一种鱼肝油提取物及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种鱼肝油提取物及其制备方法，包括萃取、盐析、酸洗、蒸馏、丙酮精制、分子蒸馏、柱层析、冷冻分离等步骤，去除鱼肝油提取物中的蛋白质、脂肪酸(游离脂肪酸、固体脂肪酸)、矿物质、不皂化物、磷脂、多肽、低沸点溶剂、胆固醇、多氯联苯、碳化物、大极性物质等杂质，脱色并提高不饱和脂肪酸的含量，从而制得高质量的鱼肝油提取物。本发明专利技术的鱼肝油提取物中的成分及其配比合理，成分之间具有协同增效作用，显著增加了鱼肝油制剂的有效性和安全性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于药物制备
，具体涉及一种鱼肝油提取物及其制备方法。
技术介绍
鱼肝油(COD LIVER OIL)为人类生长发育所必须的维生素(VA、VD)的主要来源，主要用于防治维生素A(VA)和维生素D(VD)缺乏引起的皮肤干燥、毛囊角化、干眼病、夜盲症、佝偻病等病症，对人类健康和生长发育有着十分重要的作用。鱼肝油的发展可追溯到20世纪六十年代，当时全国各地儿童佝偻病发病比例很高，特别是北方地区的发病率尤其高，表现为囟门迟迟不闭合、方颅、鸡胸、罗圈腿等症状，这些症状与钙吸收不足、骨头软有关，而VD为促进钙吸收必不可少的有效成分。佝偻病患者服用含VA和VD的鱼肝油制剂后，并晒太阳，起到很好地预防和治疗效果。鱼肝油为自海产鱼肝脏中制得的鱼肝油提取物，将制得的鱼肝油粗品经0℃冷冻，脱去部分固体脂肪后，用精炼食用植物油获取浓度较高的鱼肝油，其主要成分为VA和VD，还含有其他维生素、ω-3脂肪酸(如DHA、EPA)、烷氧基甘油醚、角鲨烯等活性成分。目前，按《中国药典》相关规定，市售药用鱼肝油或维生素AD滴剂为高浓度鱼肝油或维生素A与维生素D2或D3，加精炼食用植物油(在0℃左右脱去固体脂肪)或鱼肝油溶解和调整浓度，并加适量稳定剂制成，以及植物油配制的维生素AD制剂与传统鱼油配制的维生素AD制剂(也称鱼油型鱼肝油)。植物油基质型滴剂是鱼肝油的替代品，又称人工合成的鱼肝油或人工鱼肝油，其优点在于：植物油与合成维生素AD的原料资源丰富、来源稳定、加工简便，但存在营养性不足、成分之间无协同增效作用等缺陷，几乎不具备促进智力发育、协同增强免疫力、协同改善视网膜、增进健康等作用。传统的鱼油提取方法包括蒸煮法、蒸煮法、酶解法、超临界萃取、溶剂萃取等，并结合超声波、微波、直流电、脉冲等辅助技术提高提取效率。1、蒸煮法(鱼油提取方法研究进展，《水产科技》，2009年第三期：6-10)：匀浆、混匀，加入适量水，在40-60℃加热一段时间，热离心或过滤，得粗鱼油，用热水洗涤，离心，干燥。2、淡碱水解法：匀浆，加入适量水，加入适量碱液，加热，加入适量盐，离心，制得粗鱼油。3、酶解法：搅碎，一定温度下加热，加入蛋白酶或利用自身酶，酶解，离心，得到粗鱼油。4、超临界萃取：鱼肝脏破碎物用乙酸乙酯浸提，粗提液脱水处理，浓缩后精制，得到鱼油。5、溶剂萃取法(动物油脂提取及加工技术研究进展，《油脂加工》，2010年第35卷第12期，8-11页；河豚鱼肝脏中鱼油的提取及EPA和DHA的检测，《辽宁中医杂志》，2009年第36卷第3期，438-440页)：利用石油醚、乙醚等提取鱼油，并没有加入分子蒸馏和柱层析技术。传统鱼油型鱼肝油制剂在有效成分或营养成分和其应用上存在成份组合不合理等问题，并存在安全性、有效性等隐患，如婴幼儿人群过量使用EPA，会引起体内器官出血的可能性。如何正确搭配鱼肝油中活性成分，以满足不同群体尤其是儿童人群的健康需求极为重要。随着世界性资源不断衰退，海产鱼肝油原料变得越来越宝贵，如何有效利用鱼肝油有效成分，成为迫切需要解决的技术问题。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种鱼肝油提取物的制备方法，包括下述步骤：1)萃取：将鱼肝制成鱼肝浆，再在鱼肝浆中加入与水不互溶的有机溶剂，搅拌，萃取，静置，分离，取有机溶剂层，其中，鱼肝：有机溶剂的质量体积比为1-2∶2-4，所述的有机溶剂选自乙酸乙酯、石油醚、正己烷、乙醚的任一种或其组合；2)盐析：在有机溶剂萃取层中加入酸碱调节剂，调节pH8-9，搅拌，静置，过滤，取上清液，制得鱼肝浆盐析上清液；3)酸洗：将鱼肝浆盐析上清液用酸性物质的水溶液洗涤后，在其上清液中 加入酸碱调节剂，调节pH为6-9，制得鱼肝浆酸洗上清液；4)蒸馏：浓缩鱼肝浆酸洗上清液，制得鱼肝油蒸馏浓缩物；5)丙酮精制：在鱼肝油蒸馏浓缩物中加入丙酮，混合均匀后，冷却放置，过滤，滤液浓缩，制得鱼肝油丙酮精制浓缩物；6)分子蒸馏：将鱼肝油提取浓缩物进行多级分子蒸馏，制得鱼肝油分子蒸馏浓缩物；7)柱层析：将鱼肝油分子蒸馏浓缩物溶于流动相，用层析柱进行分离洗脱，收集合并柱层析洗脱液，浓缩，制得鱼肝油柱层析浓缩物，其中，所述的流动相选自乙酸乙酯、丙酮、异丙醇、乙醇、正己烷、乙醚的任一种或其组合，所述的层析柱填料选自氧化铝、硅胶、大孔树脂、离子交换树脂的任一种或其组合，所述的洗脱液选自乙酸乙酯、丙酮、异丙醇、乙醇、正己烷、乙醚的任一种或其组合；8)冷冻分离：将鱼肝油柱层析浓缩物在≤10℃条件下进行冷冻，放置，分离，收集分离液体，即得。本专利技术的优选技术方案中，步骤1)中鱼肝：有机溶剂的质量体积比为1∶1-2。本专利技术的优选技术方案中，步骤1)中所述的有机溶剂选自乙酸乙酯、丙酮的任一种或其组合。本专利技术的优选技术方案中，步骤1)中所述的萃取次数不少于1次，优选为不少于2次，更优选为不少于3次。本专利技术的优选技术方案中，步骤2)或步骤3)中所述的酸碱调节剂选自碳酸钠、硫酸钠、氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钾、硫酸钾、醋酸钠、醋酸钾、磷酸钠、磷酸钾的任一种或其组合。本专利技术的优选技术方案中，步骤3)中所述的酸性物质选自盐酸、硫酸、硝酸、醋酸、磷酸、柠檬酸的任一种或其组合。本专利技术的优选技术方案中，所述酸性水溶液的浓度≤0.1N(当量)。本专利技术的优选技术方案中，步骤3)中酸性物质水溶液的洗涤次数不少于2次，优选为不少于3次。本专利技术的优选技术方案中，步骤4)中的浓缩温度为30-100℃，优选为40-85℃，更优选为50-65℃。本专利技术的优选技术方案中，步骤4)中所述的浓缩级数不少于2级，优选为不少于3级。本专利技术的优选技术方案中，步骤4)中所述的浓缩温度不低于40℃，优选为不低于50℃，更优选为不低于60℃。本专利技术的优选技术方案中，步骤5)中所述的多级分子蒸馏的蒸馏级数不少于2级，优选为不少于3级。本专利技术的优选技术方案，步骤5)中第一级分子蒸馏温度为80℃-170℃。本专利技术的优选技术方案，步骤5)中第二级分子蒸馏温度为90℃-195℃。本专利技术的优选技术方案，步骤5)中第三级分子蒸馏温度为100℃-205℃。本专利技术的优选技术方案中，步骤8)中所述的冷冻温度≤5℃，优选为≤0℃。本专利技术的另一目的在于提供一种鱼肝油提取物，所述鱼肝油提取物的制备方法包括下述步骤：1)萃取：将鱼肝制成鱼肝浆，再在鱼肝浆中加入与水不互溶的有机溶剂，搅拌，萃取，静置，分离，取有机溶剂层，其中，鱼肝：有机溶剂的质量体积比为1-2∶2-4，所述的有机溶剂选自乙酸乙酯、石油醚、正己烷、乙醚的任一种或其组合；2)盐析：在有机溶剂萃取层中加入酸碱调节剂，调节pH8-9，搅拌，静置，过滤，取上清液，制得鱼肝浆盐析上清液；3)酸洗：将鱼肝浆盐析上清液用酸性物质的水溶液洗涤后，在其上清液中加入酸碱调节剂，调节pH为6-9，制得鱼肝浆酸洗上清液；4)蒸馏：浓缩鱼肝浆酸洗上清液，制得鱼肝油蒸馏浓缩物；5)丙酮精制：在鱼肝油蒸馏浓缩物中加入丙酮，混合均匀后，冷却放置，过滤，滤液浓缩，制得鱼肝油丙酮精制浓缩物；6)分子蒸馏：将鱼肝油提取浓缩物进行多级分子蒸馏，制得鱼肝油分子蒸馏浓缩物；7)柱层析：将鱼肝油分子蒸馏浓缩物溶于流动相，用层析柱进行分离洗脱，收集合并柱层析洗脱液，浓缩，制得鱼肝油柱层析浓缩物，其本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鱼肝油提取物的制备方法，包括下述步骤：1)萃取：将鱼肝制成鱼肝浆，再在鱼肝浆中加入与水不互溶的有机溶剂，搅拌，萃取，静置，分离，取有机溶剂层，其中，鱼肝：有机溶剂的质量体积比为1‑2∶2‑4，所述的有机溶剂选自乙酸乙酯、石油醚、正己烷、乙醚的任一种或其组合；2)盐析：在有机溶剂萃取层中加入酸碱调节剂，调节pH8‑9，搅拌，静置，过滤，取上清液，制得鱼肝浆盐析上清液；3)酸洗：将鱼肝浆盐析上清液用酸性物质的水溶液洗涤后，在其上清液中加入酸碱调节剂，调节pH为6‑9，制得鱼肝浆酸洗上清液；4)蒸馏：浓缩鱼肝浆酸洗上清液，制得鱼肝油蒸馏浓缩物；5)丙酮精制：在鱼肝油蒸馏浓缩物中加入丙酮，混合均匀后，冷却放置，过滤，滤液浓缩，制得鱼肝油丙酮精制浓缩物；6)分子蒸馏：将鱼肝油提取浓缩物进行多级分子蒸馏，制得鱼肝油分子蒸馏浓缩物；7)柱层析：将鱼肝油分子蒸馏浓缩物溶于流动相，用层析柱进行分离洗脱，收集合并柱层析洗脱液，浓缩，制得鱼肝油柱层析浓缩物，其中，所述的流动相选自乙酸乙酯、丙酮、异丙醇、乙醇、正己烷、乙醚的任一种或其组合，所述的层析柱填料选自氧化铝、硅胶、大孔树脂、离子交换树脂的任一种或其组合，所述的洗脱液选自乙酸乙酯、丙酮、异丙醇、乙醇、正己烷、乙醚的任一种或其组合；8)冷冻分离：将鱼肝油柱层析浓缩物在≤10℃条件下进行冷冻，放置，分离，收集分离液体，即得。...

【技术特征摘要】
1.一种鱼肝油提取物的制备方法，包括下述步骤：1)萃取：将鱼肝制成鱼肝浆，再在鱼肝浆中加入与水不互溶的有机溶剂，搅拌，萃取，静置，分离，取有机溶剂层，其中，鱼肝：有机溶剂的质量体积比为1-2∶2-4，所述的有机溶剂选自乙酸乙酯、石油醚、正己烷、乙醚的任一种或其组合；2)盐析：在有机溶剂萃取层中加入酸碱调节剂，调节pH8-9，搅拌，静置，过滤，取上清液，制得鱼肝浆盐析上清液；3)酸洗：将鱼肝浆盐析上清液用酸性物质的水溶液洗涤后，在其上清液中加入酸碱调节剂，调节pH为6-9，制得鱼肝浆酸洗上清液；4)蒸馏：浓缩鱼肝浆酸洗上清液，制得鱼肝油蒸馏浓缩物；5)丙酮精制：在鱼肝油蒸馏浓缩物中加入丙酮，混合均匀后，冷却放置，过滤，滤液浓缩，制得鱼肝油丙酮精制浓缩物；6)分子蒸馏：将鱼肝油提取浓缩物进行多级分子蒸馏，制得鱼肝油分子蒸馏浓缩物；7)柱层析：将鱼肝油分子蒸馏浓缩物溶于流动相，用层析柱进行分离洗脱，收集合并柱层析洗脱液，浓缩，制得鱼肝油柱层析浓缩物，其中，所述的流动相选自乙酸乙酯、丙酮、异丙醇、乙醇、正己烷、乙醚的任一种或其组合，所述的层析柱填料选自氧化铝、硅胶、大孔树脂、离子交换树脂的任一种或其组合，所述的洗脱液选自乙酸乙酯、丙酮、异丙醇、乙醇、正己烷、乙醚的任一种或其组合；8)冷冻分离：将鱼肝油柱层析浓缩物在≤10℃条件下进行冷冻，放置，分离，收集分离液体，即得。2.根据权利要求1所述的制备方法，步骤1)中鱼肝：有机溶剂的质量体积比为1∶1-2。3.根据权利要求1或2所述的制备方法，步骤1)中所述的有机溶剂选自乙酸乙酯、丙酮的任一种或其组合。4.根据权利要求1-3任一项所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑海辉，陈文波，金晴昊，迟玉峰，乐盛，董芮娟，
申请(专利权)人：海力生集团有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33