一种宽叶缬草根挥发油的制备方法及其消炎镇痛应用技术

本发明专利技术涉及一种宽叶缬草根挥发油的制备方法及其消炎镇痛应用，制备方法包括以下步骤：将宽叶缬草根粉碎，过20目筛；将原料重量1~3%的纤维素酶溶解在原料重量0.5~1倍的pH4.0~5.0的醋酸/醋酸钠缓冲溶液中，混合均匀；将所得的缓冲溶液喷洒到宽叶缬草根粉末中，密封，薄膜包裹，于40~50℃发酵5~7d；将发酵后的原料放入频率为40KHz的超声装置中提取2~3h，过滤，所得提取液再经减压浓缩、有机溶剂萃取、无水硫酸钠干燥、减压浓缩等步骤，即得宽叶缬草根挥发油。经过药效学的评价，宽叶缬草根挥发油具有明显的消炎镇痛的功效，应用前景十分广泛。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于医药
，具体涉及一种宽叶缬草根挥发油的制备方法及其消炎镇痛应用。
技术介绍
挥发油是一类具有治疗作用的活性成分，是从中药中提取的挥发性成分的总称。化学成分复杂，多数具有芳香气味，在临床上具有多方面的医疗作用。经过查阅文献，可知挥发油类中药的主要药理作用为：（1）对中枢神经系统的作用，主要在于镇痛、镇静、解热、抗炎等；（2）对心血管系统的作用；（3）对呼吸系统的作用；（4）对消化系统作用；（5）抗菌抗病毒作用；（6）抗肿瘤作用。宽叶缬草根为败酱科缬草属植物宽叶缬草的干燥根，具有安心神、祛风湿、行气血和止痛等功效，主治心神不安、心悸失眠、风湿痹痛、脘腹胀痛和跌打损伤等症。宽叶缬草根挥发油以萜烯类化合物为主，分别含有烯、醇、酮、酯和醚类化合物。其中乙酸龙脑酯、香树烯和莰烯为主要成分，乙酸龙脑酯的含量为37.95%。萜烯类化合物具有止血、抗炎、止痛、消肿、健胃、清热解毒等多种功效，其中的蒎烯、乙酸龙脑酯等的药理作用早已得到证实。由此可见，挥发油包含的化学成分具有强大的生物活性，具有巨大的潜在医用价值。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种宽叶缬草根挥发油的制备方法及其应用，该挥发油稳定性好、生物活性成分含量高，且消炎镇痛效果明显。为实现上述目的，本专利技术通过如下技术方案予以实现：a. 将宽叶缬草根粉碎，过20目筛；b. 将原料重量1~3%的纤维素酶溶解在原料重量0.5~1倍的pH4.0~5.0的醋酸/醋酸钠缓冲溶液中，混合均匀；c. 将所得的缓冲溶液喷洒到宽叶缬草根粉末中，密封，薄膜包裹，于40~50℃发酵5~7d；d. 将发酵后的原料放入频率为40KHz的超声装置中于超声温度60~70℃的条件下提取2~3h，过滤，所得提取液再经减压浓缩、有机溶剂萃取、无水硫酸钠干燥、减压浓缩等步骤，即得宽叶缬草根挥发油。步骤b中所述的纤维素酶的活性为40~60U/mg。步骤d中所述的有机溶剂为石油醚或乙醚中的任意一种。本专利技术制备的宽叶缬草根挥发油的药理活性通过以下体外药理实验得到了验证：（1）抗炎实验（鼠耳肿胀法）取雄性小鼠50只，体重18~22g，每组10只，模型组（食用大豆油）、阳性对照组（氢化可的松，25mg/kg）、给药组分为低剂量组（100mg/kg）、中剂量组（200mg/kg）和高剂量组（400mg/kg），分别腹腔注射0.2mL不同浓度的试药后，于小鼠右耳涂二甲苯，左耳保持原状，30min后脱颈处死，剪下两耳用8mm打孔器分别在同一位置打下圆耳片，电子天平精密称重，以左右耳片重量只差为肿胀度，计算抑制率：抑制率=（空白组平均肿胀度-给药组品均肿胀度）/空白组平均肿胀度×100%表1 宽叶缬草根挥发油对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响（±S）组别动物数给药剂量（mg/kg）肿胀度（mg）耳肿胀抑制率（%）模型组10－10.86±1.87阳性对照组10254.18±0.37▲▲61.51低剂量组101007.65±1.34▲29.56中剂量组102006.07±1.57▲▲44.11高剂量组104004.49±1.72▲▲58.66与空白对照组比较，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01。由表1结果表明，阳性对照组、给药组与模型组比较均有显著性意义，均能明显对抗二甲苯所致小鼠耳廓肿胀，高剂量组抗炎作用十分明显，与阳性对照组效果相当。（2）镇痛实验（醋酸致小鼠扭体反应）a.实验材料动物：昆明中小白鼠，体重22~26g，共50只；器材：注射器（1.0mL），天平药品与试剂：0.7%醋酸（现配），0.9%氯化钠注射液，盐酸杜冷丁2mg/mL，宽叶缬草根挥发油配置成梯度含量为5、10、20mg/mL的药液。b.方法与步骤随机将试验小白鼠按10只为一组分组，其中一组为空白对照组，按0.2mL/10g体重剂量以腹腔注射给以0.9%氯化钠注射液；阳性对照组按60mg/kg剂量以腹腔注射给以阿司匹林。其余为按不同剂量梯度灌胃给以宽叶缬草根挥发油的试验药物组。各灌胃给药组的给药溶剂为0.2ml/10g体重。连续给药5天，每天给药1次。第5天给药20min后腹腔注射0.7%醋酸溶液0.2mL/只，观察记录注射醋酸溶液后20min内每只小鼠的扭体反应（腹部后腿伸张，臀部抬高）次数，并对实验结果采用SPSS15.0软件进行统计分析，以小鼠扭体反应抑制率评价药效。抑制率%=（空白对照组扭体均数-药物组扭体均数）/空白对照组扭体均数×100%c.实验结果实验结果如表2所示：表2 对醋酸扭体法痛阈实验的影响（n=10，±S）组别剂量（mg/kg）扭体次数抑制率（%）空白对照组－78.00±4.42阿司匹林组6041.53±3.08**46.76低剂量组10061.24±5.28*21.49中剂量组20052.24±6.76**33.03高剂量组40042.71±10.02**45.24注：与空白组比较， *P＜0.05，**P＜0.01。注射醋酸后可引起小鼠较持久的疼痛刺激，小鼠反复出现腹部后腿伸张，臀部高起（扭体）反应。结果显示，阿司匹林组、给药组与空白对照组比较，均有显著性差异。阿司匹林对醋酸所致小鼠扭体次数明显下降（P＜0.01），镇痛作用非常明显，其疼痛抑制率为46.76%。宽叶缬草根挥发油各组均能不同程度减少由醋酸所致的小鼠扭体反应，具有较明显的镇痛作用，且呈剂量依赖性。本专利技术制备方法简单易行，所得挥发油生物活性高，且消炎镇痛效果明显。下面将结合具体实施方式进一步说明本专利技术，但本专利技术要求保护的范围并不局限于下列实施方式。具体实施方式：实施例1：将宽叶缬草根粉碎，过20目筛，取1kg粉末备用；将10g的活性为40u/mg的纤维素酶溶解在500mL的pH4.0的醋酸/醋酸钠缓冲溶液中，混合均匀；将所得的缓冲溶液喷洒到宽叶缬草根粉末中，密封，薄膜包裹，于40℃发酵5d；将发酵后的原料放入频率为40KHz的超声装置中于超声温度60℃的条件下提取2h，过滤，所得提取液再经减压浓缩、石油醚萃取、无水硫酸钠干燥、减压浓缩等步骤，即得宽叶缬草根挥发油17.2mL。实施例2：将宽叶缬草根粉碎，过20目筛，取1kg粉末备用；将20g的活性为50u/mg的纤维素酶溶解在1L的pH4.5的醋酸/醋酸钠缓冲溶液中，混合均匀；将所得的缓冲溶液喷洒到宽叶缬草根粉末中，密封，薄膜包裹，于50℃发酵7d；将发酵后的原料放入频率为40KHz的超声装置中于超声温度70℃的条件下提取2.5h，过滤，所得提取液再经减压浓缩、乙醚萃取、无水硫酸钠干燥、减压浓缩等步骤，即得宽叶缬草根挥发油20.8mL。实施例3：将宽叶缬草根粉碎，过20目筛，取1kg粉末备用；将30g的活性为60u/mg的纤维素酶溶解在500mL的pH5.0的醋酸/醋酸钠缓冲溶液中，混合均匀；将所得的缓冲溶液喷洒到宽叶缬草根粉末中，密封，薄膜包裹，于45℃发酵6d；将发酵后的原料放入频率为40KHz的超声装置中于超声温度65℃的条件下提取3h，过滤，所得提取液再经减压浓缩、乙醚萃取、无水硫酸钠干燥、减压浓缩等步骤，即得宽叶缬草根挥发油15.9mL。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种宽叶缬草根挥发油的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：a. 将宽叶缬草根粉碎，过20目筛；b. 将原料重量1~3%的纤维素酶溶解在原料重量0.5~1倍的pH4.0~5.0的醋酸/醋酸钠缓冲溶液中，混合均匀；c. 将所得的缓冲溶液喷洒到宽叶缬草根粉末中，密封，薄膜包裹，于40~50℃发酵5~7d；d. 将发酵后的原料放入频率为40KHz的超声装置中于超声温度60~70℃的条件下提取2~3h，过滤，所得提取液再经减压浓缩、有机溶剂萃取、无水硫酸钠干燥、减压浓缩等步骤，即得宽叶缬草根挥发油。

【技术特征摘要】
1.一种宽叶缬草根挥发油的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：a. 将宽叶缬草根粉碎，过20目筛；b. 将原料重量1~3%的纤维素酶溶解在原料重量0.5~1倍的pH4.0~5.0的醋酸/醋酸钠缓冲溶液中，混合均匀；c. 将所得的缓冲溶液喷洒到宽叶缬草根粉末中，密封，薄膜包裹，于40~50℃发酵5~7d；d. 将发酵后的原料放入频率为40KHz的超声装置中于超声温度60~70℃的条件下提取2~3h，过滤，所得提取...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨成东，
申请(专利权)人：南京泽朗医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32