一种中药饮片中玉米赤霉烯酮的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种中药饮片中玉米赤霉烯酮的检测方法，包括粉碎、碱浸、清洗、提取、高效液相色谱检测步骤。与现有技术相比，本发明专利技术具有以下优点：(1)本发明专利技术所述方法通过对中药饮片进行预处理，使得真菌壁得到破碎，从而提高检测的准确性；(2)本发明专利技术所述方法检测黄曲霉毒素效率高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分析化学领域，涉及一种真菌毒素检测方法，尤其涉及一种中药饮片中玉米赤霉烯酮的检测方法。
技术介绍
真菌毒素是真菌产生的有毒次生代谢产物，种类繁多，广泛污染农作物、食品及饲料等，严重威胁着人类健康，已经引起了全球的广泛关注。玉米赤霉烯酮(zearalenone，简称ZEA)又称F2毒素，主要由镰刀菌产生，是一种雌激素真菌毒素，广泛存在于霉变的玉米、高粱等谷类作物以及奶类制品中，主要作用于生殖系统，具有较强的生殖毒性和致畸作用，能导致动物不孕或流产。中药及其相关产品种类繁多，药材种植地区广泛，在生产、加工、运输、贮存过程中，很容易发生霉变而污染各种真菌，产生对人体有害的真菌毒素，中药真菌毒素污染问题也引起了业内人士的重视。2001年，中华人民共和国商务部公布了《药用植物及制剂外经贸绿色行业标准》，规定黄曲霉毒素B1限量应小于等于5μg/kg。《中国药典》2010年版一部收录了中药中黄曲霉毒素B1，B2，G1，G2的高效液相色谱荧光检测方法，对桃仁、胖大海、陈皮等中药规定了AFB1最高限量为5μg/kg，AF(B1+B2+G1+G2)最高限量为10μg/kg。因此，无论从保障中药及其相关产品的安全性，还是中药进出口的管理方面，均有必要建立一个真菌毒素多残留污染检测的技术平台，进一步完善中药及其产品的质量管理规范。但是，仅仅检测黄曲霉毒素的含量，而对其他毒素未有具体的限量规定是不够全面的。无论从保障中药及其相关产品的安全性，还是中药进出口的管理方面，均有必要建立一个真菌毒素多残留污染检测的技术平台，进一步完善中药及其产品的质量管理规范。现有技术中检测的玉米赤霉烯酮的方法较多，但是存在以下不足：在检测过程中由于易受其他毒素的干扰，因此检测结果不准确；此外，检测流程较复杂，延长了检测时间，提高了检测成本。
技术实现思路
本专利技术解决的技术问题是：为了克服上述现有技术的缺陷，获得一种检测结果准确，检测流程简单，检测成本较低的方法，本专利技术提供了一种中药饮片中玉米赤霉烯酮的检测方法。技术方案：一种中药饮片中玉米赤霉烯酮的检测方法，包含以下步骤：(1)将中药饮片加入粉碎机中，功率为1.2～1.8kW/h、转速为2500～3200转/分钟、每小时投入饮片量为2～5kg，粉碎研磨至粉状，粉末粒径为200～400目；(2)将步骤(1)获得的粉末置于质量浓度为0.5％～2.5％的碳酸钠中浸润0.5～3小时，用蒸馏水冲洗至中性，并置于烘箱中在58～75℃条件下烘干；(3)将步骤(2)烘干后的粉末用质量浓度34～56％甲醇提取，提取液振荡13～28分钟，在4℃、6000～8000转/分钟条件下离心5～10分钟，取上清液；(4)采用高效液相色谱检测步骤(3)中的上清液，流动相为3～5mol/L的甲酸铵与0.2～0.4％的甲酸按体积比1～5:3混合，流速为0.3～0.8mL/min，柱温为25～28℃，样品温度为4～8℃，进样体积为5～10μL。优选的，步骤(1)中将中药饮片加入粉碎机中，功率为1.6kW/h、转速为2900转/分钟、每小时投入饮片量为4kg，粉碎研磨至粉状，粉末粒径为350目。优选的，其特征在于，步骤(2)中将步骤(1)获得的粉末置于质量浓度为1.8％的碳酸钠中浸润2.4小时，用蒸馏水冲洗至中性，并置于烘箱中在66℃条件下烘干。优选的，其特征在于，步骤(3)中将步骤(2)烘干后的粉末用质量浓度46％甲醇提取，提取液振荡24分钟，在4℃、7200转/分钟条件下离心7分钟，取上清液。优选的，其特征在于，步骤(4)中采用高效液相色谱检测步骤(3)中的上清液，流动相为4.2mol/L的甲酸铵与0.3％的甲酸按体积比4:3混合，流速为0.7mL/min，柱温为26℃，样品温度为5℃，进样体积为6μL。有益效果：(1)本专利技术所述检测方法通过碱洗过程排除了其他毒素对玉米赤霉烯酮检测的干扰，提高了其检测准确度；(2)本专利技术所述检测方法检测流程简单，耗时较短，检测成本较低。具体实施方式实施例1一种中药饮片中玉米赤霉烯酮的检测方法，包含以下步骤：(1)将中药饮片加入粉碎机中，功率为1.2kW/h、转速为2500转/分钟、每小时投入饮片量为2kg，粉碎研磨至粉状，粉末粒径为200目；(2)将步骤(1)获得的粉末置于质量浓度为0.5％的碳酸钠中浸润0.5小时，用蒸馏水冲洗至中性，并置于烘箱中在58℃条件下烘干；(3)将步骤(2)烘干后的粉末用质量浓度34％甲醇提取，提取液振荡13分钟，在4℃、6000转/分钟条件下离心5分钟，取上清液；(4)采用高效液相色谱检测步骤(3)中的上清液，流动相为3mol/L的甲酸铵与0.2％的甲酸按体积比1:3混合，流速为0.3mL/min，柱温为25℃，样品温度为4℃，进样体积为5μL。实施例2一种中药饮片中玉米赤霉烯酮的检测方法，包含以下步骤：(1)将中药饮片加入粉碎机中，功率为1.6kW/h、转速为2900转/分钟、每小时投入饮片量为4kg，粉碎研磨至粉状，粉末粒径为350目；(2)将步骤(1)获得的粉末置于质量浓度为1.8％的碳酸钠中浸润2.4小时，用蒸馏水冲洗至中性，并置于烘箱中在66℃条件下烘干；(3)将步骤(2)烘干后的粉末用质量浓度46％甲醇提取，提取液振荡24分钟，在4℃、7200转/分钟条件下离心7分钟，取上清液；(4)采用高效液相色谱检测步骤(3)中的上清液，流动相为4.2mol/L的甲酸铵与0.3％的甲酸按体积比4:3混合，流速为0.7mL/min，柱温为26℃，样品温度为5℃，进样体积为6μL。实施例3一种中药饮片中玉米赤霉烯酮的检测方法，包含以下步骤：(1)将中药饮片加入粉碎机中，功率为1.8kW/h、转速为3200转/分钟、每小时投入饮片量为5kg，粉碎研磨至粉状，粉末粒径为400目；(2)将步骤(1)获得的粉末置于质量浓度为2.5％的碳酸钠中浸润3小时，用蒸馏水冲洗至中性，并置于烘箱中在75℃条件下烘干；(3)将步骤(2)烘干后的粉末用质量浓度56％甲醇提取，提取液振荡28分钟，在4℃、8000转/分钟条件下离心10分钟，取上清液；(4)采用高效液相色谱检测步骤(3)中的上清液，流动相为5mol/L的甲酸铵与0.4％的甲酸按体积比5:3混合，流速为0.8mL/min，柱温为28℃，样品温度为8℃，进样体积为10μL。采用上述实施例1～3所述的检测方法对中药饮片中的玉米赤霉烯酮进行检测，结果如下表所示：本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种中药饮片中玉米赤霉烯酮的检测方法，其特征在于，包含以下步骤：(1)将中药饮片加入粉碎机中，功率为1.2～1.8kW/h、转速为2500～3200转/分钟、每小时投入饮片量为2～5kg，粉碎研磨至粉状，粉末粒径为200～400目；(2)将步骤(1)获得的粉末置于质量浓度为0.5％～2.5％的碳酸钠中浸润0.5～3小时，用蒸馏水冲洗至中性，并置于烘箱中在58～75℃条件下烘干；(3)将步骤(2)烘干后的粉末用质量浓度34～56％甲醇提取，提取液振荡13～28分钟，在4℃、6000～8000转/分钟条件下离心5～10分钟，取上清液；(4)采用高效液相色谱检测步骤(3)中的上清液，流动相为3～5mol/L的甲酸铵与0.2～0.4％的甲酸按体积比1～5:3混合，流速为0.3～0.8mL/min，柱温为25～28℃，样品温度为4～8℃，进样体积为5～10μL。

【技术特征摘要】
1.一种中药饮片中玉米赤霉烯酮的检测方法，其特征在于，包含以下步骤：(1)将中药饮片加入粉碎机中，功率为1.2～1.8kW/h、转速为2500～3200转/分钟、每小时投入饮片量为2～5kg，粉碎研磨至粉状，粉末粒径为200～400目；(2)将步骤(1)获得的粉末置于质量浓度为0.5％～2.5％的碳酸钠中浸润0.5～3小时，用蒸馏水冲洗至中性，并置于烘箱中在58～75℃条件下烘干；(3)将步骤(2)烘干后的粉末用质量浓度34～56％甲醇提取，提取液振荡13～28分钟，在4℃、6000～8000转/分钟条件下离心5～10分钟，取上清液；(4)采用高效液相色谱检测步骤(3)中的上清液，流动相为3～5mol/L的甲酸铵与0.2～0.4％的甲酸按体积比1～5:3混合，流速为0.3～0.8mL/min，柱温为25～28℃，样品温度为4～8℃，进样体积为5～10μL。2.根据权利要求1所述的一种中药饮片中玉米赤霉烯酮的检测方法，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：李建华，
申请(专利权)人：苏州市天灵中药饮片有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32