一种罗汉果外植体生芽培养方法技术

技术编号:13839828 阅读:167 留言:0更新日期:2016-10-16 06:13
本发明专利技术提供的一种罗汉果外植体生芽培养技术,属于组织培养技术,包括制作罗汉果组培苗、外植体扦插在在滤纸。与现有技术相比,本发明专利技术的技术能够快速诱导罗汉果组织块径的形成,同时芽苞长至0.5~1cm,根系初步冒出,该方法可以实现95%的成功率,整个方法简单易操作,并且可实现大批量生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于组织培养
,尤其涉及一种罗汉果外植体生芽培养技术。
技术介绍
罗汉果(学名:Siraitiagrosvenorii)是葫芦科多年生藤本植物。其叶心形,雌雄异株,夏季开花,秋天结果。中医以其果实入药,含有罗汉果甜苷、多种氨基酸和维生素等药用成分,主治肺热痰火咳嗽、咽喉炎、扁桃体炎、急性胃炎、便秘等。因为罗汉果是雌雄异株,又花期不遇,加之花粉粘重且着生于花药不易被昆虫触及的地方,所以很难像普通的风媒花或虫媒花那样传粉,因此自然条件下,结果的机率极低(目前人工栽培仍然必须人工授粉)。同时,罗汉果种子实生苗有70%左右为雄株,且要等到2~3年之后,开花时才能判定,生产上基本无实用价值。但是,罗汉果的习性是,到了秋季分枝藤蔓会向下垂,并迅速伸长,一经着地就会膨大变作指头大小的块茎(俗称“薯块”、“薯仔”),可以顽强地越冬,来年萌发成为独立的新植株。这是罗汉果自然繁殖的重要方式。在人工栽培之后,演化成了人工压蔓,小“块茎”依然是罗汉果最重要的种源。然而,这些传统块茎容易传播病毒及其它病虫害,又难以大批量生产,无法满足现代规模化种植的需求。
技术实现思路
为解决上述技术问题,本专利技术提供了一种罗汉果外植体生芽培养技术。本专利技术通过以下技术方案得以实现。本专利技术提供的一种罗汉果外植体生芽培养技术,包括以下步骤:1)使用常规方法制作罗汉果组培苗,并取中间健壮部分,分切成带腋芽单节茎段,并进行灭菌处理,得到外植体;2)将外植体扦插在在滤纸上,滤纸延伸到培养基溶液中;所述的滤纸到培养基的溶液的高度不超过4cm;先黑暗培养3d,然后在光照长度1000~1200Lx。光照时间10~12h/d,培养温度为23~25℃;所述的培养基溶液包含:MS+BA0.5~0.7mg/L、IAA0.1~0.2mg/L、蔗糖30g/L、硝酸铵1~4g/L、芒果泥5~10g/L。进一步的,所述的培养基溶液包含:MS+BA0.6mg/L、IAA0.2mg/L、蔗糖30g/L、硝酸铵3g/L、芒果泥8g/L。进一步的,在将外植体扦插在在滤纸前,对滤纸喷洒以下溶液:MS+BA0.5~0.7mg/L、IAA0.1~0.2mg/L、蔗糖30g/L、香蕉泥40~50g/L,硝酸铵1~4g/L、芒果泥5~10g/L、灰炭0.5~1g/L。进一步的,所述的滤纸厚度不小于1cm。本专利技术的有益效果在于:与现有技术相比,本专利技术的技术能够快速诱导罗汉果组织块径的形成,同时芽苞长至0.5~1cm,根系初步冒出,该方法可以实现95%的成功率,整个方法简单易操作,并且可实现大批量生产。具体实施方式下面进一步描述本专利技术的技术方案,但要求保护的范围并不局限于所述。实施例一本专利技术提供的一种罗汉果外植体生芽培养技术,包括以下步骤:1)使用常规方法制作罗汉果组培苗,并取中间健壮部分,分切成带腋芽单节茎段,并进行灭菌处理,得到外植体;2)准备滤纸,厚度不低于1cm,然后在滤纸上喷洒以下溶液:MS+BA0.5mg/L、IAA0.1mg/L、蔗糖30g/L、香蕉泥40g/L,硝酸铵1g/L、芒果泥5g/L、灰炭0.5g/L。3)将外植体扦插在在滤纸上,滤纸延伸到培养基溶液中;所述的滤纸到培养基的溶液的高度不超过4cm;先黑暗培养3d,然后在光照长度1000Lx。光照时间10h/d,培养温度为23℃;所述的培养基溶液包含:MS+BA0.5mg/L、IAA0.1mg/L、蔗糖30g/L、硝酸铵1g/L、芒果泥5g/L。上述中,灭菌处理处理的具体步骤为:1)使用常规方法制作罗汉果组培苗,并取中间健壮部分,分切成带腋芽单节茎段;2)用浓度为3%的肥皂水浸泡5min,捞起后使用无菌水冲洗一次;3)再用浓度为0.05%的柠檬酸溶液浸泡5min,捞起后使用无菌水冲洗一次;4)再用浓度50~60%的酒精溶液浸泡15s,捞起后使用无菌水冲洗一次;5)再使用浓度为0.1%的高锰酸钾溶液浸泡3min,捞起后使用无菌水冲洗一次,得到灭菌的罗汉果外植体。6)得到的灭菌的罗汉果外植体用滤纸包裹,并对滤纸喷洒MS+BA0.6mg/L+IAA0.2mg/L+蔗糖30g/L的溶液喷洒,使得滤纸足够湿润。实施例二本专利技术提供的一种罗汉果外植体生芽培养技术,包括以下步骤:1)使用常规方法制作罗汉果组培苗,并取中间健壮部分,分切成带腋芽单节茎段,并进行灭菌处理,得到外植体;2)准备滤纸,厚度不低于1cm,然后在滤纸上喷洒以下溶液:MS+BA0.7mg/L、IAA0.2mg/L、蔗糖30g/L、香蕉泥40~50g/L,硝酸铵4g/L、芒果泥10g/L、灰炭1g/L。3)将外植体扦插在在滤纸上,滤纸延伸到培养基溶液中;所述的滤纸到培养基的溶液的高度不超过4cm;先黑暗培养3d,然后在光照长度1200Lx。光照时间12h/d,培养温度为25℃;所述的培养基溶液包含:MS+BA0.7mg/L、IAA0.2mg/L、蔗糖30g/L、硝酸铵4g/L、芒果泥10g/L。上述中,灭菌处理处理的具体步骤为:1)使用常规方法制作罗汉果组培苗,并取中间健壮部分,分切成带腋芽单节茎段;2)用浓度为3%的肥皂水浸泡5min,捞起后使用无菌水冲洗一次;3)再用浓度为0.05%的柠檬酸溶液浸泡5min,捞起后使用无菌水冲洗一次;4)再用浓度50~60%的酒精溶液浸泡15s,捞起后使用无菌水冲洗一次;5)再使用浓度为0.1%的高锰酸钾溶液浸泡3min,捞起后使用无菌
水冲洗一次,得到灭菌的罗汉果外植体。6)得到的灭菌的罗汉果外植体用滤纸包裹,并对滤纸喷洒MS+BA0.6mg/L+IAA0.2mg/L+蔗糖30g/L的溶液喷洒,使得滤纸足够湿润。实施例三本专利技术提供的一种罗汉果外植体生芽培养技术,包括以下步骤:1)使用常规方法制作罗汉果组培苗,并取中间健壮部分,分切成带腋芽单节茎段,并进行灭菌处理,得到外植体;2)准备滤纸,厚度不低于1cm,然后在滤纸上喷洒以下溶液:MS+BA0.5~0.7mg/L、IAA0.1~0.2mg/L、蔗糖30g/L、香蕉泥40~50g/L,硝酸铵1~4g/L、芒果泥5~10g/L、灰炭0.5~1g/L。3)将外植体扦插在在滤纸上,滤纸延伸到培养基溶液中;所述的滤纸到培养基的溶液的高度不超过4cm;先黑暗培养3d,然后在光照长度1000~1200Lx。光照时间10~12h/d,培养温度为23~25℃;所述的培养基溶液包含:MS+BA0.6mg/L、IAA0.2mg/L、蔗糖30g/L、硝酸铵3g/L、芒果泥8g/L。上述中,灭菌处理处理的具体步骤为:1)使用常规方法制作罗汉果组培苗,并取中间健壮部分,分切成带腋芽单节茎段;2)用浓度为3%的肥皂水浸泡5min,捞起后使用无菌水冲洗一次;3)再用浓度为0.05%的柠檬酸溶液浸泡5min,捞起后使用无菌水冲洗一次;4)再用浓度50~60%的酒精溶液浸泡15s,捞起后使用无菌水冲洗一次;5)再使用浓度为0.1%的高锰酸钾溶液浸泡3min,捞起后使用无菌水冲洗一次,得到灭菌的罗汉果外植体。6)得到的灭菌的罗汉果外植体用滤纸包裹,并对滤纸喷洒MS+本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种罗汉果外植体生芽培养技术,其特征在于包括以下步骤:1)使用常规方法制作罗汉果组培苗,并取中间健壮部分,分切成带腋芽单节茎段,并进行灭菌处理,得到外植体;2)将外植体扦插在在滤纸上,滤纸延伸到培养基溶液中;所述的滤纸到培养基的溶液的高度不超过4cm;先黑暗培养3d,然后在光照长度1000~1200Lx。光照时间10~12h/d,培养温度为23~25℃;所述的培养基溶液包含:MS+BA0.5~0.7mg/L、IAA0.1~0.2mg/L、蔗糖30g/L、硝酸铵1~4g/L、芒果泥5~10g/L。

【技术特征摘要】
1.一种罗汉果外植体生芽培养技术,其特征在于包括以下步骤:1)使用常规方法制作罗汉果组培苗,并取中间健壮部分,分切成带腋芽单节茎段,并进行灭菌处理,得到外植体;2)将外植体扦插在在滤纸上,滤纸延伸到培养基溶液中;所述的滤纸到培养基的溶液的高度不超过4cm;先黑暗培养3d,然后在光照长度1000~1200Lx。光照时间10~12h/d,培养温度为23~25℃;所述的培养基溶液包含:MS+BA0.5~0.7mg/L、IAA0.1~0.2mg/L、蔗糖30g/L、硝酸铵1~4g/L、芒果泥5~10g/L。2.如权利要求1所述的罗...

【专利技术属性】
技术研发人员:张俊连罗小廷张俊蛟邵先强
申请(专利权)人:贵州德江易盛农业科技发展有限公司
类型:发明
国别省市:贵州;52

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