本发明专利技术涉及一种具有杀菌同时提高动物营养吸收能力的水产饲料添加剂,所述的饲料添加剂中有能够杀菌同时提高水产动物营养吸收的多肽,其通过蛋白质库筛选获得的。该多肽可以采用常规的表达进行批量的制备,从而用于饲料中去,其具有防止多种细菌的生长的效果,特别是针对水产鱼类的疾病,具有较好的效果,该添加剂制备简单,使用方便,成本低廉,可以大批量的用于水产动物的饲料中去。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及饲料领域,具体的涉及一种水产养殖用的含多肽的饲料添加剂。
技术介绍
我国是目前世界最大的水产品养殖国,水产养殖占全世界养殖总量和70%左右,而为提高水产动物的抗病性和生长率,在养殖过程中通常使用一定剂量的抗生素等,从而产生的细菌耐药性,水产品食品安全,生态安全等系列问题,使得养殖环境进入恶性循环,养殖效益下降。抗菌肽(antibacterialpeptides,ABP)是生物免疫防御系统在受到外界刺激时产生的一类具有生物活性的小分子多肽,分子量多在2000~7000Da,由20~60个氨基酸残基组成,是生物体天然免疫防御系统的重要组成部分。乞今为止,已在许多生物包括昆虫、鸟类、动物、植物及原核生物中发现2500多种抗菌肽。抗菌肽具有强碱性、热稳定性以及广谱杀菌、抗菌等特点,对生物的天然免疫起关键作用,作用机理独特,不仅能杀死革兰氏阳性及阴性菌,还具有抗真菌、病毒、原虫及抑制癌细胞的活性。对耐药菌株有明显的杀伤作用,同时对生物体的正常细胞无害,提高动物免疫力等特点,具有广阔的发展前景。作为一种新型饲料添加剂,其在水产养殖业的应用受到了普遍关注。与抗生素相比,具有无污染、无毒副作用、不产生耐药性等优点,符合绿色环保饲料的要求,是理想的抗生素替代品因此,现有技术还有待于改进和发展。活性肽是一类由多个氨基酸组成,构象较松散的具有多种生物功效的肽类,这些肽类包括由体内的内分泌腺分泌的多肽激素,由血液或组织中的蛋白质经专一的蛋白酶分解而产生的组织激肽等。这些活性肽在动物饲料中可以产生许多非常有益的生理功效,诸如外啡肽可以使肠胃消化系统中的不同部位有不同的作用,如加大胃门开放,加快胃空时间,减慢肠的蠕动等,这些功能具有减低小肠的蠕动而加强对饲料营养的吸收作用,免疫调节肽可提高动物免疫机能,促进生长,提高重量及饲料转化率;抗菌多肽可增强对有害菌的抑制、有益菌的增殖。以前,人们认为动物机体对蛋白质的吸收只能以游离氨基酸的形式进行,但近几十年的研究表明,不同来源的饲料在氨基酸利用率上存在差异。动物营养学家发现,动物对饲料中各种氨基酸的利用程度并不完全受单一限制性氨基酸的影响,当动物喂以按理想氨基酸模式配制的纯合日粮或低蛋白质氨基酸平衡日粮时,也不能获得最佳的生产性能。因此,一些学者提出了动物对完整蛋白质本身或对肽有着特殊需要的观点,近年来研究证实,蛋白质在动物消化道中消化酶作用下的水解终产物大部分是二或三个氨基酸残基组成的小肽,它们以完整的形式被吸收进入循环系统而被组织利用。同时蛋白质水解产生的某些肽具有免疫调节、抗菌、促进矿质元素(钙、铁、锌、铜)的被动转运过程及在体内的储存、抗过敏性等生理活性。活性多肽在养殖业中使用可加强对氨基酸及其它营养素的均衡吸收,显著提高动物对钙、铁、镁、锌等矿物质元素的利用率,促进动物营养性康复,提高机体免疫力,提高生产性能,对动物幼苗成活率明显提高。现有技术中还没有出现既能够起到杀菌功能又能够起到活性多肽功能的多肽类添加剂,一种多肽具有双重功能,在饲料中只需要添加一种多肽即可,既能够节约成本,又能够具有较好的社会效益。
技术实现思路
鉴于上述现有技术的不足,本专利技术的目的在于提供一种基于抗菌肽制备的水产饲料,旨在解决目前水产养殖过程中传统饲料带来的水产生物免疫力下降、药物残留、微生态失衡等问题,同时还能够提高水生动物的营养吸收水平,一举多得。本专利技术的目的可通过如下措施来实现:一种水产养殖用多肽水产饲料,是由下述重量百分含量的原料按公知水产饲料加工工艺制成:抗菌蛋白活性多肽0.5%、豆柏40%、麸皮25%、葵仁柏8%、鱼粉14%、磷酸二氢钠1.5%,磷酸二氢钙1.5%,硫酸钠0.5%,余量为面粉。本专利技术另外提供一种抗菌蛋白活性多肽,所述的多肽是申请人通过前期高通量蛋白库特异性筛选获得的16种具有杀菌活性的多肽,所述多肽不仅具有杀菌效果,还能够增加水产动物的营养吸收水平。所述的多肽序列如下:GXSJ-1:WSPMYPCQLHVSMFCRVFGXSJ-2:IEPWELAVTHRWFTKKSKGXSJ-3:ANWPYHRQHVRLMDWRGRGXSJ-4:SVFDCCNVMMKSHSHHRPGXSJ-5:YEDANQLDSCQNALWYIEGXSJ-6:PHQRVASWSHHPYPHWTGGXSJ-7:LPGSPHFWWGNSNQDFTGXSJ-8:RQFFGNCRSQHWRVRRCGXSJ-9:WGYGISGKGDEMTLPKGGXSJ-10:KGSKPQREGLCWTSVGMGXSJ-11:FCYGSQIYIDCMQGNSKGXSJ-12:RVHSVDIQSFGVCYTEDGXSJ-13:CFSMGYLNHYTQDRMCGXSJ-14:ATHMWRTIPKNWDGDAGXSJ-15:RMPSRMKPRCHFQDMVGXSJ-16:PTPGLCRNRHSRQQEV本专利技术相比现有技术具有如下优点:本专利技术在水产饲料中添加抗菌蛋白活性多肽,所述多肽不仅具有杀菌效果,还能够增加水产动物的营养吸收水平。使用该饲料不具有使得水产动物减少疾病的发生,还能够加快水产动物的培养速度,一举多得。具体实施方式实施例1多肽饲料的制备将SEQ ID No:1所示的抗菌蛋白活性多肽0.5%、豆柏40%、麸皮25%、葵仁柏8%、鱼粉14%、磷酸二氢钙1.5%、余量为面粉的原料经去杂清理、粗粉碎,通过40-60目筛后进行一次混合,得原料粗混料待用;(2)将上述原料粗混料进行超微粉碎,超微粉碎通过80-100目筛;(3)将步骤(2)获得的混合料均匀加入30%w/w水进行调质后,移入双螺杆挤压膨化机进行挤压膨化工序,螺杆转速为60r/min,喂料速度35r/min,机筒温度的进料段控制在80℃,中间段控制在105℃,出料段控制在125℃,通过双螺杆挤压膨化机制成膨化颗粒饲料;(4)将步骤(3)获得膨化颗粒饲料置于干燥箱中后熟化干燥,干燥箱内温度控制为55℃,干燥时间为4小时;(5)对步骤(4)获得干燥后膨化颗粒饲料膨化饲料进行油脂外涂,油脂外涂采用喷入.2.3%的菜油,使油脂均匀地喷在膨化饲料上,喷涂温度控制为65℃;(6)将油脂外涂后的膨化饲料经冷却、分级、筛分、包装,得到水产饲料成品。实施例2其余种类的多肽饲料的制备将SEQ ID No:2-16的蛋白活性多肽按照实施例1的制备方法,分别制备得到15种相应的饲料成品。其中以不加入蛋白活性多肽的实施例1的饲料作为对照。实施例3多肽活性检测取-20℃冻存的ATCC25923(金黄色葡萄球菌),ATCC25922(大肠埃希氏菌),温和气单胞菌(ATCC 43979)、、副溶血弧菌(CICC 10552),在LB平板上三线法划线,37℃过夜培养,次日挑取单菌落,接种于含5mL LB液体培养基的试管,180rpm,37℃过夜震荡培养。涂板计数,稀释菌液至终浓度为5X 105CFU/mL。SEQ ID No:1-16的多肽可以采用本领域常规的原核表达方式表达并批量获得。将制备的诱导表达获得的上清抗菌活性蛋白肽,经过柱纯化,统一蛋白为100mg/mL。分别将5、25、50、500、5000μg不同浓度蛋白与500uL稀释后浓度为105CFU/mL的菌液充分混合本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种水产饲料添加剂,其特征在于:该添加剂用于饲料中可以防止疾病,同时还能够增加水产动物的营养吸收水平。
【技术特征摘要】
1.一种水产饲料添加剂,其特征在于:该添加剂用于饲料中可以防止疾病,同时还能够增加水产动物的营养吸收水平。2.如权利要求1所述的水产添加剂,其为多肽,氨基酸序列如SEQ ID N...
【专利技术属性】
技术研发人员:卢美珍,
申请(专利权)人:卢美珍,
类型:发明
国别省市:江西;36
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