本发明专利技术公开了一种抑制宫颈癌细胞的中草药组合物及制备方法，该中草药组合物由原料有效成分组成，按重量份数计：瓜蒌有效成分1‑10份，益母草有效成分1‑10份，金银花有效成分1‑10份，菊花有效成分1‑10份。本发明专利技术最大限度的提取了中草药中的有效成分并将其进行科学配伍，所得复方具有体外抑制宫颈癌细胞的作用。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及中草药复配，具体涉及一种抑制宫颈癌细胞的中草药组合物及制备方法。
技术介绍
宫颈癌是女性生殖系统的常见恶性肿瘤，继乳腺癌后，宫颈癌位居导致女性死亡肿瘤的第二位。目前治疗肿瘤的主要手段除了手术外，仍然是放疗和化疗。大多情况下，采用手术、放化疗综合治疗。但是化疗药物在治疗过程中出现的耐药性是治疗中的难题，而中草药治疗肿瘤有望避免放化疗的毒性及肿瘤细胞产生抗药性等缺点，是因为中草药包含多种成分，注重配伍提高协同疗效及整体治疗效果。在抑制肿瘤细胞的同时，保护人体的造血细胞及免疫系统。或者通过激活人体的某些免疫功能，达到自身控制或清除肿瘤细胞的状态。中药有效成分的提取方法主要有传统提取法、溶剂提取法和超临界萃取法等。传统提取法主要有水煎法、回流法、蒸馏法、渗漉法等，超临界萃取等现代提取和分离技术由于具有获得提取物的纯度高、操作方法简便、环保节能等优点而优越性日益显著。但是，由于超临界萃取使用的是新技术新设备，目前局限性也比较大，还难以应用于提取中药有效成分的工业化大规模生产。溶剂提取法中常用的溶剂亲水性由低到高为石油醚，苯，氯仿，乙醚，乙酸乙酯，丙酮，乙醇，甲醇。经检索发现，乙醇因对有效成分的提取较完全而更为常用，是效果较佳的溶剂。瓜萎是括楼或双边括楼的成熟果实，其化学成分主要有挥发油、甾醇、脂肪酸、氨基酸、蛋白质、色素等。巢志茂等进一步研究瓜萎化学成分，在甲醇渗漉物中分离并鉴定了棕榈酸、7-豆甾烯-3β-醇、7-豆甾烯醇-3-O-β-D-葡萄糖苷、半乳糖酸γ-内酯和半乳糖。瓜萎具有降低血清胆固醇、扩张冠脉、抗心肌缺血、改善微循环、抑制血小板聚集、耐缺氧、抗心律失常等作用，其提取液具有抑制癌细胞作用，能杀死体内腹小癌细胞，对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、肺炎双球菌、白色葡萄球菌等均有抑制作用。相关文献报道有“瓜蒌含药血清及弯齿琵甲对Hela细胞增殖抑制作用的研究”等。据文献中报道，瓜蒌中抑制肿瘤细胞组分有三萜皂苷、蛋白等；益母草中有生物碱类和黄酮类，金银花中为多糖，菊花中为挥发油类等。然而未见报道将四味药联用来研究其抑制肿瘤细胞作用。
技术实现思路
本专利技术的目的在于：提供一种抑制宫颈癌细胞的中草药组合物及制备方法，将瓜蒌(Fructus)、益母草(Herba Leonuri)、金银花(Lonicera japonica)、菊花(Chrysanthemum)这些能有效抑制肿瘤细胞的组分提取并结合起来，排除其它不必要组分干扰的同时，使所得药物疗效确切，用于抑制宫颈癌细胞，工艺简单，操作方便，环境友好，易于实现工业化生产。本专利技术的技术解决方案是该中草药组合物由原料有效成分组成，按重量份数计：瓜蒌有效成分1-10份，益母草有效成分1-10份，金银花有效成分1-10份，菊花有效成分1-10份。其进一步的优化方案是该中草药组合物由原料有效成分组成，按重量份数计：瓜蒌有效成分5-10份，益母草有效成分1-10份，金银花有效成分1-10份，菊花有效成分1-10份。其再进一步的优化方案是该中草药组合物由原料有效成分组成，按重量份数计：瓜蒌有效成分5-10份，益母草有效成分5-10份，金银花有效成分1-10份，菊花有效成分1-10份。其更进一步的优化方案是该中草药组合物由原料有效成分组成，按重量份数计：瓜蒌有效成分5-10份，益母草有效成分5-10份，金银花有效成分5-10份，菊花有效成分1-5份。其最优化方案是该中草药组合物由原料有效成分组成，按重量份数计：瓜蒌有效成分10份，益母草有效成分10份，金银花有效成分8份，菊花有效成分5份。上述中草药组合物的制备方法包括以下步骤：（1）瓜蒌有效成分制备：瓜蒌，粉碎，过60目筛，加其4倍重量的质量浓度 95%乙醇超声提取3次，每次40 min，抽滤；药渣用其3倍重量质量浓度 95%乙醇回流提取3次，每次1h，将提取液抽滤；合并两次滤液，40℃旋转蒸发至原体积的1/10，得浓缩液；用浓缩液5倍体积的去离子水溶解，石油醚等体积萃取三次，合并，50℃旋转蒸发浓缩至干得粗品；粗品用甲醇溶解后，通过硅胶柱层析分离，以石油醚:乙酸乙酯=12:1 (v/v)作为洗脱剂进行洗脱，采用恒定流速2 mL·min-1，每20mL收集一次，共收集100mL结束；收集40-50min的馏分于50℃旋转蒸发浓缩，冷冻干燥后得到白色非晶体性粉末，即为具有抑制宫颈癌细胞的瓜蒌有效成分；（2）益母草有效成分制备：益母草，粉碎，过60目筛，加其4倍重量质量浓度 95%乙醇回流提取3次，每次1h，将提取液抽滤，合并，40℃旋转蒸发至原体积的1/10，得浓缩液；浓缩液用其5倍体积的去离子水溶解，乙酸乙酯等体积萃取三次，合并，50℃旋转蒸发浓缩至干得粗品；粗品用甲醇溶解后，通过硅胶柱层析分离，以石油醚:丙酮=5:1(v/v)作为洗脱剂进行洗脱，采用恒定流速2 mL·min-1，每20mL收集一次，共收集100mL结束；收集30-40min的馏分于50℃旋转蒸发浓缩，冷冻干燥后得到了白色针晶粉末，即为具有抑制宫颈癌细胞的益母草有效成分；（3）金银花有效成分制备：金银花，粉碎，过60目筛，加其4倍重量水回流提取3次，每次1h，将提取液抽滤，合并，70℃旋转蒸发至原体积的1/10，得浓缩液；浓缩液用其5倍体积的去离子水溶解，用正丁醇等体积萃取三次，合并，50℃旋转蒸发浓缩至干得粗品；粗品用质量浓度20%甲醇溶解后，通过大孔树脂（XAD-16）柱分离，树脂量为25g，用质量浓度80%乙醇进行洗脱，采用恒定流速2 mL·min-1，共收集100mL，于40℃旋转蒸发浓缩，冷冻干燥后得到了淡黄色粉末，即为具有抑制宫颈癌细胞的金银花有效成分；（4）菊花有效成分制备：菊花，粉碎，过60目筛，加其4倍重量水回流提取3次，每次1h，将提取液抽滤，合并，70℃旋转蒸发至原体积的1/10，得浓缩液；浓缩液用其5倍体积的去离子水溶解，用正丁醇等体积萃取三次，合并，50℃旋转蒸发浓缩至干得粗品；粗品用质量浓度20%甲醇溶解后，通过大孔树脂（AB-8）柱分离，树脂量为25g，用质量浓度70%乙醇进行洗脱，采用恒定流速2 mL·min-1，共收集100mL，于40℃旋转蒸发浓缩，冷冻干燥后得到了黄色粉末，即为具有抑制宫颈癌细胞的菊花有效成分；（5）中草药组合物制备：按重量份数计取：瓜蒌有效成分1-10份，益母草有效成分1-10份，金银花有效成分1-10份，菊花有效成分1-10份；混合，得中草药组合物。与现有技术相比，本专利技术的有益效果体现在：（1）本专利技术操作方法简单，工艺路线短，缩短了生产周期。（2）本专利技术将几味药有效成分复配，改善了某一味药物成分单一，提高了中药对肿瘤细胞的抑制效果。（3）本专利技术的药物安全可控，便于保管、贮存和运输。（4）本专利技术采取的提取有效成分的方法主要为乙醇和水回流提取法，将中药配伍的传统理论与现代药学、植物化学结合起来，有效成分配伍，得有效抑制宫颈癌细胞的复方药物。附图说明图1为本专利技术的工艺流程简图。具体实施方式以下以具体实施例来说明本专利技术的技术方案，但本专利技术的保护范围不限于此。本专利技术的中草药组合物用二甲亚砜（DMSO）溶解使之成为100μg/mL浓度，用于细胞试验，通过使用酶标仪于570nm 波长处读取本文档来自技高网...
【技术保护点】
抑制宫颈癌细胞的中草药组合物，其特征是：该中草药组合物由原料有效成分组成，按重量份数计：瓜蒌有效成分1‑10份，益母草有效成分1‑10份，金银花有效成分1‑10份，菊花有效成分1‑10份。
【技术特征摘要】
1.抑制宫颈癌细胞的中草药组合物，其特征是：该中草药组合物由原料有效成分组成，按重量份数计：瓜蒌有效成分1-10份，益母草有效成分1-10份，金银花有效成分1-10份，菊花有效成分1-10份。2.如权利要求1所述的抑制宫颈癌细胞的中草药组合物，其特征是：该中草药组合物由原料有效成分组成，按重量份数计：瓜蒌有效成分5-10份，益母草有效成分1-10份，金银花有效成分1-10份，菊花有效成分1-10份。3.如权利要求1所述的抑制宫颈癌细胞的中草药组合物，其特征是：该中草药组合物由原料有效成分组成，按重量份数计：瓜蒌有效成分5-10份，益母草有效成分5-10份，金银花有效成分1-10份，菊花有效成分1-10份。4.如权利要求1所述的抑制宫颈癌细胞的中草药组合物，其特征是：该中草药组合物由原料有效成分组成，按重量份数计：瓜蒌有效成分5-10份，益母草有效成分5-10份，金银花有效成分5-10份，菊花有效成分1-5份。5.如权利要求1所述的抑制宫颈癌细胞的中草药组合物，其特征是：该中草药组合物由原料有效成分组成，按重量份数计：瓜蒌有效成分10份，益母草有效成分10份，金银花有效成分8份，菊花有效成分5份。6.如权利要求1所述的抑制宫颈癌细胞的中草药组合物的制备方法，其特征是该中草药组合物的制备方法包括以下步骤：（1）瓜蒌有效成分制备：瓜蒌，粉碎，过60目筛，加其4倍重量的质量浓度 95%乙醇超声提取3次，每次40 min，抽滤；药渣用其3倍重量质量浓度 95%乙醇回流提取3次，每次1h，将提取液抽滤；合并两次滤液，40℃旋转蒸发至原体积的1/10，得浓缩液；用浓缩液5倍体积的去离子水溶解，石油醚等体积萃取三次，合并，50℃旋转蒸发浓缩至干得粗品；粗品用甲醇溶解后，通过硅胶柱层析分离，以石油醚:乙酸乙酯=12:1 (v/v)作为洗脱剂进行洗脱，采用恒定流速2 mL·min-1，每20mL收集一次，共收集100mL结束；收集40-50min的馏分于50℃旋转蒸发浓缩，冷冻干燥后得到白色非晶体性粉末，即为具有抑制宫颈...
【专利技术属性】
技术研发人员：贾建波，程倩，李东，朱春，孙金凤，
申请(专利权)人：淮阴工学院，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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