液相色谱用填充剂及液相色谱用柱制造技术

本发明专利技术的课题在于提供耐久性优异的液相色谱用填充剂及填充了该填充剂的液相色谱用柱。作为解决方法，提供一种液相色谱用填充剂，其特征在于，在含有聚乙烯醇树脂的亲水性的树脂上经由间隔基键合有式(1)(R1表示氢原子、或碳原子数1～4的烷基，R2表示具有1个以上羟基的碳原子数1～6的烷基。※表示与间隔基的键合位置。)表示的氨基。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及耐久性优异的液相色谱用填充剂及填充有该填充剂的液相色谱用柱。
技术介绍
糖类在食品中等含有较多，其分析在食品产业等中极为重要。而且，其分析中广泛使用液相色谱。利用液相色谱进行的糖类的分析中，主要使用配体交换柱、亲水性相互作用柱。在使用了配体交换柱的分析中，为了抑制端基差向异构体分离，需要在高温条件下进行分析。例如，在日本特开昭61－71354号公报(专利文献1)中，公开了以使用了银及碱(土)金属离子作为磺酸基的抗衡离子的离子交换树脂粒子作为填充剂的柱。在该专利文献1中，在柱温60℃的条件下进行分离。但是，在该高温下，在填充剂上离子键合的金属离子易于脱离，存在填充剂经时变化的问题。在使用了亲水性相互作用柱的情况下，存在使用了由聚丙烯酰胺树脂形成的填充剂的柱(例如日本特开2006－137944号公报：专利文献2)。但是，与配体交换柱同样地，为了抑制端基差向异构体分离，需要为高温条件。另一方面，如果使用利用了键合有氨基的填充剂的柱(以下称为氨基柱)，则利用氨基的碱性能够抑制端基差向异构体分离，不需要为高温条件，因此氨基柱在糖分析中被广泛应用。(J.C.Linden et al.J.Chromatogr.A 105(1975)125－133)但是，大部分氨基柱在基材中使用硅胶，键合有氨基的硅胶的稳定性差，柱的耐久性方面存在问题。作为使其键合有氨基、且具有化学稳定性的材料，有使用有机高分子载体的材料。作为在有机高分子载体上键合有氨基的材料，在聚丙烯酸酯系树脂、苯乙烯‐二乙烯基苯共聚物树脂上键合有N‐甲基‐D‐葡糖胺的化合物被用作金属、硼的吸附材料。(J.Sanchez et al.J.APPL POLY.SCI.129(2013)1541－1545、J.Sanchez et al.J.APPL POLY.SCI.126(2012)1475－1483)但是，如果将使用了聚丙烯酸酯系树脂、苯乙烯‐二乙烯基苯共聚物树脂的材料应用于氨基柱，则存在亲水性低、糖类的分离不充分这样的问题。现有技术文献专利文献专利文献1:日本特开昭61－71354号公报专利文献2:日本特开2006－137944号公报非专利文献非专利文献1:J.Sanchez et al.J.APPL POLY.SCI.129(2013)1541－1545非专利文献2:J.Sanchez et al.J.APPL POLY.SCI.126(2012)1475－1483
技术实现思路
专利技术所要解决的课题本专利技术的目的在于提供耐久性优异、即使反复进行分析也不发生经时变化的适于氨基柱的填充剂。用于解决课题的方法本申请的专利技术人们为了实现上述课题反复进行了研究，由此发现，通过使用将含有聚乙烯醇树脂的亲水性的树脂作为基材、并导入有特定的氨基的填充剂，能够改善氨基柱的耐久性，从而完成了本专利技术。即本专利技术涉及以下事项。[1]一种液相色谱用填充剂，其特征在于，在含有聚乙烯醇树脂的亲水性的树脂上经由间隔基(spacer)键合有式(1)所示的氨基。式(1)；(R1表示氢原子、或碳原子数1～4的烷基，R2表示具有1个以上羟基的碳原子数1～6的烷基。※表示与间隔基的键合位置。)[2]根据[1]的液相色谱用填充剂，其中，R1为氢原子或甲基。[3]根据[1]或[2]的液相色谱用填充剂，其中，R2为式(2)所示的结构。式(2)；(式中，n表示0～4的整数)[4]根据[1]的液相色谱用填充剂，其中，式(1)所示的氨基来源于由D‐葡糖胺、N‐甲基‐D‐葡糖胺、1‐氨基‐1‐脱氧‐D‐甘露糖醇、1‐氨基‐1‐脱氧‐D‐半乳糖醇、1‐氨基‐1‐脱氧‐D‐艾杜糖醇、1‐氨基‐1‐脱氧‐D‐阿糖醇、1‐氨基‐1‐脱氧‐D‐木糖醇、4‐氨基‐1,2,3‐丁三醇、3‐氨基‐1,2‐丙二醇、3‐甲基氨基‐1,2‐丙二醇组成的组中的任一种胺。[5]根据[1]的液相色谱用填充剂，其中，间隔基来源于末端具有缩水甘油基的化合物。[6]一种液相色谱用柱，其使用了上述[1]～[5]的液相色谱用填充剂。[7]一种糖分析用液相色谱用柱，其使用了上述[1]～[5]的液相
色谱用填充剂。[8]一种亲水性相互作用色谱用柱，其使用了上述[1]～[5]的液相色谱用填充剂。专利技术的效果本专利技术的液相色谱用填充剂在糖类的分析中不需要高温条件，在30～50℃这样的低温下也显示优异的分离。另外，也能够对糖类以外的各种亲水性化合物进行分离。进而，具有碱耐性，与现有的氨基柱相比，在重现性、耐久性方面优异。附图说明图1表示针对实施例1的填充剂进行果糖、甘露糖、葡萄糖及蔗糖这4种糖类的分析而得的色谱图。图2表示针对实施例1的填充剂的稳定性试验结果。图3表示针对实施例2的填充剂进行4种糖类的分析而得的色谱图。图4表示针对实施例3的填充剂进行4种糖类的分析而得的色谱图。图5表示针对比较例2的填充剂进行4种糖类的分析而得的色谱图。图6表示针对实施例1的填充剂进行果糖、半乳糖、乳果糖、依匹乳糖(epilactose)、乳糖这5种糖类的分析而得的色谱图。图7表示对分析例6变更洗脱液而进行5种糖类的分析而得的色谱图。具体实施方式本专利技术的液相色谱用填充剂为在亲水性的树脂上经由间隔基键合有式(1)所示的氨基的粒子。式(1)(式中，R1表示氢原子、或碳原子数1～4的烷基，R2表示具有一个以上羟基的碳原子数1～6的烷基。※表示与间隔基的键合位置)。此时，
R1优选为氢原子或甲基。另外，R2优选为式(2)表示的羟基烷基，更优选n为4。式(2)(式中，n表示0～4的整数)另外，作为式(1)所示的氨基，优选来源于下述胺类中的任一种：D‐葡糖胺、N‐甲基‐D‐葡糖胺、1‐氨基‐1‐脱氧‐D‐甘露糖醇、1‐氨基‐1‐脱氧‐D‐半乳糖醇、1‐氨基‐1‐脱氧‐D‐艾杜糖醇、1‐氨基‐1‐脱氧‐D‐阿糖醇、1‐氨基‐1‐脱氧‐D‐木糖醇、4‐氨基‐1,2,3‐丁三醇、3‐氨基‐1,2‐丙二醇、3‐甲基氨基‐1,2‐丙二醇。这些胺类的键合于氮上的1个氢脱离，与间隔基键合。本专利技术中，是使这些胺类键合于间隔基上，但另外还可以经由间隔基将氨键合于亲水性树脂上后，使用氰基硼氢化钠将葡萄糖、甘露糖、半乳糖、木糖等醛糖键合于构成氨基的氮原子上。其中，从分离性能、反应的简便性、试剂的获得容易性的方面考虑，特别优选为使N‐甲基‐D‐葡糖胺反应而得到的氨基。经由间隔基键合有这样的氨基的填充剂在糖类的分析中不需要高温条件，即使在30～50℃这样的低温下也显示优异的分离，具有碱耐性，在重现性、耐久性方面优异。构成本专利技术中的填充剂的亲水性树脂的大小、形状没有特别限定。但是，如果考虑到本专利技术填充剂向柱内的填充，优选其形状为直径1～30μm的球状。材质优选为交联或非交联的树脂。特别优选使用具有醇羟基的树脂。作为本专利技术中使用的树脂，可优选举出通过皂化或酯交换反应将由羧酸乙烯酯和交联性单体形成的交联共聚物的酯基转化为醇羟基而得的聚乙烯醇系树脂。作为羧酸乙烯酯，例如可以举出乙酸乙烯酯、丙酸乙烯酯、丁酸乙烯酯、戊酸乙烯酯及新戊酸乙烯酯等，它们可以单独使用，也可以
组合2种以上使用。其中，由于乙酸乙烯酯及丙酸乙烯酯聚合及皂化容易，故优选。作为交联性单体，优选具有三嗪环的交联性单体，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种液相色谱用填充剂，其特征在于，在含有聚乙烯醇树脂的亲水性的树脂上经由间隔基键合有式(1)所示的氨基，式(1)；R1表示氢原子、或碳原子数1～4的烷基，R2表示具有1个以上羟基的碳原子数1～6的烷基，※表示与间隔基的键合位置。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.02.28 JP 2014-0383311.一种液相色谱用填充剂，其特征在于，在含有聚乙烯醇树脂的亲水性的树脂上经由间隔基键合有式(1)所示的氨基，式(1)；R1表示氢原子、或碳原子数1～4的烷基，R2表示具有1个以上羟基的碳原子数1～6的烷基，※表示与间隔基的键合位置。2.根据权利要求1所述的液相色谱用填充剂，其中，R1为氢原子或甲基。3.根据权利要求1或2所述的液相色谱用填充剂，其中，R2为式(2)所示的结构，式(2)；式中，n表示0～4的整数。4.根据权利要求1所述的液相色谱用填充剂，其中，式(1)所示的氨基来源于由D‐葡糖胺、N‐甲基‐D‐葡...

【专利技术属性】
技术研发人员：中岛修弥，冈田由治，近藤英幸，
申请(专利权)人：昭和电工株式会社，
类型：发明
国别省市：日本;JP