本发明专利技术属医药技术领域，具体涉及一种维吾尔药卡麻孜日尤司抗肿瘤活性提取物及其组合物的制备方法和其在制备预防及治疗乳腺癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、宫颈癌、脑胶质瘤、肝癌等恶性肿瘤的药物中的应用。本发明专利技术的提取物通过如下方法制备：维吾尔药卡麻孜日尤司经超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用体积比100：10-100:25为石油醚：乙酸乙酯混合溶剂洗脱，继用体积比100:17-100：100的石油醚：乙酸乙酯混合溶剂洗脱，石油醚：乙酸乙酯100:17-100：100洗脱液干燥后即得。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属医药
，具体涉及一种维吾尔药卡麻孜日尤司抗肿瘤活性提取物及其组合物的制备方法和其在制备预防及治疗肝癌、肺癌、胃癌、肠癌、脑胶质瘤等恶性肿瘤的药物中的用途。
技术介绍
本品为菊科植物苦蒿Dcroptiol repens(L.)Dc的干燥果实，具有一定的抗肿瘤作用，但是，对其抗肿瘤的有效成分一直不清楚。本专利技术在研究广枣抗肿瘤活性时意外地发现，亦具有很好的乳腺癌、宫颈癌、肝癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、脑胶质瘤等恶性肿瘤的预防及治疗作用，可以应用癌症的预防和治疗。本专利技术通过系统地筛选研究，发现了的有效提取物具有显著的抗肿瘤活性，可以应用于肿瘤的预防和治疗。
技术实现思路
本专利技术所解决的技术问题是提供一种提取物。本专利技术还提供了以提取物为主要活性成分的组合物。本专利技术同时提供了卡麻孜日尤司提取物及其组合物的制备和应用。本专利技术是通过如下技术方案实现的：维吾尔药卡麻孜日尤司经超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂(100：0-0：100)梯度洗脱(石油醚：乙酸乙酯，具体比例见表1)，各石油醚：乙酸乙酯比例混合溶剂洗脱液经浓缩、干燥后，利用体外抗肿瘤活性筛选体系测试其抗肿瘤活性，意外地发现先用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂(石油醚：乙酸乙酯，100：10-100:25，体积比)洗脱，继用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂(石油醚：乙酸乙酯，100:17-100：100，体积比)洗脱，石油醚：乙酸乙酯100:17-100：100洗脱液干燥后即。优选地，先用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂(石油醚：乙酸乙酯，100：10-100:14，体积比)洗脱，继用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂(石油醚：乙酸乙酯，100:17，体积比)洗脱，石油醚：乙酸乙酯100:17洗脱液干燥即得；或先用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂(石油醚：乙酸乙酯，100：20-100:25，体积比)洗脱，继用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂(石油醚：乙酸乙酯，100：30-100:100，体积比)洗脱，石油醚：乙酸乙酯100:100洗脱液干燥即得。更为优选地，先用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂(石油醚：乙酸乙酯，100:14，体积比)洗脱，继用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂(石油醚：乙酸乙酯，100:17，体积比)洗脱，石油醚：乙酸乙酯100:17洗脱液干燥后，具有显著地抗肿瘤活性。该活性提取物从未见文献报道，其TLC分析表征如图1，TLC条件为：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮(3:1:1)显色方法：香草醛-硫酸显色。或先用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂(石油醚：乙酸乙酯，100:25，体积比)洗脱，继用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂(石油醚：乙酸乙酯，100:100，体积比)洗脱，石油醚：乙酸乙酯100:100洗脱液干燥后，具有显著地抗肿瘤活性。该活性提取物从未见文献报道，其TLC分析表征如图2，TLC条件为：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮(3:1:1)显色方法：香草醛-硫酸显色。具体，发现过程如下：1、维吾尔药卡麻孜日尤司超声提取物的制备取维吾尔药卡麻孜日尤司20g，经100ml超声提取15min，提取液浓缩后，得提取物SN0050样品1.6021g，留样0.50g，剩余1.1021g。2、石油醚：乙酸乙酯混合溶剂梯度洗脱方法和结果取维吾尔药卡麻孜日尤司20g，经100ml超声提取15min，提取液浓缩后，得提取物SN0050样品1.6021g，留样0.50g，剩余1.1021g。上柱，甲醇溶解，共用甲醇15ml。上硅胶柱色谱，拌样硅胶1.5g,空白硅胶10g，玻璃柱内径2.0cm，石油醚：乙酸乙酯系统梯度洗脱(石油醚：乙酸乙酯，体积比，见表1)，柱体积29ml，每个梯度洗脱200ml，得到各个浓度提取洗脱液的洗脱物，回收溶剂，即得石油醚：乙酸乙酯梯度洗脱提取物，TLC分析结果见图3，TLC条件为：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮(3:1:1)显色方法：香草醛-硫酸显色。表1梯度名称石：乙体积(mL)样品重量(mg)SN005001纯石油醚20031SN005002100：120036SN005003100：220030SN005004100：320045SN005005100：420058SN005006100：520044SN005007100：620053SN005008100：820045SN005009100：1020050SN005010100：1220060SN005011100：1420055SN005012100：1720059SN005013100：2020060SN005014100：2520063SN005015100：3020071SN005016100：50200101SN005017100：100200113SN005018纯乙酸乙酯20098SN005019纯甲醇2001333、抗肿瘤活性筛选方法和结果1)实验条件a)细胞株信息大鼠脑胶质瘤细胞株C6购于中国典型培养物保藏中心细胞库b)药品及试剂样品无菌条件下，DMSO溶解配置成母液浓度为100mg/mL，使用时用RPMI-1640培养液稀释至所需浓度(DMSO≤1‰)。RPMI Medium 1640培养基干粉购于美国GIBCO公司。胎牛血清购于北京元亨圣马生物技术研究所。Trypsin 1:250、二甲基二苯基四氮唑溴盐(MTT)。c)仪器CO2培养箱(SANYO，日本)垂直层流洁净工作台(上海上净净化设备有限公司)倒置生物显微镜(重庆光电仪器有限公司)低/高速台式离心机(上海安亭科学仪器厂)电子天平(奥豪斯仪器有限公司)酶标仪(伯乐生命医学产品有限公司)立式压力蒸汽灭菌器(上海申安医疗器械厂)鼓风干燥箱(上海跃进医疗器械厂)PH计(SARTORIUS，德国)2)实验方法和过程大鼠脑胶质瘤细胞株C6以4000/孔的密度铺于96孔板，每孔100ul，12h后使用。各组分以DMSO溶解为100mg/mL储存液，保存于-20℃待用。铺板后12h，观察细胞汇合率约为40％，加药，浓度均为100μg/mL，每个组分3个复孔。每板细胞设立二个对照组(培养基+细
胞；含0.1％DMSO培养基+细胞)，3个空白孔(只有培养基)。加入药物24小时后，加入20μl四甲基偶氮唑盐化学名为3-(4,5-二甲基噻唑)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(3-(4,5-dimethyl-2thiazolyl)-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide，MTT)，继续培养4小时。完全弃去上清液，加入100μl DMSO，混匀使MTT完全溶解，去气泡。490nm测定OD值。3)实验结果表表2结果发现：本专利技术优选如下技术方案：维吾尔药卡麻孜日尤司经超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂(石油醚：乙酸乙酯，100:14，体积比)洗脱，继用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂(石油醚：乙酸乙酯，100:17，体积比)洗脱，石油醚：乙酸乙酯100:17洗脱液经回收有机溶剂，干燥后，得到高活性提取物，即为该抗肿瘤的活性提取物。该活性提取物从未见文献报道，其TLC分析表征如图1。或维吾尔药本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种维吾尔药卡麻孜日尤司提取物，其特征为，维吾尔药卡麻孜日尤司经超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用体积比100：10‑100:25为石油醚：乙酸乙酯混合溶剂洗脱，继用体积比100:17‑100：100的石油醚：乙酸乙酯混合溶剂洗脱，石油醚：乙酸乙酯100:17‑100：100洗脱液干燥后即得。
【技术特征摘要】
1.一种维吾尔药卡麻孜日尤司提取物，其特征为，维吾尔药卡麻孜日尤司经超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用体积比100：10-100:25为石油醚：乙酸乙酯混合溶剂洗脱，继用体积比100:17-100：100的石油醚：乙酸乙酯混合溶剂洗脱，石油醚：乙酸乙酯100:17-100：100洗脱液干燥后即得。2.如权利要求1所述的维吾尔药卡麻孜日尤司提取物，其特征为，先用体积比100：10-100:14的石油醚：乙酸乙酯混合溶剂洗脱，继用体积比100:17的石油醚：乙酸乙酯混合溶剂洗脱；或先用体积比100：20-100:25的石油醚：乙酸乙酯混合溶剂洗脱，继用体积比100：30-100:100的石油醚：乙酸乙酯混合溶剂洗脱；优选地：先用体积比100:14的石油醚：乙酸乙酯混合溶剂洗脱，继用体积比100:17的石油醚：乙酸乙酯混合溶剂洗脱，石油醚：乙酸乙酯100:17洗脱液经回收溶剂干燥后，即为该活性提取物；或先用体积比100:25的石油醚：乙酸乙酯混合溶剂洗脱，继用体积比100:100石油醚：乙酸乙酯混合溶剂洗脱，石油醚：乙酸乙酯100:100洗脱液经回收溶剂干燥后，即为该活性提取物。3.如权利要求1-2任何一项所述的维吾尔药卡麻孜日尤司提取物，其特征为，提取用溶剂为甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶剂或乙醇水混合溶剂，优选甲醇或95%乙醇，...
【专利技术属性】
技术研发人员：王金辉，黄健，吴文熙，
申请(专利权)人：沈阳药科大学，
类型：发明
国别省市：辽宁;21
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