本发明专利技术公开了一种复方中药茵栀黄的质量控制方法，该方法包括：通过进行多种色谱柱选择、流动相的选择、柱温、流速的设定、前处理方法的优化、流动相梯度的设置，建立茵栀黄注射液的色谱‑紫外‑质谱指纹图谱；利用LCMS‑IT‑TOF技术对茵栀黄注射液进行定性分析：对30个峰进行推导，归属推导出24种成分，对剩余的6个峰进行分子式的推导，鉴定11种物质。本发明专利技术利用先进的LCMS‑IT‑TOF对茵栀黄注射液进行定性分析，发现了11种未报到的新物质，还利用三重四级杆线性离子阱液质联用和液相技术，测定了五种茵栀黄制剂中16种成分的含量。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医药
，尤其涉及一种复方中药茵栀黄的质量控制方法。
技术介绍
茵栀黄注射液作为一剂传统中药注射液，可抗菌消炎、利湿退黄，在临床上应用广泛，疗效已得到肯定。但是，近年来有关茵栀黄注射液的不良反应的报道也时有发生，这不得不让深思，并采取相应的措施：1、严格按照药品说明书中推荐的剂量使用，2、要重视对患者既往过敏史的询问要重视对患者既往过敏史的询问，3、合理配伍，除此以外，质量监管部门还有必要制定比较完善的标准来加大监管力度，中国药典(2010版)中讲述了茵栀黄口服液的鉴别方法，通过薄层色谱法对照茵陈、栀子对照药材进行鉴别，另外还要检查它的相对密度，pH值，对于含量测定，规定茵栀黄口服液中黄芩提取物每一毫升含黄芩苷应为0.34～0.46g，栀子提取物中栀子苷的含量不得少于0.8mg/mL。茵栀黄注射液质量标准收载于卫生部药品标准中药成方制剂第十四册)，明确规定的茵栀黄注射液检查项目有pH值、热源、炽灼残渣、含量测定，其中含量测定采用分光光度法，要求每毫升黄黄芩苷应为20.0-22.5mg，但是茵栀黄复方制剂各味药材所含化学成分复杂，仅仅测定茵栀黄制剂中黄芩苷、绿原酸、栀子苷的含量是远远不够的，还有必要对它所含其他主要成分进行定性定量分析，建立质量控制体系。茵栀黄注射液作为一剂传统中药注射液，由茵陈、栀子、金银花提取物和黄芩甙组方配伍而成，用于清热，解毒，利湿，退黄，在临床上应用广泛，疗效已得到肯定。但茵栀黄复方制剂各味药材所含化学成分复杂，依据中国药典和有关部颁标准(中药成方制剂第十四册WS3-B-2736-97)，仅测定茵栀黄制剂中黄芩苷、 绿原酸、栀子苷的含量不尽合理，有必要对它所含其他主要成分进行化学指纹和定量分析，建立质量控制体系。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种复方中药茵栀黄的质量控制方法，旨在解决目前测定茵栀黄制剂中黄芩苷、绿原酸、栀子苷的含量不尽合理，对含有的其他主要成分没有进行化学指纹和定量分析，没有建立质量控制体系的问题。本专利技术是这样实现的，一种复方中药茵栀黄的质量控制方法，该复方中药茵栀黄的质量控制方法包括以下步骤：建立茵栀黄注射液的色谱-紫外吸收指纹图谱：通过进行多种色谱柱选择、检测波长的选择、流动相的选择、柱温、流速的设定、前处理方法的优化、流动相梯度的设置，建立茵栀黄注射液的高效液相色谱-光二极管阵列HPLC-DAD指纹图谱；茵栀黄注射液化学成分的高分辨质谱表征：运用色谱-离子阱-飞行时间质谱技术LCMS-IT-TOF对来源于茵陈、栀子、黄芩和金银花四味药材的主要成分进行系统分析，根据分子离子和分子离子的多级特征碎片信息，结合对照标准品相应数据及相关信息，初步鉴定茵栀黄注射液中的化学成分；茵栀黄中药制剂中化学组分的定量测定：利用三重四极杆线性离子阱液-质联用仪中多反应检测的分析方法，测定并比较茵栀黄注射液、口服液及几种制剂中多个化学成分的含量。进一步，进行多种色谱柱选择、检测波长的选择、流动相的选择、柱温、流速的设定、前处理方法的优化、流动相梯度的设置具体方法为：在色谱条件一致的情况下根据Diamosil(钻石)C18柱(5um，2504.6mm)，AgilentC18柱(5um，2504.6mm)，AgilentC8(5um，2504.6mm)柱三种色谱柱对混标的分离效果进行色谱柱选择；根据240nm，280nm，335nm和大部分物质强吸收波长210nm这四个不同检测波长下绿原酸、栀子苷、黄芩苷的分离情况选择检测波长；根据甲醇+0.1％磷酸水，甲醇+0.1％乙酸水，甲醇+0.1％甲酸水三种流动相对样品溶液的分离情况进行流动相的选择和流动相梯度的设置；对不控制、25℃、30℃、35℃、40℃五个条件比较后进行柱温选择；对流速选用0.5mL/min，0.8mL/min，1.0mL/min三种流速比较后进行设定；前处理方法为：原液直接过膜，经冻干机冻干呈冻干粉后用一比一的甲醇水溶解提取得到样液、用乙腈提取加盐分相所得样液、过MAX固相萃取小柱、经旋转蒸发后用一比一的甲醇水溶解提取得到样液。进一步，茵栀黄注射液的HPLC-DAD色谱条件为：安捷伦C8柱(250mm 4.6um)，检测波长240nm，柱温30C，流动相为甲醇(A)+0.1％乙酸(B)，流动相梯度设置为0～15min：92％～88％B，15～40min：88％～70％B，40～50min：70％～50％B，50～65min：50～65％B，65～70min：65％B，70～75min：65％～92％B，75～80min：92％B，流速选择1mL/min，原液过膜上机，进样量10uL。进一步，采用LCMS-IT-TOF技术对茵栀黄注射液化学成分进行分析方法为：通过改流动相为甲醇+5mM乙酸铵对HPLC色谱条件优化；选用负离子模式扫描，雾化N2气压力345kpa，干燥N2流速10L/min，干燥N2气温度350℃；毛细管电压4000V，碎裂电压100V，锥孔电压65V完成HPLC-MS质谱条件的优化；通过HPLC-MS质谱条件的优化对30个峰进行推导，归属推导出24种成分，对剩余的6个峰进行分子式的推导并鉴定推导出的11种物质。进一步，鉴定推导出的11种物质为对肌醇、新绿原酸、异绿原酸A、甲基条叶蓟素、千层质素A、鸡矢藤次苷甲酯、2’，3,5,6’,7-pentahydroxyflavone、6-dihydroxy-7-O-glucosideflavone、黄芩素、Aloeemodin-w-o-β -D-glucopyranoside、emodim-1-o-β——D-glucopyranoside。进一步，利用三重四极杆线性离子阱液-质联用仪中多反应检测的分析方法，测定五种茵栀黄制剂中16种成分的含量。进一步，所述的五种茵栀黄制剂为2种软胶囊、颗粒、口服液、注射液；16种成分为：咖啡酸、栀子酸，表儿茶素，大黄酚，大黄素、槲皮素，木犀草苷，大黄素甲醚，滨蒿内酯、肌醇、新绿原酸、黄芩苷、栀子苷、绿原酸、汉黄芩苷、黄芩素。本专利技术从柱子的选择、流动相的选择、柱温、流速的设定，前处理方法的优化、流动相梯度的设置，建立了茵栀黄注射液的色谱-紫外-质谱(HPLC-DAD-MS)指纹图谱，利用先进的LCMS-IT-TOF技术对茵栀黄注射液进行定性分析，综合色谱、紫外光谱、质谱和有关文献对有关药材的信息，对30个峰进行推导，归属推导了24种成分，对剩余的6个峰进行了分子式的推导，发现了11种未报到的新物质，还利用三重四级杆线性离子阱液质联用和液相技术，测定了五种茵栀黄制剂中13种成分的含量。附图说明图1是本专利技术提供的复方中药茵栀黄的质量控制方法流程图。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。下面结合附图对本专利技术的应用原理作进一步描述。如图1所示：一种复方中药茵栀黄的质量控制方法，该复方中药茵栀黄的质量控制方法包括以下步骤：S101：建立茵栀黄注射液的色谱-紫外吸收指纹图谱：通过进行多种色谱柱选择、检测波长的选择、流动相的选择、柱温、流速的设定、前处理方法的优 化、本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种复方中药茵栀黄的质量控制方法，其特征在于，该复方中药茵栀黄的质量控制方法包括以下步骤：建立茵栀黄注射液的色谱‑紫外吸收指纹图谱：通过进行多种色谱柱选择、检测波长的选择、流动相的选择、柱温、流速的设定、前处理方法的优化、流动相梯度的设置，建立茵栀黄注射液的高效液相色谱‑光二极管阵列HPLC‑DAD指纹图谱；茵栀黄注射液化学成分的高分辨质谱表征：运用色谱‑离子阱‑飞行时间质谱技术LCMS‑IT‑TOF对来源于茵陈、栀子、黄芩和金银花四味药材的主要成分进行系统分析，根据分子离子和分子离子的多级特征碎片信息，结合对照标准品相应数据及相关信息，初步鉴定茵栀黄注射液中的化学成分；茵栀黄中药制剂中化学组分的定量测定：利用三重四极杆线性离子阱液‑质联用仪中多反应检测的分析方法，测定并比较茵栀黄注射液、口服液及几种制剂中多个化学成分的含量。
【技术特征摘要】
1.一种复方中药茵栀黄的质量控制方法，其特征在于，该复方中药茵栀黄的质量控制方法包括以下步骤：建立茵栀黄注射液的色谱-紫外吸收指纹图谱：通过进行多种色谱柱选择、检测波长的选择、流动相的选择、柱温、流速的设定、前处理方法的优化、流动相梯度的设置，建立茵栀黄注射液的高效液相色谱-光二极管阵列HPLC-DAD指纹图谱；茵栀黄注射液化学成分的高分辨质谱表征：运用色谱-离子阱-飞行时间质谱技术LCMS-IT-TOF对来源于茵陈、栀子、黄芩和金银花四味药材的主要成分进行系统分析，根据分子离子和分子离子的多级特征碎片信息，结合对照标准品相应数据及相关信息，初步鉴定茵栀黄注射液中的化学成分；茵栀黄中药制剂中化学组分的定量测定：利用三重四极杆线性离子阱液-质联用仪中多反应检测的分析方法，测定并比较茵栀黄注射液、口服液及几种制剂中多个化学成分的含量。2.如权利要求1所述的复方中药茵栀黄的质量控制方法，其特征在于，进行多种色谱柱选择、检测波长的选择、流动相的选择、柱温、流速的设定、前处理方法的优化、流动相梯度的设置具体方法为：在色谱条件一致的情况下根据DiamosilC18柱，AgilentC18柱，AgilentC8柱三种色谱柱对混标的分离效果进行色谱柱选择；根据240nm，280nm，335nm和大部分物质强吸收波长210nm四个不同检测波长下绿原酸、栀子苷、黄芩苷的分离情况选择检测波长；根据甲醇+0.1％磷酸水，甲醇+0.1％乙酸水，甲醇+0.1％甲酸水三种流动相对样品溶液的分离情况进行流动相的选择和流动相梯度的设置；对不控制、25℃、30℃、35℃、40℃五个条件比较后进行柱温选择；对流速选用0.5mL/min，0.8mL/min，1.0mL/min三种流速比较后进行设定；前处理方法为：原液直接过膜，经冻干机冻干呈冻干粉后用一比一的甲醇水溶解提取得到样液、用乙腈提取加盐分相所得样液、过MAX固相萃取小柱、经旋转蒸发后用一比一的甲醇水溶解提取得到样液。3.如权利要求1所述的复方中药茵栀黄的质量控制方法，其特征在于，茵栀黄注射液的HPLC-DAD色谱条件为...
【专利技术属性】
技术研发人员：郭宾，刘钰，曾乐，程雨晴，刘妍妍，魏丽娟，
申请(专利权)人：湖南师范大学，
类型：发明
国别省市：湖南;43
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。