对烟草或烟草制品进行前处理的方法及检测方法技术

本发明专利技术属于检测分析领域，涉及一种对烟草或烟草制品进行前处理的方法，包括如下步骤，(1)用乙腈浸提烟草样品或烟草制品样品，得到含羰基化合物的初提液；(2)向初提液中加入2,4‑二硝基苯肼和/或2,4‑二硝基苯肼溶液以及强酸溶液进行衍生化，分离得到含羰基化合物衍生化产物的提取液Ⅰ。本发明专利技术还涉及检测烟草或烟草制品中羰基化合物的方法、试剂盒及用途。本发明专利技术首次证实了烟草和烟草制品中含有羰基化合物，并且本发明专利技术方法准确定量出烟草或烟草制品中羰基化合物含量，检出限低，灵敏度高，重复性好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于检测分析领域，具体涉及一种对烟草或烟草制品进行前处理的方法，还涉及检测烟草或烟草制品中羰基化合物的方法。
技术介绍
羰基化合物是抽吸烟草制品产生的烟气中的一类重要有害成分，被列入烟气44种有害成分的“霍夫曼名单”。这类化合物包括甲醛、乙醛和丙烯醛等，其中含量最大的是乙醛。低分子量羰基化合物具有比较强的纤毛毒性，毒性最强的是丙烯醛、甲醛和乙醛等低分子量醛类化合物，其毒性随着分子量增加而逐渐降低。烟气中的羰基化合物主要来自于烟草制品中酚类物质的高温分解，而烟草制品中的酚类物质则是由非酶棕色化反应所形成的。目前，主流烟气中羰基化合物的检测方法包括：由玻璃纤维滤片捕集主流烟气的烟气粒相物，经溶剂浸提后，用高效液相色谱-紫外检测器进行定量分析。其中，浸提使用的溶剂通常为有机溶剂与水的混合物。而且，经研究发现，溶剂中的有机溶剂比例过高，会导致一部分羰基化合物的检测准确度降低，甚至有一些羰基化合物无法被检测出来。迄今为止，研究人员尚未发现烟草或烟草制品中含有羰基化合物，也未见对其进行羰基化合物的检测分析。
技术实现思路
本专利技术人经大量实验研究，证实了烟草和/或烟草制品中含有羰基化合物。本专利技术人还获得了一种对烟草或烟草制品进行前处理的方法，该方法能将烟草或烟草制品中的羰基化合物提取出来并转变成衍生化产物。在此基础上，本专利技术人还得到了一种检测烟草或烟草制品中羰基化合物的方法，通过检测羰基化合物衍生化产物来对烟草或烟草制品中的羰基化合物进行定量检测。该方法的准确度高，灵敏度高，检出限低，重复性良好。本专利技术第一方面涉及一种对烟草或烟草制品进行前处理的方法，包括如下步骤：(1)用乙腈浸提烟草样品或烟草制品样品，得到含羰基化合物的初提液；(2)向初提液中加入2,4-二硝基苯肼和/或2,4-二硝基苯肼溶液以及强酸溶液进行衍生化，分离得到含羰基化合物衍生化产物的提取液Ⅰ。本专利技术第一方面的一个实施方式中，还包括如下步骤：(3)向提取液Ⅰ中加入弱碱或弱碱溶液，混合，得到提取液Ⅱ。在一个实施方案中，所述弱碱选自吡啶和喹啉中的一种或多种，优选为吡啶。在一个实施方案中，所述弱碱溶液选自吡啶的乙腈溶液和喹啉的乙腈溶液中的一种或多种，优选为吡啶的乙腈溶液。在一个实施方案中，吡啶的乙腈溶液(以吡啶计)或者吡啶的添加量为300-700μL/(mL初提液)，优选为400-600μL/(mL初提液)，更优选为500μL/(mL初提液)。本专利技术第一方面的一个实施方式中，包括如下A至O中的任意一项或者多项：A.所述烟草制品选自可燃吸式烟草制品和非燃吸式烟草制品中的一种或多种；优选地，所述烟草制品为可燃吸式烟草制品，更优选为卷烟；B.所述羰基化合物选自甲醛、乙醛、丙酮、丙醛、丙烯醛、丁醛、2-丁酮和巴豆醛中的一种或多种；C.步骤(1)中，所述浸提的料液比为1:(10-50)(g/mL)，优选为1:(10-30)(g/mL)，更优选为1:20(g/mL)；D.步骤(1)中，所述浸提在振荡条件下进行；E.步骤(1)中，浸提时间为10-60分钟，优选为20-50分钟，更优选为20分钟、30分钟或50分钟；F.步骤(1)中，浸提温度为常温，优选为5℃-40℃，更优选为10℃-35℃，进一步优选为10℃、25℃或30℃；G.步骤(2)中，2,4-二硝基苯肼溶液(以2,4-二硝基苯肼计)或者2,4-二硝基苯肼的添加量为0.2-5mg/(mL初提液)，优选为1-3mg/(mL初提液)，更优选为2mg/(mL初提液)；H.步骤(2)中，强酸溶液的用量为300-700μL/(mL初提液)，优选为400-600μL/(mL初提液)，更优选为500μL/(mL初提液)；I.步骤(2)中，2,4-二硝基苯肼溶液为2,4-二硝基苯肼的乙腈溶液；优选地，2,4-二硝基苯肼的乙腈溶液中2,4-二硝基苯肼的浓度为1-40mg/mL，更优选为5-20mg/mL，进一步优选为10mg/mL；J.步骤(2)中，强酸溶液为强酸的乙腈溶液；优选地，强酸的乙腈溶液中强酸的浓度为0.05％-2％(W/W)，更优选为0.1％-1％(W/W)，进一步优选为0.2％(W/W)；K.步骤(2)中，强酸溶液选自高氯酸溶液和氢氟酸溶液中的一种或多种；L.步骤(2)中，衍生化的时间为20-60分钟，优选为30-50分钟，更优选为40分钟；M.步骤(2)中，衍生化的温度为常温，优选为10℃-35℃；N.步骤(2)中，羰基化合物衍生化产物选自甲醛-2,4-二硝基苯腙、乙醛-2,4-二硝基苯腙、丙酮-2,4-二硝基苯腙、丙醛-2,4-二硝基苯腙、丙烯醛-2,4-二硝基苯腙、丁醛-2,4-二硝基苯腙、2-丁酮-2,4-二硝基苯腙和巴豆醛-2,4-二硝基苯腙中的一种或多种；O.步骤(1)中，浸提之前，还包括将烟草样品或烟草制品样品进行破碎的步骤。本专利技术第一方面任一项所述的烟草或烟草制品的前处理方法即为从烟草或烟草制品中分离羰基化合物的方法。本专利技术第二方面涉及一种检测烟草或烟草制品中羰基化合物的方法，包括按照本专利技术第一方面任一项所述的前处理方法获得提取液Ⅰ或提取液Ⅱ的步骤；还包括用液相色谱串联质谱法测定提取液Ⅰ或提取液Ⅱ中羰基化合物衍生化产物的步骤。本专利技术第二方面的一个实施方式中，还包括在液相色谱串联质谱法测定之前，将提取液Ⅰ或提取液Ⅱ进行过滤的步骤；优选地，采用有机相滤膜进行过滤；优选地，有机相滤膜的孔径为0.2-0.6μm，更优选为0.45μm。本专利技术第二方面的一个实施方式中，所述测定为定量检测，优选为内标法定量检测；更优选地，内标物为d3-甲醛-2,4二硝基苯腙。本专利技术第二方面的一个实施方式中，液相色谱的操作条件包括如下a至d中的任意一项或者多项：a.色谱柱为戴安Acclaim Explosive E2液相色谱柱；优选地，色谱柱的规格为250mm×4.6mm，5μm，b.色谱柱的温度为36℃-50℃，优选为40℃；c.进样量为1-10μL，优选为3-7μL，更优选为5μL；d.流动相由流动相A和流动相B组成，流动相A为乙腈，流动相B为水；优选地，流动相的洗脱程序为：0分钟，60％(V/V)流动相A；26分钟，60％(V/V)流动相A；28分钟，70％(V/V)流动相A；43分钟，70％(V/V)流动相A；45分钟，60％(V/V)流动相A，保持到第50分钟；流速始终为0.6mL/min。本专利技术第二方面的一个实施方式中，质谱的操作条件或参数包括如下1)至30)中的任意一项或者多项：1)离子源为电喷雾电离源；2)扫描方式为负离子扫描；3)检测方式为多反应监测；4)电喷雾电压为3000-6000V，优选为3500-5000V，更优选为4500V；5)离子源温度为400℃-650℃，优选为450℃-550℃，更优选为500℃；6)辅助气Gas1和/或Gas2压力为40-70psi，优选为50-60psi，更优选为50psi或60psi；7)甲醛-2,4-二硝基苯腙的定量离子对为209.0/163.0；8)甲醛-2,4-二硝基苯腙的定性离子对为209.0/151.0；9)甲醛-2,4-二硝基苯腙的碰撞能为-12V；10)乙醛-2,4-二硝基苯腙的定量离子本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种对烟草或烟草制品进行前处理的方法，包括如下步骤:(1)用乙腈浸提烟草样品或烟草制品样品，得到含羰基化合物的初提液；(2)向初提液中加入2,4‑二硝基苯肼和/或2,4‑二硝基苯肼溶液以及强酸溶液进行衍生化，分离得到含羰基化合物衍生化产物的提取液Ⅰ。

【技术特征摘要】
1.一种对烟草或烟草制品进行前处理的方法，包括如下步骤:(1)用乙腈浸提烟草样品或烟草制品样品，得到含羰基化合物的初提液；(2)向初提液中加入2,4-二硝基苯肼和/或2,4-二硝基苯肼溶液以及强酸溶液进行衍生化，分离得到含羰基化合物衍生化产物的提取液Ⅰ。2.根据权利要求1所述的前处理方法，还包括如下步骤，(3)向提取液Ⅰ中加入弱碱或弱碱溶液，混合，得到提取液Ⅱ；优选地，所述弱碱选自吡啶和喹啉中的一种或多种，更优选为吡啶；优选地，所述弱碱溶液选自吡啶的乙腈溶液和喹啉的乙腈溶液中的一种或多种，更优选为吡啶的乙腈溶液；更优选地，吡啶的乙腈溶液(以吡啶计)或者吡啶的添加量为300-700μL/(mL初提液)，进一步优选为400-600μL/(mL初提液)，更加优选为500μL/(mL初提液)。3.根据权利要求1或2所述的前处理方法，其特征在于如下A至O中的任意一项或者多项：A.所述烟草制品选自可燃吸式烟草制品和非燃吸式烟草制品中的一种或多种；优选地，所述烟草制品为可燃吸式烟草制品，更优选为卷烟；B.所述羰基化合物选自甲醛、乙醛、丙酮、丙醛、丙烯醛、丁醛、2-丁酮和巴豆醛中的一种或多种；C.步骤(1)中，所述浸提的料液比为1:(10-50)(g/mL)，优选为1:(10-30)(g/mL)，更优选为1:20(g/mL)；D.步骤(1)中，所述浸提在振荡条件下进行；E.步骤(1)中，浸提时间为10-60分钟，优选为20-50分钟，更优选为20分钟、30分钟或50分钟；F.步骤(1)中，浸提温度为常温，优选为5-40℃，更优选为10-35℃，进一步优选为10℃、25℃或30℃；G.步骤(2)中，2,4-二硝基苯肼溶液(以2,4-二硝基苯肼计)或者2,4-二硝基苯肼的添加量为0.2-5mg/(mL初提液)，优选为1-3mg/(mL初提液)，更优选为2mg/(mL初提液)；H.步骤(2)中，强酸溶液的用量为300-700μL/(mL初提液)，优选为400-600μL/(mL初提液)，更优选为500μL/(mL初提液)；I.步骤(2)中，2,4-二硝基苯肼溶液为2,4-二硝基苯肼的乙腈溶液；优选地，2,4-二硝基苯肼的乙腈溶液中2,4-二硝基苯肼的浓度为1-40mg/mL，更优选为5-20mg/mL，进一步优选为10mg/mL；J.步骤(2)中，强酸溶液为强酸的乙腈溶液；优选地，强酸的乙腈溶液中强酸的浓度为0.05％-2％(W/W)，更优选为0.1％-1％(W/W)，进一步优选为0.2％(W/W)；K.步骤(2)中，强酸溶液选自高氯酸溶液和氢氟酸溶液中的一种或多种；L.步骤(2)中，衍生化的时间为20-60分钟，优选为30-50分钟，更优选为40分钟；M.步骤(2)中，衍生化的温度为常温，优选为10℃-35℃；N.步骤(2)中，羰基化合物衍生化产物选自甲醛-2,4-二硝基苯腙、乙醛-2,4-二硝基苯腙、丙酮-2,4-二硝基苯腙、丙醛-2,4-二硝基苯腙、丙烯醛-2,4-二硝基苯腙、丁醛-2,4-二硝基苯腙、2-丁酮-2,4-二硝基苯腙和巴豆醛-2,4-二硝基苯腙中的一种或多种；O.步骤(1)中，浸提之前，还包括将烟草样品或烟草制品样品进行粉碎的步骤。4.一种检测烟草或烟草制品中羰基化合物的方法，包括按照权利要求1至3中任一项所述的前处理方法获得提取液Ⅰ或提取液Ⅱ的步骤；还包括用液相色谱串联质谱法测定提取液Ⅰ或提取液Ⅱ中羰基化合物衍生化产物的步骤；可选地，还包括在液相色谱串联质谱法测定之前，将提取液Ⅰ或提取液Ⅱ进行过滤的步骤；优选地，采用有机相滤膜进行过滤；优选地，有机相滤膜的孔径为0.2-0.6μm，更优选为0.45μm。5.根据权利要求4所述的检测方法，其中，所述测定为定量检测，优选为内标法定量检测；更优选地，内标物为d3-甲醛-2,4二硝基苯腙。6.根据权利要求4或5所述的检测方法，其中，液相色谱的操作条件包括如下a至d中的任意一项或者多项：a.色谱柱为戴安Acclaim Explo...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓其馨，刘泽春，吴清辉，谢卫，张国强，黄朝章，张建平，张廷贵，许寒春，
申请(专利权)人：福建中烟工业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：福建;35