从发酵液中沉淀分离提取洛伐他汀的方法技术

本发明专利技术涉及提取洛伐他汀的新方法，具体涉及一种从发酵液中沉淀分离提取洛伐他汀的方法。本发明专利技术利用不同条件下洛伐他汀在水相中的溶解性差异，创新了一种沉淀分离洛伐他汀的方法。先利用碱性条件下将洛伐他汀溶解于滤液中，去除菌渣等固体杂质，再通过酸性条件下将洛伐他汀从滤液中沉淀出来，去除洛伐他汀水溶性杂质，得到洛伐他汀粗提取物；粗提取物再用有机溶剂去除不溶杂质，最后进行提取结晶，去除脂溶性杂质，得到洛伐他汀。与现有直接对滤液或菌体进行提取的生产工艺相比，本发明专利技术操作简单，有机溶剂使用量、消耗量小，产品收率高质量好，产品含量达99.32％以上，避免了现有生产工艺存在的不足之处。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及提取洛伐他汀的新方法，具体涉及一种从发酵液中沉淀分离提取洛伐他汀的方法。
技术介绍
洛伐他汀(Lovastatin)属羟甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂(HMG-CoA-RI)，通过竞争性抑制HMG-CoA还原酶活性，阻断内源胆固醇合成，从而起到调脂降脂作用。洛伐他汀由日本远藤及Albort等人于1979年及1980年首次从土曲霉的发酵液中发现，由美国默克公司(Merck Co)开发，并于1987年通过FDA批准上市，是推向市场的第一个HMG-CoA-RI。从上市以来，洛伐他汀便成为临床治疗和预防高血脂症的首选药物，而且近年又发现了它的很多新药理活性，如抗癌、抗氧化、改善血管内皮细胞功能等，其临床应用还可能扩大。另外，洛伐他汀还是生产降血脂药物辛伐他汀的主要原料。洛伐他汀分子式、化学名称及结构式如下：分子式：C24H36O5化学名称：(S)-2-甲基丁酸-(1S，3S，7S，8S，8aR)-1，2，3，7，8，8a-六氢-3，7-二甲基-8-[2-[(2R，4R)-4-羟基-6氧代-2-四氢吡喃基]-乙基]-1-萘酯结构式：中国专利CN1583736A公开一种洛伐他汀的提取精制方法，将发酵液碱化固液分离，用树脂吸附滤液，用乙醇洗脱后加入丁酯萃取，经浓缩环化结晶后得到产品。该工艺有机溶剂使用及消耗量较大、产品收率偏低，生产成本较高。中国专利CN102344426A公开一种提取并纯化洛伐他汀的方法，首先将生产洛伐他汀的发酵液酸化至pH值为1～3，然后过滤或离心分离，收集菌渣，用有机溶剂萃取菌渣，对萃取液依次用碱性水溶液、酸性水溶液和去离子水洗涤，洗涤后的萃取液浓缩、结晶，分离并干燥晶体得到粗品，对粗品重结晶，获得纯化的洛伐他汀。该方法解决了洛伐他汀萃取中的乳化难题，提高了洛伐他汀产品在丙酮、氯仿、甲醇中的溶解性。中国专利CN102993145A公开一种提取纯化洛伐他汀的方法，将生产洛伐他汀的发酵液用酸调至pH值为1～6，过滤，滤渣用有机溶剂萃取，有机相浓缩，冷却结晶，离心，干燥得粗品，然后对粗品进行微波处理，再溶解在有机溶剂中利用活性炭脱色，重结晶，离心，洗涤，干燥，得到洛伐他汀产品。微波处理使粗品中的杂质变性、固化，达到易于分离的目的，从而提高了产品纯度和质量。上述两个专利均是将发酵液酸化，固液分离后收集菌渣，用有机溶剂萃取菌渣，萃取液经浓缩、结晶分离后得到洛伐他汀粗品。由于菌渣量比较大，直接提取需要使用大量的有机溶剂，并且同时从菌渣中萃取出的脂溶性杂质也比较多，对后期处理造成不利影响。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种利用不同条件下洛伐他汀在水相中的溶解性差异，从发酵液中沉淀分离提取洛伐他汀的方法，具有有机溶剂使用量、消耗量小，产品收率高、质量好的特点。本专利技术所述的从发酵液中沉淀分离提取洛伐他汀的方法，包括以下步骤：(1)用碱性物质将洛伐他汀发酵液碱化至pH值10～12，固液分离，弃菌渣收集滤液；(2)用酸性物质将滤液调节至pH值2～4，静置分层或固液分离后，收集沉淀，沉淀为洛伐他汀沉淀物和不溶杂质；(3)用有机溶剂对沉淀进行溶解，过滤去除不溶杂质得到提取液；(4)提取液环化、浓缩、结晶、分离、干燥得到洛伐他汀粗品。其中：步骤(1)中的碱性物质为氢氧化钠、氢氧化钾或氨水。优先选择10wt.％的氢氧化钠，将发酵液调节pH值至10～12，搅拌1h，搅拌的过程中每10min检测，并补加碱性物质调节pH值；采用板框压滤机进行固液分离，收集滤液。步骤(2)中的酸性物质为盐酸、硫酸或草酸。优先选择10wt.％的盐酸，将滤液调节pH值至2～4，静置分层或固液分离后收集沉淀。步骤(3)中的有机溶剂为乙酸乙酯、乙酸丁酯、乙酸丙酯、甲苯或正丁醇，优选乙酸丁酯。步骤(3)中的有机溶剂体积是发酵液体积的5～10％。步骤(3)中对沉淀的溶解是在温度40～50℃下，搅拌1～2h。步骤(4)中的提取液在常压110～130℃条件下进行环化2～3h，同时分流收集冷凝的有机溶剂。步骤(4)中的提取液先环化后再浓缩至有晶体析出时，后降温至5～15℃进行结晶。根据不同的质量要求，对步骤(4)得到的洛伐他汀粗品进行精制纯化得到高纯度洛伐他汀。本专利技术的有益效果如下：本专利技术利用不同条件下洛伐他汀在水相中的溶解性差异，创新了一种沉淀分离洛伐他汀的方法。先利用碱性条件下将洛伐他汀溶解于滤液中，去除菌渣等固体杂质，再通过酸性条件下将洛伐他汀从滤液中沉淀出来，去除洛伐他汀水溶性杂质，得到洛伐他汀粗提取物；粗提取物再用有机溶剂去除不溶杂质，最后进行提取结晶，去除脂溶性杂质，得到洛伐他汀。与现有直接对滤液或菌体进行提取的生产工艺相比，本专利技术操作简单，有机溶剂使用量、消耗量小，产品收率高质量好，产品含量达99.32％以上，避免了现有生产工艺存在的不足之处。具体实施方式以下结合实施例对本专利技术做进一步描述。实施例1取洛伐他汀发酵液5L，单位8018u/ml，用10％氢氧化钾调节pH值至10.5，搅拌1h，搅拌过程中每间隔10min检测，并补加氢氧化钾保持pH值10.5，板框压滤机进行固液分离，弃菌渣收集滤液；滤液用10％硫酸调节pH值至3.2，静置6小时，分离收集固相沉淀；向沉淀中加入280ml甲苯，50℃搅拌溶解1h，过滤后得提取液；提取液常压115℃进行环化3小时，并浓缩至有晶体析出时，缓慢降温至15℃结晶，分离后得洛伐他汀30.2g，精制后得产品26.7g，产品含量99.32％。实施例2取洛伐他汀发酵液5L，单位7963u/ml，用10％氨水调节pH值至11.0，搅拌1h，搅拌过程中每间隔10min检测，并补加氨水保持pH值11.0，板框压滤机进行固液分离，弃菌渣收集滤液；滤液用10％草酸调节pH值至3.5，静置6小时，分离收集固相沉淀；向沉淀中加入260ml正丁醇，50℃搅拌溶解1h，过滤后得提取液；提取液常压120℃进行环化3小时，并浓缩至有晶体析出时，缓慢降温至10℃结晶，分离后得洛伐他汀33.2g，精制后得产品27.8g，产品含量99.45％。实施例3取洛伐他汀发酵液5L，单位8106u/ml，用10％氢氧化钠调节pH值至11.5，搅拌1h，搅拌过程中每间隔10min检测，并补加氢氧化钠保持pH值11.5，板框压滤机进行固液分离，弃菌渣收集滤液；滤液用10％盐酸调节pH值至2.8，静置6小时，分离收集固相沉淀；向沉淀中加入250ml乙酸丁酯，50℃搅拌溶解1h，过滤后得提取液；提取液常压125℃进行环化3小时，并浓缩至有晶体析出时，缓慢降温至5℃结晶，分离后得洛伐他汀34.2g，精制后得产品28.7g，产品含量99.50％。实施例4取洛伐他汀发酵液500L，单位8359u/ml，用10％氢氧化钠调节pH值至11.5，搅拌1h，搅拌过程中每间隔10min检测，并补加氢氧化钠保持pH值11.5，板框压滤机进行固液分离，弃菌渣收集滤液；滤液用10％盐酸调节pH值至2.7，静置6小时，分离收集固相沉淀；向沉淀中加入25L乙酸丁酯，50℃搅拌溶解1h，过滤后得提取液；提取液常压120℃进行环化3小时，并浓缩至有晶体析出时，缓慢降温至10℃结晶，分离后得洛伐他汀3.62kg，精制后得产品2.93kg，产品含量99.58％。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从发酵液中沉淀分离提取洛伐他汀的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)用碱性物质将洛伐他汀发酵液碱化至pH值10～12，固液分离，弃菌渣收集滤液；(2)用酸性物质将滤液调节至pH值2～4，静置分层或固液分离后，收集沉淀，沉淀为洛伐他汀沉淀物和不溶杂质；(3)用有机溶剂对沉淀进行溶解，过滤去除不溶杂质得到提取液；(4)提取液环化、浓缩、结晶、分离、干燥得到洛伐他汀粗品。

【技术特征摘要】
1.一种从发酵液中沉淀分离提取洛伐他汀的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)用碱性物质将洛伐他汀发酵液碱化至pH值10～12，固液分离，弃菌渣收集滤液；(2)用酸性物质将滤液调节至pH值2～4，静置分层或固液分离后，收集沉淀，沉淀为洛伐他汀沉淀物和不溶杂质；(3)用有机溶剂对沉淀进行溶解，过滤去除不溶杂质得到提取液；(4)提取液环化、浓缩、结晶、分离、干燥得到洛伐他汀粗品。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(1)中的碱性物质为氢氧化钠、氢氧化钾或氨水。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤(1)中的碱性物质的质量分数为10wt.％，步骤(1)先将洛伐他汀发酵液碱化至pH值10～12，搅拌1h，搅拌过程中每间隔10min检测，并补加碱性物质保持pH值10～12；采用板框压滤机进行固液分离，收集滤液。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱维忠，王宏，张兴灿，白芳静，
申请(专利权)人：山东鲁抗医药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37