翻白草三萜化合物制造技术

本发明专利技术提出一种如式(I)所示的三萜类化合物，该化合物具有制备治疗2型糖尿病的药物的用途。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种翻白草三萜化合物。
技术介绍
中药翻白草是蔷薇科委陵菜属植物翻白草(Potentilla discolor Bunge)的干燥全草，始载于《救荒本草》。翻白草广泛分布于北半球的温带和寒带，我国以山东、辽宁、安徽三省该药材产量最大，此外，河北、河南、内蒙古、湖南、江苏和广西等省份也有分布。其性甘、苦、平，具有清热解毒、止血消肿之功效，可用于治疗痢疾、疟疾、肺痈等症。对翻白草化学成分的研究起始于19世纪30年代，目前，从翻白草中分离获取的化合物主要是三萜类、黄酮类、甾体类以及多酚类。翻白草含有丰富的三萜类化合物，按其骨架结构，主要分为如下几类：①乌苏酸、坡模醇酸、3β,24-二羟基-乌苏-12烯-28-酸、3β-羟基-乌苏-12烯-28-酸、委陵菜酸和2α,3β,19α-三羟基-乌苏-12烯-28-酸等乌苏烷型三萜[1,2]。②齐墩果酸、3β,24-二羟基-齐墩果-12烯-28-酸和野蔷薇苷[3]等齐墩果烷型三萜。③2-羟基白桦酸[3]，白桦酸，3α,30–二羟基-20(29)-烯-27-白桦酸等羽扇豆烷型三萜。现有技术文献[1]薛培凤,乔梁,梁鸿,等.多裂委陵菜化学成分的研究[J].北京大学学报(医学版),2004,36(1):21.[2]薛培凤,尹婷,梁鸿,等.翻白草化学成分研究[J].中国药学杂志,2005,40(14):1052.[3]张莉,杨杰,陈筱清,等.翻白草的化学成分[J].植物资源与环境学报,2010,19(2):94-96.
技术实现思路
专利技术人对翻白草(Potentilla discolor Bunge)的化学成分、提取工艺、药理活性进行了系统研究。从翻白草提取分离出10个三萜类化合物(化合物1～10)。其中,化合物5为新化合物，经结构鉴定，命名为(20S)-3α-羟基-29-二甲氧基-27-白桦酸，其结构如式(I)所示：即，本专利技术包括以下内容。本专利技术提供上述式(I)所示的三萜类化合物。本专利技术进一步提供一种翻白草总三萜，其中含有式(I)所示的三萜类化合物。本专利技术进一步提供一种翻白草总三萜，其中含有式(I)所示的三萜类化合物、蔷薇酸、2α-羟基乌苏酸、2α,3β,19α-三羟基-熊果酸、3α,30-二羟基-20(29)-烯-27-白桦酸、熊果酸、山楂酸、19α-羟基熊果酸、2α,3α-二羟基-12-烯-28-乌苏酸、齐墩果酸。附图说明图1为翻白草提取分离过程示意图；图2-1、2-2为(20S)-3α-羟基-29-二甲氧基-27-白桦酸1H NMR谱图；图3-1、3-2、3-3为(20S)-3α-羟基-29-二甲氧基-27-白桦酸13CNMR谱图；图4-1、4-2为(20S)-3α-羟基-29-二甲氧基-27-白桦酸2D-NMR谱图；图5-1、5-2、5-3为(20S)-3α-羟基-29-二甲氧基-27-白桦酸ROESY谱图。具体实施方式一、化合物的提取1、实验方法1.1实验仪器与材料熔点用X-4型双目镜显微熔点测定仪(温度未校正，北京泰克仪器有限公司制造)测定；UV用Shimadzu UV-2501PC型可见-紫外分光光度计测定；NMR：Bruker AV-500型核磁共振仪，δ为ppm，J为Hz。薄层层析硅胶H、薄层色谱硅胶GF254、柱层析硅胶(100-200目，200-300目，青岛海洋化工厂)；ODS柱(40-60μm，Fuji)，SephadexLH-20葡聚糖凝胶(购自Pharmacia公司)；MCI柱(小孔树脂柱、日本三菱化工株式会社)。所用试剂均为分析纯级。如无特殊说明，本专利技术所指比例以及百分比均指体积。1.2植物来源翻白草(Potentilla discolor Bunge)药材采自广西，植物标本经鉴定为蔷薇科委陵菜属植物翻白草，标本存放于中国药科大学中药分析教研室。1.3提取分离取采自广西的干燥翻白草全草14kg，如图1所示，用90％乙醇水溶液加热回流提取3次，每次3h，合并提取液，减压蒸去大部分乙醇，用水混悬，然后用石油醚萃取三次，回收溶剂后得到石油醚部分160g，然后用乙酸乙酯萃取三次，回收溶剂后，得乙酸乙酯部分300g。乙酸乙酯部分(300g)用400g硅胶(100-300目)拌样，3.0kg(200-300目)进行硅胶柱层析，氯仿-甲醇(1:0-0:1，v：v)梯度洗脱，薄层层析(TLC)检测合并相同流分。将30-50体积％和50-70体积％的流分合并后减压干燥，进行小孔树脂(MCI)柱层析，用水-甲醇(10：0-0:10，v：v)梯度洗脱，收集70％-90％甲醇洗脱的成分，减压回收溶剂至浸膏状，得到有效部位。取少量该有效部位，经颜色反应、Libermann-Burchard、Molish反应，提示含有较多三萜类化合物(翻白草总三萜)。再用甲醇溶解有效部位，进行反向C18柱层析，丙酮-水(1:0-0:1，v：v)梯度洗脱，反复纯化，得化合物1(17mg)，2(25mg)，3(8mg)，4(20mg)，5(8mg)，6(100mg)，7(5mg)，8(4mg)，9(5mg)，10(120mg)。化合物5较多地来自于反相C18柱层析的50-70体积％丙酮-水洗脱的流分。翻白草分离流程如图1所示。依据与对照品TLC比对以及各种谱图数据[IR、MS、1H NMR、13C NMR和2D NMR(HMQC、HMBC、COSY)]最终确证了所得到的化合物分别为：蔷薇酸(euscaphic acid,1)、2α-羟基乌苏酸(corosolic acid,2)、2α,3β,19α-三羟基-熊果酸(tormentic acid,3)、3α,30-二羟基-20(29)-烯-27-白桦酸(3α,30-dihydroxylup-20(29)-en-27-oicacid,4)、(20S)-3α-羟基-29-二甲氧基-27-白桦酸((20S)-3α-hydroxy-29-dimethoxy-lupan-27-oic acid,5)和熊果酸(ursolic acid,6)、山楂酸(maslinic acid,7)、19α-羟基熊果酸(pomolic acid,8)、2α,3α-二羟基-12-烯-28-乌苏酸(2α,3α-dihydroxyurs-12-en-28-oic acid,9)、齐墩果酸(oleanolic acid,10)。其中，化合物(20S)-3α-羟基-29-二甲氧基-27-白桦酸((20S)-3α-hydroxy-29-dimethoxy-lupan-27-oic acid,5)未见文献报道，为新化合物。2、结构鉴定化合物5：性状：白色无定形粉末(MeOH)，易溶于甲醇；颜色反应：10％硫酸乙醇溶液反应显紫红色，Libermann-Burchard反应呈阳性，Molish反应阴性，以上信息提示为三萜类化合物。HR-TOF-MS给出分子量m/z[M-H]-517.3900(calcd for C32H53O5，517.3898)，结合13C-NMR和1H-NMR谱推测其分子式为C32H54O5。IR(KBr)νmax cm-1 3447,1685；1H-NMR(C5D5N),δ(ppm):1.79–1.56(m,2H,H-1),2.00–1.72本文档来自技高网...

【技术保护点】
如式(I)所示的三萜类化合物，

【技术特征摘要】
1.如式(I)所示的三萜类化合物，2.如权利要求1所述的三萜类化合物，由蔷薇科委陵菜属植物翻白草分离而得。3.一种翻白草总三萜，其中含有权利要求1所述的三萜类化合物。4.一种翻白草总三萜，其中含有权利要求1所述的三萜...

【专利技术属性】
技术研发人员：谈景福，朱光明，俞磊明，朱俊杰，王立会，
申请(专利权)人：上海市药材有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31