一种测定特异性生长因子的试剂盒及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种测定特异性生长因子的试剂盒及其制备方法，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：试剂R1：4‑羟乙基哌嗪丙磺酸2~100mmol/L、磷酸二氢钠50~500mmol/L、乙二胺四乙酸二钠1~20mmol/L、异噻唑啉酮1~10mmol/L，其溶剂为纯化水，试剂R2：茚三酮0.1~4.0mmol/L，异噻唑啉酮1~20mmol/L、甘油300~700mmol/L，其溶剂为纯化水，包括以下步骤：按照组分含量配制好试剂；将待测样本与试剂R1和试剂R2混合，使其充分反应；用全自动生化分析仪测定反应后的吸光度差值；根据吸光度变化值计算出样本中的特异性生长因子的浓度。本发明专利技术具有操作方便、准确度高等优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医学及生物化学
，具体来说是一种测定特异性生长因子的试剂盒及其制备方法。
技术介绍
特异性生长因子是恶性肿瘤及其周边毛细血管大量扩增的结果，并随着肿瘤的形成和增长逐渐释放到外周血液，病人血液中存在TSGF，TSGF全称Tumor Supplied Group of Factors,中文译作恶性肿瘤相关物质群（肿瘤特异性生长因子），对恶性肿瘤血管增生起重要作用，在肿瘤形成早期即明显升高。血清TSGF是一种新的、敏感性和特异性较高的广谱肿瘤标志物，检测方法简便快捷，结果稳定，对恶性肿瘤的初筛、早期辅助诊断、疗效评价和预示肿瘤复发具有重要临床意义和应用价值。目前市场上检测特异性生长因子的产品种类有限，操作复杂，需对样品进行前处理，耗时长，不能应用于全自动生化分析仪，不能大批量的检测，而且市场上的检测特异性生长因子的产品的测定准确度不高，需要进行改进。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是为了克服现有技术操作复杂以及测定准确度低的缺陷，而提供一种测定特异性生长因子的试剂盒及其制备方法。本专利技术解决上述技术问题提供的技术方案是：本专利技术公开了一种测定特异性生长因子的试剂盒，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：试剂R1：4-羟乙基哌嗪丙磺酸 2~100mmol/L磷酸二氢钠 50~500mmol/L乙二胺四乙酸二钠 1~20mmol/L异噻唑啉酮 1~10mmol/L其溶剂为纯化水。试剂R2：茚三酮 0.1~4.0mmol/L异噻唑啉酮 1~20mmol/L甘油 300~700mmol/L其溶剂为纯化水。作为优选，本专利技术公开了一种测定特异性生长因子的试剂盒，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：试剂R1：4-羟乙基哌嗪丙磺酸 51mmol/L磷酸二氢钠 275mmol/L乙二胺四乙酸二钠 11mmol/L异噻唑啉酮 6mmol/L其溶剂为纯化水。试剂R2：茚三酮 2.1mmol/L异噻唑啉酮 11mmol/L甘油 500mmol/L其溶剂为纯化水。作为优选，本专利技术公开了一种测定特异性生长因子的试剂盒，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：试剂R1：4-羟乙基哌嗪丙磺酸 80mmol/L磷酸二氢钠 55mmol/L乙二胺四乙酸二钠 10mmol/L异噻唑啉酮 6mmol/L其溶剂为纯化水。试剂R2：茚三酮 3mmol/L异噻唑啉酮 10mmol/L甘油 400mmol/L其溶剂为纯化水。作为优选，本专利技术公开了一种测定特异性生长因子的试剂盒，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：试剂R1：4-羟乙基哌嗪丙磺酸 2mmol/L磷酸二氢钠 50mmol/L乙二胺四乙酸二钠 20mmol/L异噻唑啉酮 10mmol/L其溶剂为纯化水。试剂R2：茚三酮 0.1mmol/L异噻唑啉酮 15mmol/L甘油 300mmol/L其溶剂为纯化水。作为优选，本专利技术还公开了上述测定特异性生长因子的试剂盒的制备方法和使用方法，包括以下步骤：（a）按照下列组分含量配制好试剂：试剂R1：4-羟乙基哌嗪丙磺酸 2~100mmol/L磷酸二氢钠 50~500mmol/L乙二胺四乙酸二钠 1~20mmol/L异噻唑啉酮 1~10mmol/L其溶剂为纯化水。试剂R2：茚三酮 0.1~4.0mmol/L异噻唑啉酮 1~20mmol/L甘油 300~700mmol/L其溶剂为纯化水。（b）将待测样本与试剂R1和试剂R2混合，使其充分反应；（c）用全自动生化分析仪测定反应后的吸光度差值；（d）根据吸光度变化值计算出样本中的特异性生长因子的浓度。本专利技术的检测原理是：本试剂通过特定的糖蛋白的代谢产物、带特定的氨基基团的糖脂以及游离的α-氨基酸等物质与样本中的特异性生长因子进行叠加偶联反应，反应剩余的识别物又与试剂中的特定显色剂进行显色反应形成蓝色产物，在波长570nm处测定该显色产物的吸光度值，并通过下述公式换算出样本中TSGF含量。ΔAU/min 待测样品平均每分钟的吸光度变化值ΔAB/min 校准液平均每分钟的吸光度变化值CS 校准液中TSGF的浓度与现有技术相比，本专利技术具有以下有益优点：本专利技术所述的测定特异性生长因子的试剂盒成本低，检测步骤简单，而且通过添加茚三酮，利用其显色反应原理，使得整个反应颜色变化的更明显，因此更容易被全自动生化分析仪检测到，因此准确度比较高，检测比较灵敏。具体实施方式以下结合具体实施例进一步说明，但本专利技术并不仅限于这些实施例。实施例1本专利技术的试剂盒包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，其中试剂R1：4-羟乙基哌嗪丙磺酸 51mmol/L磷酸二氢钠 275mmol/L乙二胺四乙酸二钠 11mmol/L异噻唑啉酮 6mmol/L其溶剂为纯化水。试剂R2：茚三酮 2.1mmol/L异噻唑啉酮 11mmol/L甘油 500mmol/L其溶剂为纯化水。实施例2本专利技术的试剂盒包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，其中试剂R1：4-羟乙基哌嗪丙磺酸 80mmol/L磷酸二氢钠 55mmol/L乙二胺四乙酸二钠 10mmol/L异噻唑啉酮 6mmol/L其溶剂为纯化水。试剂R2：茚三酮 3mmol/L异噻唑啉酮 10mmol/L甘油 400mmol/L其溶剂为纯化水。实施例3 本专利技术的试剂盒包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，其中试剂R1：4-羟乙基哌嗪丙磺酸 2mmol/L磷酸二氢钠 50mmol/L乙二胺四乙酸二钠 20mmol/L异噻唑啉酮 10mmol/L其溶剂为纯化水。试剂R2：茚三酮 0.1mmol/L异噻唑啉酮 15mmol/L甘油 300mmol/L其溶剂为纯化水。实施例4试剂盒的制备和使用方法1、按照下列组分含量配制好试剂：试剂R1：4-羟乙基哌嗪丙磺酸 51mmol/L磷酸二氢钠 275mmol/L乙二胺四乙酸二钠 11mmol/L异噻唑啉酮 6mmol/L其溶剂为纯化水。试剂R2：茚三酮 2本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种测定特异性生长因子的试剂盒，其特征在于：包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：试剂R1：4‑羟乙基哌嗪丙磺酸  2~100mmol/L磷酸二氢钠          50~500mmol/L乙二胺四乙酸二钠    1~20mmol/L异噻唑啉酮          1~10mmol/L其溶剂为纯化水试剂R2：茚三酮         0.1~4.0mmol/L异噻唑啉酮     1~20mmol/L甘油           300~700mmol/L其溶剂为纯化水。

【技术特征摘要】
1.一种测定特异性生长因子的试剂盒，其特征在于：包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：试剂R1：4-羟乙基哌嗪丙磺酸 2~100mmol/L磷酸二氢钠 50~500mmol/L乙二胺四乙酸二钠 1~20mmol/L异噻唑啉酮 1~10mmol/L其溶剂为纯化水试剂R2：茚三酮 0.1~4.0mmol/L异噻唑啉酮 1~20mmol/L甘油 300~700mmol/L其溶剂为纯化水。2.根据权利要求1所述的一种测定特异性生长因子的试剂盒，其特征在于：包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：试剂R1：4-羟乙基哌嗪丙磺酸 51mmol/L磷酸二氢钠 275mmol/L乙二胺四乙酸二钠 11mmol/L异噻唑啉酮 6mmol/L其溶剂为纯化水试剂R2：茚三酮 2.1mmol/L异噻唑啉酮 11mmol/L甘油 500mmol/L其溶剂为纯化水。3.根据权利要求1所述的一种测定特异性生长因子的试剂盒，其特征在于：包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：试剂R1：4-羟乙基哌嗪丙磺酸 80mmol/L磷酸二氢钠 55mmol/L乙二胺四乙酸二钠 10mmol/L异噻唑啉酮 6mmol/L其溶剂为纯化水...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡晓辉，庄庆华，吴铮，徐运，
申请(专利权)人：安徽伊普诺康生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽;34