特异性结合坏死细胞的突破性平台技术制造技术

本发明专利技术涉及一种包括结合坏死细胞的靶向分子的系统；该系统作为药物的用途；该系统在诊断上的应用；在治疗涉及坏死性细胞死亡的疾病中应用的系统，包含该系统的剂量；使用所述系统确定样品内所述组合物的定位的方法；和，使用所述系统用于治疗涉及坏死性细胞死亡的癌症和/或疾病的方法。特别是，本发明专利技术涉及靶向坏死细胞的组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种包含用于结合坏死细胞的靶向分子的系统；该系统作为药物的用途；该系统在诊断上的应用；在治疗涉及坏死性细胞死亡的疾病中应用的该系统，包含该系统的剂量；使用所述系统确定样品内所述组合物的定位的方法；和，使用所述系统用于治疗涉及坏死性细胞死亡的癌症和/或疾病的方法。特别是，本专利技术涉及靶向坏死细胞的组合物。专利技术背景现有技术中涉及靶向坏死细胞的系统和方法不是最佳的和/或适用的：a.坏死性对比凋亡性细胞死亡坏死的靶向是特异的和独特的，因为坏死只出现在细胞死亡的病理情况下，所述病理情况归因于不充足的血液供应并因此氧气缺乏、创伤或者归因于直接的细胞毒性剂或其它如放射性治疗或光动力疗法的癌症治疗。凋亡性细胞死亡与之相反，其在组织更新过程中连续发生。因此相比于坏死性细胞死亡，凋亡性细胞死亡是不适用于靶向特征为坏死的疾病，所述坏死是例如在肿瘤(快速生长的肿瘤自发性进展坏死核)、创伤、梗塞、骨关节炎、糖尿病、动脉粥样硬化斑块、烧伤、某些细菌感染等的情况下发现的。b.抗体对比小分子我们的化合物是小分子、青色素基染料(cyanine based dyes)，其深深的渗入到坏死组织中。抗体已经被用于靶向坏死(肿瘤坏死靶向)，但是具有抗体太大而不能渗入到坏死组织中的缺点。c.其它化学试剂对比青色素染料还有其它化学试剂(例如PDT-试剂)，其已知用于标记坏死细胞(例如金丝桃素，细菌叶绿素衍生物，Gadophrin-2A和bis-DTPA-NI)。这些试剂具有特殊的性质，这使得它们不太适用于上述疾病的成像和治疗，这些试剂是(1.)难以化学制备，这些试剂是(2.)光敏性的(在暴露在光的情况下，该化合物将产生氧自由基并改变它们的性质)，(3.)从体内清除需要更长的时间(长达数天)和(4.)这类化合物相对比较大，这使得它们更难以渗入到坏死组织中。青色素染料是易于化学制造的，是光稳定性的，是快速从体内清除的(3至24小时)以及深深地和容易地渗入到坏死组织中。在
技术介绍
中更多的细节可以从以前提交的申请PCT/NL2013/050067和PCT/NL2013/050064中获得。下列文件可以被考虑：Madhuri Dasari等人，Organic Letters，2010，12(15)，3300-3303，叙述了通过结合胞外DNA而在体内检测坏死组织的成像剂。本专利技术不涉及DNA的结合。DNA结合分子通常被认为是不适合用于人类，因为这种分子是致突变/致癌高几率的。Bryan A Smith等人，URL：http://etd.nd.edu/ETD-db/theses/available/etd-04132012-141111/unrestricted/SmithBryan042012D.pdf，叙述了在体内细胞死亡的成像，使用荧光合成配位复合物。在一个方面，该文件叙述了与青色素染料偶联的一些凋亡性靶向分子。在这些复合物中的青色素被仅用作荧光报告剂(fluorescent reporter)。Epstein A L等人，Cancer Research，1988，48(20)，5842-5848涉及一种用于检测在人类癌症中坏死病灶的方法。其依赖于使用与作为报告剂的染料偶联的作为靶向部分的抗体。就不利影响的方面而言，抗体的生产、储存和使用是非常困难，昂贵和高风险的。Vera D等人，核医学和生物学(Nuclear Medicine and Biology)，2005年，32，687-693，涉及一种用于在体内测量受体生物化学的荧光探针。Uzgiris E E等人，癌症研究和治疗技术(Technology in Cancer Research and Treatment)，2006，5(4)，301-309，涉及一种用于术前MR成像和术中肿瘤边缘界定的多模式造影剂。Lia T等人，生物有机化学和药物化学杂志(Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters)，2010年，20，7124-7126，涉及一种用于前列腺癌的低分子量的近红外探针。Vera D等人，Uzgiris E E等人和Lia T等人都叙述了使用青色素作为偶联各种靶向部分的报告分子。US 2012/088262 A1涉及青色素化合物，缀合物和它们的使用方法。具体而言，所述文件叙述了胺反应性的青色素。应当注意的是，所有的蛋白质包含胺。胺反应性分子将结合在亲和性上不具有很大差异的任意蛋白质。在生物样品中，如血液和组织，存在着大量的胞外蛋白。因此不能实现对样品中例如死细胞的选择性。在体内，强共价结合到蛋白质将仅导致从体内非常缓慢的清除，这增加了不利影响的几率。Fang F等人，光谱化学学报.A部：分子和生物分子光谱学(Spectrochimica Acta.Part A：molecular and biomolecular spectrosocopy)，2006年，64(3)，698-702，涉及使用光散射技术用近红外青色素染料测定核酸。青色素对于DNA和RNA的亲和性是相同的。如先前所确定的，DNA结合剂在人类中的应用受限。Hong Zheng等人，分析生物化学(Analytical Biochemistry)，2003年，318，86-90，涉及一种使用长波吸收青色素探针的染料结合测定法并且描述了染料SHMC与各种蛋白质的相互作用。只有分析性应用是相同的。Volkova K D等人，生物化学和生物物理化学杂志(Journal of Biochemical and Biophysical Chemisty)，2007年，70，727-733涉及用于淀粉样蛋白结构的荧光探针，和特别是能够结合淀粉样蛋白-β肽聚集体的青色素。结合起因于染料与淀粉样蛋白-β聚集体(而不是个别淀粉样蛋白-β肽)特征之间的相互作用。淀粉样蛋白-β聚集体是在细胞外的。US 2005/014216涉及使用能够结合胞内蛋白的若丹明类(rhodamines)和鬼笔环肽(phalloidin)作为用于肝毒性的探针。Haibiao Gong等人，PLoS One，2012，7(3)，e34003，XP055093071，涉及用SNAP-Tag的哺乳动物细胞和异种移植肿瘤的近红外荧光成像。该文件仅描述了(在通过SNAP-Tag的情况下)点击化学(click chemistry)的应用。本专利技术的一个目的是克服现有技术中组合物的一个或多个缺点，并且提供替代当前组合物而用于诊断和治疗涉及坏死性细胞死亡的癌症和其它疾病，并且不损害功能和优点。专利技术简介本专利技术涉及根据权利要求1所述的一种包括结合坏死细胞的靶向分子，和一种或多种试剂，载体和在体内的非反应性分子的系统。本系统包括至少两个实体，所述实体例如通过化学键而连接，每个实体在系统中起到不同功能。应当注意的是，可以存在一个以上的试剂，和一个以上的载体，和一个以上的非反应性分子。因此例如组合疗法对本专利技术的系统是可行的。本专利技术的靶向分子是非常有选择性的和非常特异的结合坏死细胞。作为结果，本系统非常低浓度c.q.数量可以被用于提供其有益效果。应当注意的是，相比于坏死特异性探针，细胞凋亡的特异性探针也将靶本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种包括结合坏死细胞的靶向分子的系统，该靶向分子是细胞膜非通透的、未活化的、能够非共价地结合到细胞内蛋白质并且不显著结合DNA的青色素，其中该系统还包括一种或多种：(a)选自成像化合物、治疗性化合物、和释放因子的试剂；(b)有效用于传递试剂的载体；和(c)在体内能够与配对物相互作用的非反应性分子。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.02.06 NL PCT/NL2013/50064;2013.02.06 NL PCT/N1.一种包括结合坏死细胞的靶向分子的系统，该靶向分子是细胞膜非通透的、未活化的、能够非共价地结合到细胞内蛋白质并且不显著结合DNA的青色素，其中该系统还包括一种或多种：(a)选自成像化合物、治疗性化合物、和释放因子的试剂；(b)有效用于传递试剂的载体；和(c)在体内能够与配对物相互作用的非反应性分子。2.根据权利要求1的系统，其中所述靶向分子是根据图1中I、II和III的非反应性青色素染料，其中n是整数，如n∈[2，10]，优选n∈[4，8]，链L具有不超过n-1个双键，优选n/2个双键，其中亚族II和III可以分别包括由曲线C表示的一个和两个芳香环体系(A、B)，其中A、B优选各自独立的选自苯和萘，其中可以存在其它基团R5、R6、R7和R8、R5、R6、R7和R8是优选各自独立选自H和烷基，如甲基、乙基、和丙基，优选甲基，其中芳香环体系可以包括另外的官能团R1、R2和/或取代基，R1、R2是优选各自独立选自H、磺酸基、和磺酰胺，其中交替单键和双键的链L可以被一个或多个部分的和完全的饱和的环结构中断，如环戊烯和环己烯以及它们的组合，如一个或更多个环己烯环，其中所述饱和环结构还可以包括官能团R9，其选自H、AA和BB，其中R10选自H、SO3H、Cl、-N-C＝O-(CH2)q-Y3(q＝1-6)，-(CH2)r-Y4(r＝1-6)，Y3和Y4各自独立的是H、COOH、SO3H和CN，其中氮原子(N)还可以包括功能性N侧基基团R3、R4，其中R3、R4优选各自独立的选自-(CH2)mY，其中Y各自独立地选自具有1-4个碳原子的羧酸，磺酸酯基、CN、C≡C、和C＝C，以及它们的盐，其中，所述N侧基基团包含m个碳原子，如m∈[1，10]，优选m∈[2，8]，更优选m∈[3，7]，最优选m＝4、5、和6，甚至更优选至少一个m＝4、5、和6；优选一个m＝6，而另一个m优选是4、5或6，其中所述N侧基基团包含一个或多个在末端上与N相对的官能团，如具有1-4个碳原子的羧酸，磺酸基，和它们的盐，如钠盐和钾盐，最优选在末端上的官能团包括一个或多个双C-C键，优选是其羧酸盐，和/或其中所述靶向分子是中性的或带负电荷的。3.根据权利要求1和/或2的系统，其中所述靶向分子选自：HQ4、HQ5、HQ6、HQ7、ICG、CW 800、ZW800、L4、L7、L11、CY3、CY3b、CY3.5、CY5、CY5.5、CY7、Dy 676、Dy ...

【专利技术属性】
技术研发人员：M·马灵，C·W·G·M·洛维克，E·R·范比克，X·邦文，
申请(专利权)人：HQ医药荷兰有限责任公司，
类型：发明
国别省市：荷兰;NL