一种β2微球蛋白的提取方法技术

技术编号:13832972 阅读:73 留言:0更新日期:2016-10-14 14:17
一种β2微球蛋白的提取方法,涉及β2微球蛋白提取技术领域,收取透析患者透析废液,向其内加入其质量0.1‑15%的蛋白保护剂,加入蛋白保护剂的透析废液作为提取原液;将提取原液通过高通量透析器将其中含有的大分子物质去除,收取滤出的提取原液待用;将经步骤2滤得的提取原液通过低通量透析器滤出其内含有的水分,直到剩余的液体体积为提取原液体积的0.1‑1%时,得β2微球蛋白浓缩液;将β2微球蛋白浓缩液用蛋白质分离纯化装置处理,去除其他白蛋白,纯化β2微球蛋白浓缩液,制得成品。本发明专利技术工艺简单、操作方便,制取成本低廉。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及β2微球蛋白提取
,详细讲是一种工艺简单、操作方便,制取成本低廉的β2微球蛋白的提取方法
技术介绍
我们知道,β2微球蛋白作为一种中分子物质,是体外评价透析器性能的重要试剂,随着高通量透析器及血液滤过器在国内的普及范围不断扩大,使用频率不断增加,高通量透析器及血滤器的品牌和种类也越来越多。作为评价透析器体外性能的重要试剂β2微球蛋白的需求量也不断增加。但由于来源有限,生产工艺比较复杂等原因,造成β2微球蛋白的价格十分昂贵,高达3600元/mg。根据透析器体外性能评价方法的不同,对β2微球蛋白的消耗量也会有所差异。在透析器体外性能评价中在保证性能符合要求的条件下,评价一支透析器所需要的试剂中仅β2微球蛋白一项就需要花费几万元,大大增加了企业的检测成本。
技术实现思路
本专利技术的目的是解决上述现有技术的不足,提供一种工艺简单、操作方便,制取成本低廉的β2微球蛋白的提取方法。本专利技术解决上述现有技术的不足所采用的技术方案是:一种β2微球蛋白的提取方法,其特征在于包括如下步骤:步骤1:收取透析患者透析废液,向其内加入其质量0.1-15%的蛋白保护剂,加入蛋白保护剂的透析废液作为提取原液;步骤2:将提取原液通过高通量透析器将其中含有的大分子物质去除,收取滤出的提取原液待用;步骤3:将经步骤2滤得的提取原液通过低通量透析器滤出其内含有的水分,直到剩余的液体体积为提取原液体积的0.1-1%时,得β2微球蛋白浓缩液;步骤4:将β2微球蛋白浓缩液用蛋白质分离纯化装置处理,去除其他白蛋白,纯化β2微球蛋白浓缩液,制得成品。本专利技术中所述的蛋白质分离纯化装置为切割分子量为1-6W的超滤分离纯化装置。优选的,本专利技术所述的超滤分离纯化装置的切割分子量为3-5W。进一步的,将步骤4制得的成品进行分装,采用冷冻干燥机进行干燥,得到冻干粉长期保存。本专利技术步骤1中所述的蛋白保护剂为psmf trion100、葡聚糖、肌醇、甘露醇、丙三醇、山梨醇等中的一种或者多种组合。本专利技术步骤1中优选的向收取的透析废液内加入其体积2-5%的蛋白保护剂制成提取原液。本专利技术步骤2中所述的高通量透析器为超滤系数Kuf>20ml/mmHg/h的透析器;优选超滤系数Kuf为35-60ml/mmHg/h的透析器。本专利技术步骤3中所述的低通量透析器为超滤系数Kuf<20ml/mmHg/h的透析器;优选超滤系数Kuf为15-19ml/mmHg/h的透析器。本专利技术使用了高通量透析器、低通量透析器和蛋白质分离纯化装置等现有的成熟产品,对透析患者治疗过程中产生的透析废液进行简单处理,即制得了β2微球蛋白,使用的器具成本低廉,操作简单方便。本专利技术具有原料充足,提取工艺简单、操作方便,制取成本低廉等有益效果。附图说明图1为本专利技术的实施流程图。具体实施方式实施例1收取透析患者透析废液,加入其质量2%的葡聚糖,制得提取原液;将提取原液通过超滤系数Kuf为42ml/mmHg/h的透析器将其中含有的大分子物质去除;然后将滤出的提取原液循环通过超滤系数Kuf为19ml/mmHg/h的透析器,滤出其内含有的大量水分,直到剩余的液体体积为提取原液体积的0.2%时,得β2微球蛋白浓缩液;将β2微球蛋白浓缩液用切割分子量为3W的超滤离心管处理,得纯化β2微球蛋白浓缩液,制得成品。将制得的纯化β2微球蛋白浓缩液进行分装,采用冷冻干燥机进行干燥,得到冻干粉长期保存。经检测,本实施例制得的β2微球蛋白冻干粉的纯度为85.5%。β2微球蛋白的含量如下表所示:样品名称重量β2微球蛋白含量β2微球蛋白冻干粉10mg8.55mg实施例2收取透析患者透析废液,加入其质量5%的甘露醇,制得提取原液;将提取原液通过超滤系数Kuf为55ml/mmHg/h的透析器,除去其中的大分子蛋白;然后将滤出的提取原液循环通过超滤系数Kuf为18ml/mmHg/h的透析器,滤出其内含有的大量水分,直到剩余的液体体积为提取原液体积的0.8%时,得β2微球蛋白浓缩液;将β2微球蛋白浓缩液用切割分子量为5W的超滤杯处理,得纯化β2微球蛋白浓缩液,制得成品。将制得的纯化β2微球蛋白浓缩液进行分装,采用冷冻干燥机进行干燥,得到冻干粉长期保存。经检测,本实施例制得的β2微球蛋白冻干粉的纯度约为77%。β2微球蛋白的含量如下表所示:样品名称重量β2微球蛋白含量β2微球蛋白冻干粉11mg8.5mg本专利技术使用了高通量透析器、低通量透析器和分离纯化装置等现有的成熟产品,对透析患者治疗过程中产生的透析废液进行简单处理,即制得了β2微球蛋白,使用的器具成本低廉,操作简单方便。本专利技术具有原料充足,提取工艺简单、操作方便,制取成本低廉、极大降低了透析器性能评价试剂中β2微球蛋白的成本等有益效果。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种β2微球蛋白的提取方法,其特征在于包括如下步骤:步骤1:收取透析患者透析废液,向其内加入其质量0.1‑15%的蛋白保护剂,加入蛋白保护剂的透析废液作为提取原液;步骤2:将提取原液通过高通量透析器将其中含有的大分子物质去除,收取滤出的提取原液待用;步骤3:将经步骤2滤得的提取原液通过低通量透析器滤出其内含有的水分,直到剩余的液体体积为提取原液体积的0.1‑1%时,得β2微球蛋白浓缩液;步骤4:将β2微球蛋白浓缩液用蛋白质分离纯化装置处理,去除其他白蛋白,纯化β2微球蛋白浓缩液,制得成品。

【技术特征摘要】
1.一种β2微球蛋白的提取方法,其特征在于包括如下步骤:步骤1:收取透析患者透析废液,向其内加入其质量0.1-15%的蛋白保护剂,加入蛋白保护剂的透析废液作为提取原液;步骤2:将提取原液通过高通量透析器将其中含有的大分子物质去除,收取滤出的提取原液待用;步骤3:将经步骤2滤得的提取原液通过低通量透析器滤出其内含有的水分,直到剩余的液体体积为提取原液体积的0.1-1%时,得β2微球蛋白浓缩液;步骤4:将β2微球蛋白浓缩液用蛋白质分离纯化装置处理,去除其他白蛋白,纯化β2微球蛋白浓缩液,制得成品。2.根据权利要求1所述的β2微球蛋白的提取方法,其特征在于步骤4中所述的蛋白质分离纯化装置为切割分子量为1-6W的超滤分离纯化装置。3.根据权利要求2所述的β2微球蛋白的提取方法,其特征在于所述的超滤分离纯化装置的切割分子量为3-5W。4...

【专利技术属性】
技术研发人员:牟倡骏曲佳伟于亚楠李焕钊王超
申请(专利权)人:威海威高血液净化制品有限公司
类型:发明
国别省市:山东;37

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