一种复合菌固态发酵玉米蛋白粉的制作方法技术

一种复合菌固态发酵玉米蛋白粉的制作方法属生物饲料技术领域，本发明专利技术包括下列步骤：1.选过40目筛的玉米蛋白粉作为发酵原料；2.制备活菌数为1.0×108～1.0×109cfu/ml的复合菌发酵种子液；3.将复合菌发酵种子液按6％接入玉米蛋白粉中，含水量为50％，自然pH值，混匀后得发酵基础料；4.将发酵基础料按40‑50cm厚度摊铺在发酵池底，发酵池温度保持在30～35℃，厌氧发酵72‑96h，得到发酵玉米蛋白粉；5.将发酵玉米蛋白粉在温度为50～55℃下烘干，降至室温，即得复合菌固态发酵玉米蛋白粉成品；本发明专利技术能将玉米蛋白大分子降解为小肽和游离氨基酸等，并有效去除苦味，提高适口性，可作为一种优质的蛋白质饲料资源，在饲料中添加能显著提高动物的免疫机能。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属生物饲料
，具体涉及一种复合菌固态发酵玉米蛋白粉的制作方法。
技术介绍
玉米蛋白粉又称玉米黄粉，其外观呈金黄色颗粒状，有玉米发酵的特殊气味，难溶于水。玉米蛋白粉的蛋白含量高达55％以上，淀粉15％，脂肪7％，纤维含量极低，仅为2％，但是氨基酸组成极不平衡，其中亮氨酸含量较高(15.1％)，但是色氨酸(1.2％)和蛋氨酸(1.8％)含量较低，再加上玉米蛋白粉本身含有苦味适口性差，造成了在动物饲料中的应用程度很低。目前，常用的玉米蛋白粉处理方法有酶解法和微生物发酵法。酶解法主要是利用细胞产生的具有专一性的生物催化剂，对玉米蛋白粉进行水解得到玉米肽，但是酶解法成本高，反应体系中反应过程难以控制，易造成各批次间产品分子组成的差异，而且反应结束后，需改变水解条件或热处理钝化酶，进而降低酶的利用率，增加生产成本，产品的转化率较低。微生物发酵处理玉米蛋白粉，主要依靠微生物分泌的蛋白酶系，将大分子的玉米蛋白降解成小肽、游离氨基酸等，在降解蛋白质的同时，也产生了大量的有益菌、有机酸等次级代谢产物，能够有效去除苦味，降低抗营养因子。发酵玉米蛋白粉作为一种优质的蛋白质来源，具有促进肠道发育，刺激和诱导小肠绒毛刷状缘分泌消化酶，促进畜禽生长，提高饲料利用率，增强机体的免疫机能等优点。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种能将玉米蛋白大分子降解为小肽和游离氨基酸等、有效去除苦味、提高适口性，且能显著提高动物机体免疫机能的复合菌固态发酵玉米蛋白粉的制备方法。本专利技术的一种复合菌固态发酵玉米蛋白粉的制作方法，包括下列步骤：1.1选取过40目筛的玉米蛋白粉作为发酵原料；1.2制备活菌数为1.0×108～1.0×109cfu/ml的复合菌发酵种子液，包括下列步骤：1.2.1将番茄汁20mL、酵母提取物5g、牛肉膏10g、乳糖20g、葡萄糖2g、K2HPO42g、吐温801g、乙酸钠5g、水1000ml，pH值7.0，作为乳酸菌液体培养基；1.2.2用无菌吸管吸取步骤1.2.1所得的乳酸菌液体培养基，滴入装有乳酸菌冻干粉的瓶中，乳酸菌液体培养基和乳酸菌冻干粉的比例为1：10，按100次/min振荡，得到呈悬浮状的乳酸菌液；1.2.3用无菌吸管吸取步骤1.2.2所得的全部乳酸菌悬浮液，移植到MRS固体培养基中，37℃培养36～48h，然后接种到MRS斜面培养基上，斜面培养36～48h，再接种到步骤1.2.1的液体培养基中，进行振荡频率为160次/min的摇瓶培养12～24h，得到活菌数为1.0×108～1.0×109cfu/ml的乳酸菌发酵种子液；所述MRS固体培养基的配方为：蛋白胨10g、牛
肉膏10g、酵母粉10g、K2HPO42g、柠檬酸二胺2g、乙酸钠5g、葡萄糖20g、吐温-801mL、MgSO4.7H2O 0.25g、H2O 1000mL，琼脂20g。1.2.4将马铃薯200g/l、葡萄糖20g/l、水1000ml，作为黑曲霉液体培养基；1.2.5用无菌吸管吸取步骤1.2.4所得的黑曲霉液体培养基，滴入装有黑曲霉冻干粉的瓶中，黑曲霉液体培养基和黑曲霉冻干粉的比例为1：10，按100次/min振荡得到呈悬浮状的黑曲霉菌液；1.2.6用无菌吸管吸取步骤1.2.5所得的全部黑曲霉悬浮液，移植到察氏琼脂固体培养基中，在30℃培养72h，然后接种到察氏琼脂斜面培养基上，斜面培养72h，再接种到步骤1.2.4的黑曲霉液体培养基中，进行振荡频率100次/min的摇瓶培养72～96h，得到活菌数为1.0×108～1.0×109个/ml的黑曲霉发酵种子液；所述察氏琼脂固体培养基的配方为：硝酸钠3.0g、磷酸二氢钾1.0g、硫酸镁0.5g、氯化钾0.5g、硫酸亚铁0.01g、蔗糖30.0g、琼脂15g、蒸馏水1000mL。1.2.7将马铃薯200g/l、葡萄糖20g/l、水1000ml，作为酵母菌液体培养基；1.2.8用无菌吸管吸取步骤1.2.7所得的酵母菌液体培养基，滴入装有酵母菌冻干粉的瓶中，酵母菌液体培养基和酵母菌冻干粉的比例为1：10，按120次/min振荡，得到呈悬浮状的酵母菌液；1.2.9用无菌吸管吸取步骤1.2.8所得的全部酵母菌悬浮液，移植到麦芽汁琼脂固体培养基中，在30℃培养36～48h，然后接种到麦芽汁琼脂斜面培养基上，斜面培养36～48h，再接种到步骤1.2.7的液体培养基中，进行振荡频率为120次/min的摇瓶培养24～36h，得到活菌数为1.0×108～1.0×109cfu/ml的酵母菌发酵种子液；所述麦芽汁琼脂固体培养基的配方为：麦芽汁150mL、琼脂3g、自然pH值。1.2.10将步骤1.2.3所得的乳酸菌发酵种子液、步骤1.2.6所得的黑曲霉发酵种子液和步骤1.2.9所得的酵母菌发酵种子液按体积比1:1:1混合，按5～10％的接菌量接种到100L装有复合菌发酵种子液培养基的种子罐中，培养72～96h，得到活菌数为1.0×108～1.0×109cfu/ml的复合菌发酵种子液，所述复合菌发酵种子液以5～10％的接菌量接种到100L种子罐中，是指发酵罐的装液量为发酵罐体积的70％，接菌量指的是这70％的5～10％；所述的复合菌发酵种子液培养基配方为：蛋白胨10g、酵母提取物5g、NaCL 5g、KH2PO40.036g、MgSO40.05g、NaH2PO40.107g、CaCl20.0002g、ZnCl20.014g、FeSO40.0002g、水1000ml。1.3将步骤1.2制备的复合菌发酵种子液按6％(v/w)接入步骤1.1的玉米蛋白粉中，调整含水量为50％，自然pH值，混合均匀后得到发酵基础料；1.4将步骤1.3所得的发酵基础料按40-50cm的厚度摊铺在发酵池底，发酵池温度保持在30～35℃，厌氧发酵72～96h，得到发酵玉米蛋白粉；1.5将步骤1.4所得的发酵玉米蛋白粉在温度为50～55℃下烘干；1.6待步骤1.5的发酵玉米蛋白粉降至室温，即得复合菌固态发酵玉米蛋白粉成品。与现有技术相比，本专利技术具有以下优点：1.玉米蛋白粉在乳酸菌、黑曲霉及酵母菌的复合发酵下，产生的各种蛋白酶类能够有效地将玉米蛋白大分子降解为小肽和游离氨基酸等，并有效去除苦味，提高适口性，从而成为一种优质的蛋白质饲料资源；2.在饲料中添加能够显著提高动物机体的免疫机能。具体实施方式下面结合实施例，对本专利技术提供的复合菌固态发酵玉米蛋白粉的制作方法进行详细的说明。实施例1参照本实施例的复合菌固态发酵玉米蛋白粉的制做方法，它包括以下具体步骤：(1)发酵原料的制备选取过40目筛(0.42mm)的玉米蛋白粉作为发酵原料。(2)复合菌发酵种子液的制备用无菌吸管吸取适宜的液体培养基，滴入乳酸菌冻干粉保存瓶中，轻轻振荡，使冻干菌体呈悬浮状，吸取全部菌悬液，移植于MRS固体培养基中，在37℃培养36h后，接种到MRS斜面培养基上，斜面培养36h后，接种到液体培养基中，摇瓶培养12h，得到活菌数为1.0×108的种子液；用无菌吸管吸取适宜的液体培养基，滴入装有黑曲霉冻干粉的瓶中，振荡使冻干菌体呈悬浮状，用无菌吸管吸取全部悬浮液，移植到察氏琼脂固体培养基中，在30℃培养72h，然后接种到察氏琼脂斜面本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种复合菌固态发酵玉米蛋白粉的制作方法，其特征在于包括下列步骤：1.1选取过40目筛的玉米蛋白粉作为发酵原料；1.2制备活菌数为1.0×108～1.0×109cfu/ml的复合菌发酵种子液，包括下列步骤：1.2.1将番茄汁20mL、酵母提取物5g、牛肉膏10g、乳糖20g、葡萄糖2g、K2HPO42g、吐温801g、乙酸钠5g、水1000ml，pH值7.0，作为乳酸菌液体培养基；1.2.2用无菌吸管吸取步骤1.2.1所得的乳酸菌液体培养基，滴入装有乳酸菌冻干粉的瓶中，乳酸菌液体培养基和乳酸菌冻干粉的比例为1：10，按100次/min振荡，得到呈悬浮状的乳酸菌液；1.2.3用无菌吸管吸取步骤1.2.2所得的全部乳酸菌悬浮液，移植到MRS固体培养基中，37℃培养36～48h，然后接种到MRS斜面培养基上，斜面培养36～48h，再接种到步骤1.2.1的液体培养基中，进行振荡频率为160次/min的摇瓶培养12～24h，得到活菌数为1.0×108～1.0×109cfu/ml的乳酸菌发酵种子液；1.2.4将马铃薯200g/l、葡萄糖20g/l、水1000ml，作为黑曲霉液体培养基；1.2.5用无菌吸管吸取步骤1.2.4所得的黑曲霉液体培养基，滴入装有黑曲霉冻干粉的瓶中，黑曲霉液体培养基和黑曲霉冻干粉的比例为1：10，按100次/min振荡得到呈悬浮状的黑曲霉菌液；1.2.6用无菌吸管吸取步骤1.2.5所得的全部黑曲霉悬浮液，移植到察氏琼脂固体培养基中，在30℃培养72h，然后接种到察氏琼脂斜面培养基上，斜面培养72h，再接种到步骤1.2.4的黑曲霉液体培养基中，进行振荡频率100次/min的摇瓶培养72～96h，得到活菌数为1.0×108～1.0×109个/ml的黑曲霉发酵种子液；1.2.7将马铃薯200g/l、葡萄糖20g/l、水1000ml，作为酵母菌液体培养基；1.2.8用无菌吸管吸取步骤1.2.7所得的酵母菌液体培养基，滴入装有酵母菌冻干粉的瓶中，酵母菌液体培养基和酵母菌冻干粉的比例为1：10，按120次/min振荡，得到呈悬浮状的酵母菌液；1.2.9用无菌吸管吸取步骤1.2.8所得的全部酵母菌悬浮液，移植到麦芽汁琼脂固体培养基中，在30℃培养36～48h，然后接种到麦芽汁琼脂斜面培养基上，斜面培养36～48h，再接种到步骤1.2.7的液体培养基中，进行振荡频率为120次/min的摇瓶培养24～36h，得到活菌数为1.0×108～1.0×109cfu/ml的酵母菌发酵种子液；1.2.10将步骤1.2.3所得的乳酸菌发酵种子液、步骤1.2.6所得的黑曲霉发酵种子液和步骤1.2.9所得的酵母菌发酵种子液按体积比1:1:1混合，按5～10％的接菌量接种到100L装有复合菌发酵种子液培养基的种子罐中，培养72～96h，得到活菌数为1.0×108～1.0×109cfu/ml的复合菌发酵种子液，所述复合菌发酵种子液以5～10％的接菌量接种到100L种子罐中，是指发酵罐的装液量为发酵罐体积的70％，接菌量指的是这70％的5～10％；1.3将步骤1.2制备的复合菌发酵种子液按6％(v/w)接入步骤1.1的玉米蛋白粉中，调整含水量为50％，自然pH值，混合均匀后得到发酵基础料；1.4将步骤1.3所得的发酵基础料按40‑50cm的厚度摊铺在发酵池底，发酵池温度保持在30～35℃，厌氧发酵72～96h，得到发酵玉米蛋白粉；1.5将步骤1.4所得的发酵玉米蛋白粉在温度为50～55℃下烘干；1.6待步骤1.5的发酵玉米蛋白粉降至室温，即得复合菌固态发酵玉米蛋白粉成品。...

【技术特征摘要】
1.一种复合菌固态发酵玉米蛋白粉的制作方法，其特征在于包括下列步骤：1.1选取过40目筛的玉米蛋白粉作为发酵原料；1.2制备活菌数为1.0×108～1.0×109cfu/ml的复合菌发酵种子液，包括下列步骤：1.2.1将番茄汁20mL、酵母提取物5g、牛肉膏10g、乳糖20g、葡萄糖2g、K2HPO42g、吐温801g、乙酸钠5g、水1000ml，pH值7.0，作为乳酸菌液体培养基；1.2.2用无菌吸管吸取步骤1.2.1所得的乳酸菌液体培养基，滴入装有乳酸菌冻干粉的瓶中，乳酸菌液体培养基和乳酸菌冻干粉的比例为1：10，按100次/min振荡，得到呈悬浮状的乳酸菌液；1.2.3用无菌吸管吸取步骤1.2.2所得的全部乳酸菌悬浮液，移植到MRS固体培养基中，37℃培养36～48h，然后接种到MRS斜面培养基上，斜面培养36～48h，再接种到步骤1.2.1的液体培养基中，进行振荡频率为160次/min的摇瓶培养12～24h，得到活菌数为1.0×108～1.0×109cfu/ml的乳酸菌发酵种子液；1.2.4将马铃薯200g/l、葡萄糖20g/l、水1000ml，作为黑曲霉液体培养基；1.2.5用无菌吸管吸取步骤1.2.4所得的黑曲霉液体培养基，滴入装有黑曲霉冻干粉的瓶中，黑曲霉液体培养基和黑曲霉冻干粉的比例为1：10，按100次/min振荡得到呈悬浮状的黑曲霉菌液；1.2.6用无菌吸管吸取步骤1.2.5所得的全部黑曲霉悬浮液，移植到察氏琼脂固体培养基中，在30℃培养72h，然后接种到察氏琼脂斜面培养基上，斜面培养72h，再接种到步骤1.2.4的黑曲霉液体培养基中，进行振荡频率100次/min的摇瓶培养72～96h，得到活菌数为1.0×108～1.0×109个/ml的黑曲霉发酵种子液；1.2.7将马铃薯200g/l、葡萄糖20g/l、水1000ml，作为酵母菌液体培养基；1.2.8用无菌吸管吸取步骤1.2.7所得的酵母菌液体培养基，滴入装有酵母菌冻干粉的瓶中，酵母菌液体培养基和酵母菌冻干粉的比例为1：10，按120次/min振荡，得到呈悬浮状的酵母菌液；1.2.9用无菌吸管吸取步骤1.2.8所得的全部酵母菌悬浮液，移植到麦芽汁琼脂固体培养基中，在30℃培养36～48h，然后接种到麦芽汁琼脂斜面培养基上，斜面培养36～48h，再接种到步骤1.2.7的液体培养基中，进行振荡频率为120次/mi...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏炳栋，陈群，邱玉朗，王欣，李林，
申请(专利权)人：吉林省农业科学院，
类型：发明
国别省市：吉林;22