以香果、香叶为原料制备的香辛料及其在抑制单增李斯特菌中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种以香果、香叶为原料制备的香辛料，是通过以下方法制备得到的：(1)粉碎：取香果和香叶，分别用粉碎机粉碎至颗粒直径为0.1mm；(2)取上述粉碎完的香果和香叶，分别置于蒸馏瓶中，加入乙酸乙酯，料液比1:10，在60℃水浴条件下浸提5小时；(3)抽滤：将浸提液抽滤后得到滤液；(4)浓缩：蒸发浓缩，得到浓缩浸膏，即分别得到香果提取物、香叶提取物；将香果提取物与香叶提取物按质量比1:1的比例混合，即得。通过上述方法制备得到的香辛料，经实验证明，其对猪肉中的单增李斯特菌有抑制作用，且取得了增效作用，因此，可以作为猪肉的防腐剂进行应用，也可以作为抑菌剂进行应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种以香果、香叶为原料制备的香辛料及其在抑制单增李斯特菌中的应用。
技术介绍
在食品调味调香中使用的芳香植物的干燥粉末或精油被人们称为香辛料。香辛料主要来自植物的种子、茎叶、花蕾、果实等其他部位，有独特的刺激性味道，如香、甜、苦、辣等味道，有抗氧化、着色、防腐抗菌以及其他生理药理作用，此外，还有使食品风味更好和香味更浓的作用。香辛料有以下的特点：绝大多数香辛料具有一定的药理作用；绝大多数香辛料含有挥发性物质；有典型的滋味或香气；在正常使用量(一般不做限量)内对人体功能不会造成损害，或对身体功能有帮助。香果，又名川芎，伞形科、藁本属多年生草本植物，高40～60厘米。发达的根茎形成不规则的结节状拳形团块，有强烈的香气。根茎竖立，形状为圆柱形，条纹纵向发展，上部大多是分枝，下部茎节胀大呈盘状(苓子)。大多在路边、树林边缘、山地疏林或以竹类为优势的开敞的混交林中、海拔700-1000米生长，而很少在密林中生长。主产四川(灌县)，在其他地区也有培育，比如云南、浙江、江苏、陕西、广西、贵州、江西、湖北、甘肃、内蒙古、河北等省区。香辛料的根茎具有药用价值，可以祛湿，活血化瘀，治疗头痛头晕、腹部疼痛、痈疽疮疡、闭经、难产等症状。香叶，也可称为月桂叶、香桂叶、桂叶、天竺桂等。香叶为樟科月属常绿小乔木，它的叶片是烹调中的调味料。香叶为小乔木或绿灌木，主要生长在南欧地中海沿岸，这两种香叶的颜色都呈现为绿色，形状为长椭圆披针形，长约三英寸，叶面是光滑的，味道有辛辣及强烈苦味。欧洲人常用香叶作为调味料和餐点装饰，可以和肉食、蔬菜、汤作为搭配，有健胃保胃的功能。肉类保鲜是当今社会面临的一大难题，人们在肉类中添加防腐剂来维持肉类的新鲜，防止其变质腐败，最终推迟肉类的货架期。但是化学防腐剂对身体会造成一定的危害，损害身体健康。因此，选出安全可靠的天然防腐剂刻不容缓。
技术实现思路
针对上述现有技术，本专利技术提供了一种以香果、香叶为原料制备的香辛料，通过实验证明，本专利技术的香辛料，对猪肉中的单增李斯特菌有较好的抑菌效果，可作为天然防腐剂进行应用。本专利技术是通过以下技术方案实现的：一种以香果、香叶为原料制备的香辛料，是通过以下方法制备得到的：(1)粉碎：取香果和香叶，分别用粉碎机粉碎至颗粒直径为0.1mm；(2)取上述粉碎完的香果和香叶，分别置于蒸馏瓶中，加入乙酸乙酯，料液比1:10(单位g：ml)，在60℃水浴条件下浸提5小时；(3)抽滤：将浸提液抽滤后得到滤液；(4)浓缩：使用水浴锅于通风橱中蒸发浓缩，得到除去全部溶剂的浓缩浸膏，即分别得到香果提取物、香叶提取物；将香果提取物与香叶提取物按质量比1:1的比例混合，即得。通过上述方法制备得到的香辛料，经实验证明，其对猪肉中的单增李斯特菌有抑制作用，且取得了增效作用，因此，可以作为猪肉的防腐剂进行应用，也可以作为抑菌剂进行应用。附图说明图1：25℃时香果提取物对猪肉中单增李斯特菌的抑菌效果图。图2：4℃时香果提取物对猪肉中单增李斯特菌的抑菌效果图。图3：25℃时香叶提取物对猪肉中单增李斯特菌的抑菌效果图。图4：4℃香叶提取物对猪肉中单增李斯特菌的抑菌效果图。图5：25℃时香果香叶复配物对猪肉中单增李斯特菌的抑菌效果图。图6：4℃时香果香叶复配物对猪肉中单增李斯特菌的抑菌效果图。图7：25℃时熟肉中单增李斯特菌的抑菌效果图。图8：4℃时熟肉中单增李斯特菌的抑菌效果图。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术作进一步的说明。下述实施例中所涉及的仪器、试剂、材料等，若无特别说明，均为现有技术中已有的常规仪器、试剂、材料等，可通过正规商业途径获得。下述实施例中所涉及的实验方法，检测方法等，若无特别说明，均为现有技术中已有的常规实验方法，检测方法等。实施例1香辛料的研究1研究目的和意义随着人们对食品越来越高的需求，食品防腐也变得越来越重要。作为天然防腐剂的香辛料，更引起了人们的高度重视。香辛料在中国乃至世界的烹调业中占有重要地位，利用香辛料的抗菌防腐及抗氧化作用可以相应减少或不加防腐剂抗氧化剂等化学添加剂。香辛料的调味作用是食品风味的关键，随着世界经济的发展，对香辛料的要求更高，香辛料也会必将会有更广阔的应用前景。2材料与方法2.1实验材料与设备2.1.1实验材料主要原料：如下：香果，干制，购自徐州农贸市场。香叶，干制，购自徐州农贸市场。主要试剂：如下：无水乙醇，分析纯，上海博河精细化学品有限公司。乙酸乙酯，分析纯，上海苏懿化学试剂有限公司。超纯水，分析纯，化学与食品实验室。胰蛋白胨大豆琼脂，生化试剂，上海盛思生化科技有限责任公司。胰蛋白胨大豆肉汤，生化试剂，北京陆桥技术有限责任公司。纯化琼脂粉，生化试剂，上海宜兴市有信生物有限公司。氯化钠，分析纯，江苏腾狮化工厂2.1.2实验设备：如下：旋转蒸发仪，上海申生科技有限公司。循环水式真空泵，巩义市英峪予华仪器厂。数显式电热恒温水浴锅，上海跃进医疗器械厂。电热恒温干燥箱，上海跃进医疗器械厂。JA2003N型电子天平，上海精密仪器有限公司。微型植物粉碎机，天津市泰斯特仪器有限公司。DNP-9162型电热恒温培养箱，上海精宏实验设备有限公司。SW-CJ-IC标准型双人净化工作台，苏州净化设备厂。2.1.3供试菌种：如表1所示。表1 供试菌种2.2实验方法2.2.1提取工艺流程为：香果、香叶(干制)→粉碎→称量→乙酸乙酯60℃浸提→抽滤→蒸发浓缩→成品。步骤如下：(1)粉碎：取香果或香叶，用粉碎机粉碎到颗粒直径为0.1mm，用筛子筛选(颗粒太大，提取率不高，也不利于有效成分溶出；颗粒太小，各种杂质的溶出度也会增高，而且不利于过滤、浓缩和分离)。(2)取30g粉碎完的香果或香叶，置于蒸馏瓶中，加入300ml乙酸乙酯，在60℃水浴条件下浸提5小时。(3)抽滤：将浸提液抽滤后得到滤液。(4)浓缩：使用水浴锅于通风橱中蒸发浓缩，得到浓缩浸膏(除去全部溶剂)，即分别得到香果提取物、香叶提取物。(5)保存：提取好后，放于离心管中，121℃高温灭菌，保存。2.2.2抑菌作用的研究2.2.2.1实验用培养基的配制胰蛋白胨大豆琼脂培养基(用于细菌培养)：TSA34g，水1000mL，pH7.4～7.6。配制生理盐水：氯化钠100g，水900ml。均于121℃高温灭菌。2.2.2.2菌悬液制备1.菌种的活化。将供试菌种从冷冻中取出，放入无菌操作台中解冻5分钟左右。点燃酒精灯，并用酒精棉消毒双手和擦净台面。将接种环在酒精灯火焰外焰烧至通红，冷却，挑取2-3次供试菌种，接入培养液中进行活化，置于37℃水浴中恒温振荡培养。2.菌悬液的制备。在无菌条件下，在9.5ml的生理盐水中加入0.5ml活化好的菌种，稀释成10倍的稀释液，得到菌悬液。2.2.2.3在纯培养中的抑制滤纸片的制备及处理：将定性滤纸对折2-3次，用打孔器制备出6mm的圆片，放入离心管中密封，在121℃的高压灭菌锅中干热灭菌20min后放于置于烘箱中烘干，备用。在无菌操作台中，用灭菌镊子夹取烘干后的灭菌滤纸圆片，将其放到香辛料提取物中浸泡2h，以无菌水浸过的滤纸片做空白对照。滤纸片经充分浸泡后取出晾干，备用。在无菌操作台中，将灭过菌的TSA固体培养基倒入同样灭过菌的干净培养皿，待其完全冷却凝固后，倒置放于无菌操本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种以香果、香叶为原料制备的香辛料，其特征在于：是通过以下方法制备得到的：(1)粉碎：取香果和香叶，分别用粉碎机粉碎至颗粒直径为0.1mm；(2)取上述粉碎完的香果和香叶，分别置于蒸馏瓶中，加入乙酸乙酯，料液比1:10，在60℃水浴条件下浸提5小时；(3)抽滤：将浸提液抽滤后得到滤液；(4)浓缩：蒸发浓缩，得到浓缩浸膏，即分别得到香果提取物、香叶提取物；将香果提取物与香叶提取物按质量比1:1的比例混合，即得。

【技术特征摘要】
1.一种以香果、香叶为原料制备的香辛料，其特征在于：是通过以下方法制备得到的：(1)粉碎：取香果和香叶，分别用粉碎机粉碎至颗粒直径为0.1mm；(2)取上述粉碎完的香果和香叶，分别置于蒸馏瓶中，加入乙酸乙酯，料液比1:10，在60℃水浴条件下浸提5小时；(3)抽滤：将浸提液抽滤后得到滤液；(4)浓缩：蒸发浓缩，得到浓缩浸膏，即分别得到香果提取物、香叶提取物；将香果提取物与香叶提取物按质量比1:1的比例混合，即得。2.权利要求1所述的香辛料的制备方法，其特征在于：步骤如下：(1)粉碎：取香果和...

【专利技术属性】
技术研发人员：贺菊萍，张晨，杨佳怡，王子燕，
申请(专利权)人：徐州工程学院，
类型：发明
国别省市：江苏;32