-37)(SEQ ID NO:1)的位置37相对应的位置处的第二Lys残基，其中该类似物(i)未并入其他Lys残基，和/或(ii)并入氨基酸改变(8Aib或8Gly)、22Glu、26Arg、30Glu和/或(34Arg或34Gln)中的一种或多种。本专利技术还涉及相应的GLP-1(9-37)类似物，以及这些GLP-1(7-37)和GLP-1(9-37)类似物的药学上可接受的盐、酰胺或酯。更具体地，本专利技术涉及式I的GLP-1肽：Xaa7-Xaa8-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Xaa16-Ser-Xaa18-Xaa19-Xaa20-Glu-Xaa22-Xaa23-Ala-Xaa25-Xaa26-Xaa27-Phe-Ile-Xaa30-Xaa31-Leu-Xaa33-Xaa34-Xaa35-Lys36-Lys37，其中Xaa7为L-组氨酸、(S)-2-羟基-3-(1H-咪唑-4-基)-丙酸、D-组氨酸、脱氨基-组氨酸(desH)、Nα-乙酰基-组氨酸、Nα-甲酰基-组氨酸；Xaa8为Ala、Gly、Ser、Aib、(1-氨基环丙基)羧酸、(1-氨基环丁基)羧酸；Xaa16为Val或Leu；Xaa18为Ser或Arg；Xaa19为Tyr或Gln；Xaa20为Leu或Met；Xaa22为Gly或Glu；Xaa23为Gln、Glu或Arg；Xaa25为Ala或Val；Xaa26为Arg或Lys；Xaa27为Glu或Leu；Xaa30为Ala或Glu；Xaa31为Trp或His；Xaa33为Val或Arg；Xaa34为Arg、Lys、His、Asn或Gln；并且Xaa35为Gly或Aib。本专利技术还涉及除了Xaa7和Xaa8不存在之外均如上所定义的肽。在第三个方面，本专利技术涉及包含3-羧基苯氧基-壬酸的中间产物，其在壬酸的羧基处具有任选地经由连接体连接的保护基团。更具体地，本专利技术涉及包含化学式6的侧链部分的中间产物：其中L为任选的连接体，其为并入*-NH基团和*-CO基团的二价基团，PG为保护基团，并且远端COOH基团和/或任何其他COOH基团(若存在)任选地也得到保护；或其药学上可接受的盐、酰胺或酯。在第四个方面，本专利技术涉及本专利技术的GLP-1衍生物和类似物的药学用途，例如用于治疗和/或预防所有形式的糖尿病及相关疾病，如饮食失调、心血管疾病、胃肠疾病、糖尿病并发症、危重病和/或多囊卵巢综合征；和/或用于改善脂质参数、改善β-细胞功能，和/或用于延缓或阻止糖尿病进展。本专利技术的衍生物是生物活性的。例如，它们是非常强效的，并且另外或可替代地，它们与GLP-1受体非常好地结合。另外，或可替代地，它们具有延长的药代动力学谱。例如，当静本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种GLP‑1肽的衍生物，该肽包含在与GLP‑1(7‑37)(SEQ ID NO:1)的位置36相对应的位置处的第一Lys残基、在与GLP‑1(7‑37)(SEQ ID NO:1)的位置37相对应的位置处的第二Lys残基和最多七个与GLP‑1(7‑37)(SEQ ID NO:1)相比的氨基酸改变；该衍生物包含两个各自经由连接体分别附接至所述第一和第二Lys残基的延长体；其中该延长体选自：化学式1：HOOC‑C6H4‑O‑(CH2)y‑CO‑*，和化学式2：HOOC‑(CH2)x‑CO‑*，其中y为8‑11范围内的整数，且x为12；并且该连接体包含以下至少一个：化学式3：*‑NH‑CH(COOH)‑(CH2)2‑CO‑*，化学式4：*‑NH‑CH((CH2)2‑COOH)‑CO‑*，和/或化学式5：*‑NH‑(CH2)2‑[O‑(CH2)2]k‑O‑[CH2]n‑CO‑*，其中k为1‑5范围内的整数，且n为1‑5范围内的整数；或其药学上可接受的盐、酰胺或酯。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.04.07 EP 14163697.71.一种GLP-1肽的衍生物，该肽包含在与GLP-1(7-37)(SEQ ID NO:1)的位置36相对应的位置处的第一Lys残基、在与GLP-1(7-37)(SEQ ID NO:1)的位置37相对应的位置处的第二Lys残基和最多七个与GLP-1(7-37)(SEQ ID NO:1)相比的氨基酸改变；该衍生物包含两个各自经由连接体分别附接至所述第一和第二Lys残基的延长体；其中该延长体选自：化学式1：HOOC-C6H4-O-(CH2)y-CO-*，和化学式2：HOOC-(CH2)x-CO-*，其中y为8-11范围内的整数，且x为12；并且该连接体包含以下至少一个：化学式3：*-NH-CH(COOH)-(CH2)2-CO-*，化学式4：*-NH-CH((CH2)2-COOH)-CO-*，和/或化学式5：*-NH-(CH2)2-[O-(CH2)2]k-O-[CH2]n-CO-*，其中k为1-5范围内的整数，且n为1-5范围内的整数；或其药学上可接受的盐、酰胺或酯。2.如权利要求1所述的衍生物，其中所述连接体包含化学式5。3.如权利要求1-2中任一项所述的衍生物，其中k＝n＝1。4.如权利要求1-3中任一项所述的衍生物，其中化学式5被包含一次、两次、三次或四次。5.如权利要求1-4中任一项所述的衍生物，其中所述连接体包含化学式3或化学式4。6.如权利要求1-5中任一项所述的衍生物，其中氨基酸改变的最大数目包括改变为36Lys和37Lys的两个氨基酸改变。7.如权利要求1-6中任一项所述的衍生物，其中所述GLP-1肽包含式I的GLP-1化合物：Xaa7-Xaa8-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Xaa16-Ser-Xaa18-Xaa19-Xaa20-Glu-Xaa22-Xaa23-Ala-Xaa25-Xaa26-Xaa27-Phe-Ile-Xaa30-Xaa31-Leu-Xaa33-Xaa34-Xaa35-Lys36-Lys37，其中Xaa7为L-组氨酸、(S)-2-羟基-3-(1H-咪唑-4-基)-丙酸、D-组氨酸、脱氨基-组氨酸(desH)、Nα-乙酰基-组氨酸、Nα-甲酰基-组氨酸；Xaa8为Ala、Gly、Ser、Aib、(1-氨基环丙基)羧酸、(1-氨基环丁基)羧酸；Xaa16为Val或Leu；Xaa18为Ser或Arg；Xaa19为Tyr或Gln；Xaa20为Leu或Met；Xaa22为Gly或Glu；Xaa23为Gln、Glu或Arg；Xaa25为Ala或Val；Xaa26为Arg或Lys；Xaa27为Glu或Leu；Xaa30为Ala或Glu；Xaa31为Trp或His；Xaa33为Val或Arg；Xaa34为Arg、Lys、His、Asn或Gln；且Xaa35为Gly或Aib。8.一种GLP-1衍生物，其选自以下：化学式21、化学式22、化学式23、化学式24、化学式25、化学式26、化学式27、化学式28、化学式29、化学式30、化学式31、化学式32、化学式33、化学式34、化学式35、化学式36、化学式...

【专利技术属性】
技术研发人员：L林德罗思，J科福埃德，J刘，P布洛赫，PW加里贝，JT科德拉，
申请(专利权)人：诺和诺德股份有限公司，
类型：发明
国别省市：丹麦;DK