多联耐药菌免疫活性蛋白及其制备方法和用途技术

本发明专利技术涉及多联耐药菌免疫活性蛋白及其制备方法和用途，其特征在于：以若干种耐药致病菌为原料，经培养扩增、灭菌浓缩、脫毒破壁,提取细菌的细胞壁、细胞膜和莢膜，合成多联耐药菌免疫活性蛋白生物制品；所述耐药致病菌包括铜绿假单胞菌、嗜麦芽假单胞菌中的一种或二种组合，以及肺炎克雷白氏菌、流感嗜血杆菌、鲍氏不动杆菌、金黄色葡萄球菌、脑膜炎双球菌、结核杆菌、大肠艾希氏菌和白色葡萄球菌中的二种以上组合。本发明专利技术用于制成适用于人体粘膜吸收的制剂，主要包括滴鼻液、口服液、片剂、冲剂、注射剂或喷喉雾剂。能够解决细菌耐药呈不断增长趋势、威胁人类和动物的健康的问题，具有良好的免疫效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种多联耐药菌免疫活性蛋白及其制备方法和用途。属于生物制药

技术介绍
众所周知,致病性细菌对人类健康存在极大的危害性。抗生素具有医治效果以致人类寿命倍增。然而随着抗生素使用时间的延长,致病性细菌的耐药性增加，药致病菌快速滋生,使抗生素的抗菌效力减退。目前，世界各地广泛发生的细菌耐药呈不断增长趋势，威胁人类和动物的健康。耐药菌感染后果严重，包括病程迁延、住院时间延长、病死率上升、住院费用增加等。细菌耐药不仅威胁健康，还由于疾病导致生产力下降带来的经济损失(包括人和动物)。耐药控制需要长期投入，包括对发展中国家提供资金和技术支持，开发新的药物、诊断方法、疫苗和其他干预措施，并加强卫生系统管理，以确保更有效地使用抗菌药物。因此,世界卫生组织2015年郑重提出对当前致病菌耐药问题全球行动计划,鼓励研究和投资开发新生物制品。细菌耐药已经成为全球严峻的公共卫生问题，世界卫生组织(WHO)在2011年世界卫生日提出“遏制耐药——今天不采取行动，明天就无药可用”的呼吁，并在2014年公布了全球耐药调查报告，对全球各国和地区耐药情况进行分析，并于12月发布了“控制细菌耐药全球行动计划(草案)(Draft global action plan on antimicrobial resistance)”。
技术实现思路
本专利技术的目的之一，是为了解决细菌耐药呈不断增长趋势、威胁人类和动物的健康的问题，提供一种多联耐药菌免疫活性蛋白。本专利技术的目的之二，是为了提供一种多联耐药菌免疫活性蛋白的制备方法。本专利技术的目的之三，是为了提供一种多联耐药菌免疫活性蛋白的用途。本专利技术的目的之一可以通过以下技术方案实现：多联耐药菌免疫活性蛋白，其特征在于：以若干种耐药致病菌为原料，经培养扩增、灭菌浓缩、脫毒破壁,提取细菌的细胞壁、细胞膜和莢膜，合成多联耐药菌免疫活性蛋白生物制品；所述耐药致病菌包括铜绿假单胞菌、嗜麦芽假单胞菌中的一种或二种组合，以及肺炎克雷白氏菌,、流感嗜血杆菌、鲍氏不动杆菌、金黄色葡萄球菌、脑膜炎双球菌、结核杆菌、大肠艾希氏菌和白色葡萄球菌中的二种以上组合。本专利技术的目的之一还可以通过以下技术方案实现：一种优选方案是，所述多联耐药菌免疫活性蛋白，为具有被消化道粘膜被覆上皮吸收特性的蛋白质。一种优选方案是，由铜绿假单胞菌、肺炎克雷白氏菌、流感嗜血杆菌、鲍氏不动杆菌和金黄色葡萄球菌,共五种耐药细菌为原料，通过培养扩增、灭菌浓缩和脫毒破壁,分别提取细菌的细胞壁、细胞膜和莢膜的活性蛋白，合成五联耐药菌免疫活性蛋白生物制品；或者由铜绿假单胞菌、肺炎克雷白氏菌、流感嗜血杆菌和鲍氏不动杆菌,共四种耐药细菌为原料，通过培养扩增、灭菌浓缩和脫毒破壁,分别提取细菌的细胞壁、细胞膜和莢膜的活性蛋白，合成四联耐药菌免疫活性蛋白生物制品；或者由铜绿假单胞菌、肺炎克雷白氏菌和流感嗜血杆菌,共三种耐药细菌为原料，通过培养扩增、灭菌浓缩和脫毒破壁,分别提取细菌的细胞壁、细胞膜和莢膜的活性蛋白，合成三联耐药菌免疫活性蛋白生物制品。一种优选方案是，由嗜麦芽假单胞菌、肺炎克雷白氏菌、流感嗜血杆菌、鲍氏不动杆菌和金黄色葡萄球菌,共五种耐药细菌为原料，通过培养扩增、灭菌浓缩和脫毒破壁,分别提取细菌的细胞壁、细胞膜和莢膜的活性蛋白，合成五联耐药菌免疫活性蛋白生物制品；或者由嗜麦芽假单胞菌、肺炎克雷白氏菌、流感嗜血杆菌和鲍氏不动杆菌,共四种耐药细菌为原料，通过培养扩增、灭菌浓缩和脫毒破壁,分别提取细菌的细胞壁、细胞膜和莢膜的活性蛋白，合成四联耐药菌免疫活性蛋白生物制品；或者由嗜麦芽假单胞菌、肺炎克雷白氏菌和流感嗜血杆菌,共三种耐药细菌为原料，通过培养扩增、灭菌浓缩和脫毒破壁,分别提取细菌的细胞壁、细胞膜和莢膜的活性蛋白，合成三联耐药菌免疫活性蛋白生物制品。一种优选方案是，由铜绿假单胞菌、嗜麦芽假单胞菌、肺炎克雷白氏菌、流感嗜血杆菌、鲍氏不动杆菌和金黄色葡萄球菌,共六种耐药细菌为原料,通过培养扩增、灭菌浓缩和脫毒破壁,分别提取细菌的细胞壁、细胞膜和莢膜的活性蛋白，合成六联耐药菌免疫活性蛋白生物制品。一种优选方案是，由铜绿假单胞菌、嗜麦芽假单胞菌、肺炎克雷白氏菌、流感嗜血杆菌、鲍氏不动杆菌、金黄色葡萄球菌、脑膜炎双球菌、结核杆菌、大肠艾希氏菌和白色葡萄球菌，共十种耐药细菌为原料,通过培养扩增、灭菌浓缩和脫毒破壁,分别提取细菌的细胞壁、细胞膜和莢膜的活性蛋白，合成十联耐药菌免疫活性蛋白生物制品。一种优选方案是，由铜绿假单胞菌、嗜麦芽假单胞菌、肺炎克雷白氏菌、流感嗜血杆菌、鲍氏不动杆菌、金黄色葡萄球菌、脑膜炎双球菌、结核杆菌和大肠艾希氏菌，共九种耐药细菌为原料,通过培养扩增、灭菌浓缩和脫毒破壁,分别提取细菌的细胞壁、细胞膜和莢膜的活性蛋白，合成九联耐药菌免疫活性蛋白生物制品。一种优选方案是，由铜绿假单胞菌、嗜麦芽假单胞菌、肺炎克雷白氏菌、流感嗜血杆菌、鲍氏不动杆菌、金黄色葡萄球菌、脑膜炎双球菌和结核杆菌，共八种耐药细菌为原料,通过培养扩增、灭菌浓缩和脫毒破壁,分别提取细菌的细胞壁、细胞膜和莢膜的活性蛋白，合成八联耐药菌免疫活性蛋白生物制品。一种优选方案是，由铜绿假单胞菌、嗜麦芽假单胞菌、肺炎克雷白氏菌、流感嗜血杆菌、鲍氏不动杆菌、金黄色葡萄球菌和脑膜炎双球菌，共七种耐药细菌为原料,通过培养扩增、灭菌浓缩和脫毒破壁,分别提取细菌的细胞壁、细胞膜和莢膜的活性蛋白，
合成七联耐药菌免疫活性蛋白生物制品。本专利技术的目的之二，可以通过采取如下技术方案达到：多联耐药菌免疫活性蛋白的制备方法，其特征在于包括如下步骤：1)组成混合菌液备好铜绿假单胞菌、嗜麦芽假单胞菌，以及肺炎克雷白氏菌、流感嗜血杆菌、鲍氏不动杆菌、金黄色葡萄球菌、脑膜炎双球菌、结核杆菌、大肠艾希氏菌和白色葡萄球菌；用所述铜绿假单胞菌、嗜麦芽假单胞菌中的一种或二种组合，与肺炎克雷白氏菌、流感嗜血杆菌、鲍氏不动杆菌、金黄色葡萄球菌、脑膜炎双球菌、结核杆菌、大肠艾希氏菌和白色葡萄球菌中的二种或以上组合，组成混合菌液；2)耐药菌种扩增取含1级菌种的混合菌液5ml、含2级菌种的混合菌液100ml、含3级菌种的混合菌液2000ml，含1级菌种的混合菌液用试管扩增,含2级菌种的混合菌液用小瓶扩增,含3级菌种的混合菌液用三角烧瓶扩增或直接种入发酵罐扩增；3)采用基础培养基对耐药菌种培养采用蛋白胨、牛肉浸膏、氯化钠、酵母浸膏和葡萄糖中的一种或二种以上组合为基础培养基，对铜绿假单胞菌、嗜麦芽假单胞菌、肺炎克雷白氏菌、鲍氏不动杆菌、金黄色葡萄球菌和感冒嗜血杆菌进行培养,采用前述基础培养基加乳糖构成乳糖培养基对金黄色葡萄球菌进行培养，所述基础培养基和乳糖培养基的Ph值为7.4-7.6；其他细菌培养基按营养需要配备培养基；4)制备多联耐药菌免疫活性蛋白4-1)将耐药菌种放入液体基础培养基或乳糖培养基中，在37℃的温度条件下培养24-48小时后，收集菌液，经甲醛灭菌后进行离心分离、沉淀；然后弃上清、取沉淀物，将所述沉淀物在贮存罐中贮存，贮存温度为4-8℃；4-2)向贮存罐内重新投入基础培养基、进行二次发酵培养，经高温物理灭菌→接种新菌种→增菌培养→甲醛灭菌程序后，髙速连续离心取沉淀，弃上清、取沉淀物，沉淀物经破壁分离，提本文档来自技高网...

【技术保护点】
多联耐药菌免疫活性蛋白，其特征在于：以若干种耐药致病菌为原料，经培养扩增、灭菌浓缩、脫毒破壁,提取细菌的细胞壁、细胞膜和莢膜，合成多联耐药菌免疫活性蛋白生物制品；所述耐药致病菌包括铜绿假单胞菌、嗜麦芽假单胞菌中的一种或二种组合，以及肺炎克雷白氏菌,、流感嗜血杆菌、鲍氏不动杆菌、金黄色葡萄球菌、脑膜炎双球菌、结核杆菌、大肠艾希氏菌和白色葡萄球菌中的二种以上组合。

【技术特征摘要】
1.多联耐药菌免疫活性蛋白，其特征在于：以若干种耐药致病菌为原料，经培养扩增、灭菌浓缩、脫毒破壁,提取细菌的细胞壁、细胞膜和莢膜，合成多联耐药菌免疫活性蛋白生物制品；所述耐药致病菌包括铜绿假单胞菌、嗜麦芽假单胞菌中的一种或二种组合，以及肺炎克雷白氏菌,、流感嗜血杆菌、鲍氏不动杆菌、金黄色葡萄球菌、脑膜炎双球菌、结核杆菌、大肠艾希氏菌和白色葡萄球菌中的二种以上组合。2.根据权利要求1所述的多联耐药菌免疫活性蛋白，其特征在于：所述多联耐药菌免疫活性蛋白，为具有被消化道粘膜被覆上皮吸收特性的蛋白质。3.根据权利要求1或2所述的多联耐药菌免疫活性蛋白，其特征在于：由铜绿假单胞菌、肺炎克雷白氏菌、流感嗜血杆菌、鲍氏不动杆菌和金黄色葡萄球菌,共五种耐药细菌为原料，通过培养扩增、灭菌浓缩和脫毒破壁,分别提取细菌的细胞壁、细胞膜和莢膜的活性蛋白，合成五联耐药菌免疫活性蛋白生物制品；或者由铜绿假单胞菌、肺炎克雷白氏菌、流感嗜血杆菌和鲍氏不动杆菌,共四种耐药细菌为原料，通过培养扩增、灭菌浓缩和脫毒破壁,分别提取细菌的细胞壁、细胞膜和莢膜的活性蛋白，合成四联耐药菌免疫活性蛋白生物制品；或者由铜绿假单胞菌、肺炎克雷白氏菌和流感嗜血杆菌,共三种耐药细菌为原料，通过培养扩增、灭菌浓缩和脫毒破壁,分别提取细菌的细胞壁、细胞膜和莢膜的活性蛋白，合成三联耐药菌免疫活性蛋白生物制品。4.根据权利要求1或2所述的多联耐药菌免疫活性蛋白，其特征在于：由嗜麦芽假单胞菌、肺炎克雷白氏菌、流感嗜血杆菌、鲍氏不动杆菌和金黄色葡萄球菌,共五种耐药细菌为原料，通过培养扩增、灭菌浓缩和脫毒破壁,分别提取细菌的细胞壁、细胞膜和莢膜的活性蛋白，合成五联耐药菌免疫活性蛋白生物制品；或者由嗜麦芽假单胞菌、肺炎克雷白氏菌、流感嗜血杆菌和鲍氏不动杆菌,共四种耐药细菌为原料，通过培养扩增、灭菌浓缩和脫毒破壁,分别提取细菌的细胞壁、细胞膜和莢膜的活性蛋白，合成四联耐药菌免疫活性蛋白生物制品；或者由嗜麦芽假单胞菌、肺炎克雷白氏菌和流感嗜血杆菌,共三种耐药细菌为原料，通过培养扩增、灭菌浓缩和脫毒破壁,分别提取细菌的细胞壁、细胞膜和莢膜的活性蛋白，合成三联耐药菌免疫活性蛋白生物制品。5.根据权利要求1或2所述的多联耐药菌免疫活性蛋白，其特征在于：由铜绿假单胞菌、嗜麦芽假单胞菌、肺炎克雷白氏菌、流感嗜血杆菌、鲍氏不动杆菌和金黄色葡萄球菌,共六种耐药细菌为原料,通过培养扩增、灭菌浓缩和脫毒破壁,分别提取细菌的细胞壁、细胞膜和莢膜的活性蛋白，合成六联耐药菌免疫活性蛋白生物制品。6.根据权利要求1或2所述的多联耐药菌免疫活性蛋白，其特征在于：由铜绿假单胞菌、嗜麦芽假单胞菌、肺炎克雷白氏菌、流感嗜血杆菌、鲍氏不动杆菌、金黄色葡萄球菌、脑膜炎双球菌、结核杆菌、大肠艾希氏菌和白色葡萄球菌，共十种耐药细菌为原料,通过培养扩增、灭菌浓缩和脫毒破壁,分别提取细菌的细胞壁、细胞膜和莢膜的活性蛋白，合成十联耐药菌免疫活性蛋白生物制品；或者由铜绿假单胞菌、嗜麦芽假单胞菌、肺炎克雷白氏菌、流感嗜血杆菌、鲍氏不动杆菌、金黄色葡萄球菌、脑膜炎双球菌、结核杆菌和大肠艾希氏菌，共九种耐药细菌为原料,通过培养扩增、灭菌浓缩和脫毒破...

【专利技术属性】
技术研发人员：余国华，余永宁，
申请(专利权)人：余国华，余永宁，
类型：发明
国别省市：广东;44