一种快速分离脐带间充质干细胞的试剂盒制造技术

本实用新型专利技术公开了一种快速分离脐带间充质干细胞的试剂盒，包括盒体和多个放置区，放置区分为器械耗材放置区、洗涤液放置区、消化酶放置区域、培养基放置区。所述器械耗材放置区中放有一次性无菌剪刀、一次性无菌250mL塑料杯、一次性无菌100um细胞滤网、一次性无菌塑料镊子。所述洗涤液放置区放置两个250mL用于装洗涤液的试剂瓶。所述消化酶放置区放置一个30mL用于装消化酶的试剂瓶。所述培养基放置区放置一个250mL用于装原代细胞培养基的试剂瓶。本实用新型专利技术供一次性器械和试剂，保证无菌无热源，彻底解决使用者洗刷器械后的内毒素残留问题，大大缩短分离前期试剂配制和准备工作所耗时间，并且预防标本污染。

【技术实现步骤摘要】

本技术提供了一种快速分离脐带间充质干细胞的试剂盒及其使用方法。
技术介绍
间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)是干细胞家族的重要成员，来源于发育早期的中胚层和外胚层，属于多能干细胞，MSC最初在骨髓中发现，因其具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入、免疫调控和自我复制等特点而日益受到人们的关注。间充质干细胞在体内或体外特定的诱导条件下，可分化为脂肪、骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、心肌、内皮等多种组织细胞，连续传代培养和冷冻保存后仍具有多向分化潜能，可作为理想的种子细胞用于衰老和病变引起的组织器官损伤修复。移植物抗宿主病、克隆氏病的治疗在美国已经进入到三期临床阶段。我国已开始用间充质干细胞治疗临床上一些难治性疾病，如脊髓损伤、脑瘫、肌萎缩侧索硬化症、系统性红斑狼疮、系统性硬化症、克隆氏病、中风、糖尿病、糖尿病足、肝硬化等，根据初步的临床报告，间充质干细胞对这些疾病的治疗都取得明显的疗效。研究表明，脐带来源的间充质干细胞不但能够成为骨髓间充质干细胞的理想替代物，而且具有更大的应用潜能。脐带间充质干细胞表达多种胚胎干细胞的特有分子标志，具有分化潜力大、增殖能力强、免疫原性低、取材方便、无道德伦理问题的限制、易于工业化制备等特征，因此有可能成为最具临床应用前景的多能干细胞。传统的脐带间充质干细胞分离方法虽然比较成熟，但是分离过程所用试剂需要前期配制和准备工作而且过程比较繁琐，分离耗时较长且原代生长缓慢，标本易污染。目前已有的试剂盒只是提供试剂，而不提供所需要的无菌器械，使用者还需要对多种器械进行洗刷和灭菌，以达到无菌无热源的要求，耗时费力且器械容易残留内毒素。
技术实现思路
本技术所要解决的技术问题是，提供了一种大大缩短分离前期试剂配制和准备工作所耗时间的快速分离脐带间充质干细胞的试剂盒。为了解决上述技术问题，本技术采用的技术方案是：一种快速分离脐带间充质干细胞的试剂盒，包括盒体和设置在盒体内部的多个放置区，放置区分为器械耗材放置区、洗涤液放置区、消化酶放置区域、培养基放置区。所述器械耗材放置区中放有一次性无菌剪刀1把、一次性无菌250mL塑料杯4只、一次性无菌100um细胞滤网1个、一次性无菌塑料镊子2把。所述器械耗材放置区分为器械放置区和耗材放置区，器械放置区放有一次性无菌剪刀1把、一次性无菌塑料镊子2把；耗材放置区中放有一次性无菌250mL塑料杯4只、一次性无菌100um细胞滤网1个。所述洗涤液放置区放置两个250mL用于装洗涤液的试剂瓶。所述洗涤液放置区分为两个独立的第一洗涤液放置区和第二洗涤液放置区，两个250mL用于装洗涤液的试剂瓶分别放在第一洗涤液放置区和第二洗涤液放置区中。所述消化酶放置区放置一个30mL用于装消化酶的试剂瓶。所述培养基放置区放置一个250mL用于装原代细胞培养基的试剂瓶。本技术的有益效果是：彻底解决使用者洗刷器械后的内毒素残留问题，提供洗涤液、消化酶和培养基，提高脐带分离速度，并且大大缩短分离
前期试剂配制和准备工作所耗时间，并且预防标本污染。附图说明图1是本技术实施例1的快速分离脐带间充质干细胞的试剂盒的结构示意图。图2是本技术实施例2的快速分离脐带间充质干细胞的试剂盒的结构示意图。图3是本技术实施例3的快速分离脐带间充质干细胞的试剂盒的结构示意图。具体实施方式下面结合附图和具体实施方式对本技术作进一步详细说明：如图1-3所示，本技术的快速分离脐带间充质干细胞的试剂盒，包括盒体和设置在盒体内部的4个放置区，放置区分为器械耗材放置区1、洗涤液放置区2、消化酶放置区域3、培养基放置区4。所述器械耗材放置区1中放有一次性无菌剪刀1把、一次性无菌250mL塑料杯4只、一次性无菌100um细胞滤网1个、一次性无菌塑料镊子2把。优选，所述器械耗材放置区1分为器械放置区1A和耗材放置区1B，器械放置区1A放有一次性无菌剪刀1把、一次性无菌塑料镊子2把；耗材放置区1B中放有一次性无菌250mL塑料杯4只、一次性无菌100um细胞滤网1个。所述洗涤液放置区2放置两个250mL用于装洗涤液的试剂瓶。优选，所述洗涤液放置区2分为两个独立的第一洗涤液放置区2A和第二洗涤液放置区2B，两个250mL用于装洗涤液的试剂瓶分别放在第一洗涤液放置区2A和第二洗涤液放置区2B中。所述消化酶放置区3放置一个30mL用于装消化酶的试剂瓶。所述培养基放置区4放置一个250mL用于装原代细胞培养基的试剂瓶。具体地说，所述洗涤液放置区设有250mL洗涤液2瓶，装有含有200U/mL青霉素、200U/mL链霉素、100mg/mL溶菌酶的PBS溶液。所述消化酶放置区设有30mL消化酶1瓶，为质量/体积百分比浓度为0.5％的IV型胶原酶和1％的II型胶原酶溶液。所述培养基放置区设有250mL原代细胞培养基1瓶，为含有80ng/mL EGF、120ng/mL bFGF和120ug/mL转铁蛋白、10％胎牛血清的DMEM溶液。上述快速分离脐带间充质干细胞的试剂盒使用方法如下：步骤一：分别打开器械耗材放置区域中的3个250ml一次性无菌塑料杯。步骤二：打开洗涤液放置区的洗涤液1瓶，分别加入至三个一次性塑料杯中，大约每个80mL。步骤三：打开器械耗材放置区中的一次性无菌镊子，将脐带放入步骤二中的装有洗涤液的1个塑料杯中洗涤。步骤四：将器械耗材放置区中的一次性无菌平皿取出，用一次性无菌镊子将脐带放入平皿中心，用器械耗材放置区中的一次性无菌剪刀将其剪成1cm一段，排血后将组织放入第2个塑料杯中继续清洗，在第3个塑料杯中重复洗涤。步骤五：再打开器械耗材放置区中的第四个一次性无菌塑料杯，将清洗完毕的脐带组织取5～10g放入杯中，使用一次性无菌剪刀将其剪碎至1mm3。步骤六：将消化酶放置区的消化酶取出，将剪好的组织放入50mL离心杯中，按照每克脐带组织1mL消化酶的比例，加入消化酶后，放入摇床中37℃，140r/min消化20～30min。步骤七：取出器械耗材放置区的一次性细胞筛网，再将洗涤液放置区的第二瓶洗涤液取出，消化后，向离心管中加入40mL洗涤液洗涤后经过一次性细胞筛网过滤，将固体过滤后，将细胞悬液1000r/min，5min离心，重复离心操作一次。步骤八：含有培养基放置区的培养基取出，加入离心后沉淀物中，充分混匀后加入培养瓶中。待24小时后换液。实施例1如图1所示，试剂盒包括盒体、器械耗材放置区1、洗涤液放置区2、消化酶放置区3、培养基放置区4。分别打开器械耗材放置区域中的3个250ml一次性无菌塑料杯。打开洗涤液放置区的洗涤液1瓶，分别加入至三个一次性塑料杯中，大约每个80mL。打开器械耗材放置区中的一次性无菌镊子，将脐带放入装有洗涤液的1个塑料杯中洗涤。将器械耗材放置区中的一次性无菌平皿取出，用一次性无菌镊子将脐带放入平皿中心，用器械耗材放置区中的一次性无菌剪刀将其剪成1cm一段，排血后将组织放入第2个塑料杯中继续清洗，在第3个塑料杯中重复洗涤。再打开器械耗材放置区中的第四个一次性无菌塑料杯，将清洗完毕的脐带组织取5～10g放入杯中，使用一次性无菌剪刀将其剪碎至1mm3。将消化酶放置区的消化酶取出，将剪好本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种快速分离脐带间充质干细胞的试剂盒，包括盒体和设置在盒体内部的多个放置区，其特征在于，放置区分为器械耗材放置区(1)、洗涤液放置区(2)、消化酶放置区域(3)、培养基放置区(4)。

【技术特征摘要】
1.一种快速分离脐带间充质干细胞的试剂盒，包括盒体和设置在盒体内部的多个放置区，其特征在于，放置区分为器械耗材放置区(1)、洗涤液放置区(2)、消化酶放置区域(3)、培养基放置区(4)。2.根据权利要求1所述的快速分离脐带间充质干细胞的试剂盒，其特征在于，所述器械耗材放置区(1)中放有一次性无菌剪刀1把、一次性无菌250mL塑料杯4只、一次性无菌100um细胞滤网1个、一次性无菌塑料镊子2把。3.根据权利要求1所述的快速分离脐带间充质干细胞的试剂盒，其特征在于，所述器械耗材放置区(1)分为器械放置区(1A)和耗材放置区(1B)，器械放置区(1A)放有一次性无菌剪刀1把、一次性无菌塑料镊子2把；耗材放置区(1B)中放有一次性无菌250mL塑料杯4只、一次性无菌100...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘俊江，鲁振宇，韩洪起，张冰晶，秦臻，徐悦，
申请(专利权)人：天津普瑞赛尔生物科技有限公司，
类型：新型
国别省市：天津;12