本发明专利技术公开了一种高性能的人尿液免疫球蛋白G检测试剂盒。本发明专利技术的试剂盒，包括试剂2，所述试剂2为标记有兔抗人免疫球蛋白G多克隆抗体的胶乳颗粒溶液；其中，所述胶乳颗粒粒径范围为130nm～300nm，每升试剂2中抗体的用量为10ml～20ml。本发明专利技术可替代进口试剂，节约病患开支；同时能够提高检测效率。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及的是生物
，具体涉及的是一种高性能的人尿液免疫球蛋白G检测试剂盒。
技术介绍
IgG分子由两条轻链(κ或λ)和两条γ重链组成。大约80％的血清免疫球蛋白为IgG；其主要作用是防御微生物、直接中和毒素以及诱导补体结合。IgG是唯一能够穿越胎盘屏障，为胎儿和新生儿提供被动免疫保护的免疫球蛋白。这种母体保护逐渐减少，直到婴儿自身的免疫系统开始发育(在大约6个月时)。在18个月时血清/血浆中的免疫系统接近成人水平。IgG是血液中主要的免疫球蛋白,多数以单体形式存在。主要由脾脏和淋巴结合成,不经肾小球滤过,故正常人尿中含量极低。尿中IgG升高,与肾小球破坏程度正相关。贫血、高血压、糖尿病、甲亢和妊娠后期等，肾血流量增加使小球内滤过压梯度增高，IgG等在压力增高的驱动下克服滤过膜阻力滤出增加。感染、肾中毒、血管病变和免疫损伤均可使滤过膜孔径增大。单纯的孔径增大时，以NAG、IgG滤出增多为主，ALb、TRY排出率增加不明显，sI值升高，形成非选择性蛋白尿。当滤过膜损IgG排出率梯度增加，尿中其含量变化可作为滤过膜损伤程度的标志蛋白。测定尿液中的IgG以及尿白蛋白，可区分选择性和非选择性肾小管蛋白尿，因为IgG仅在非选择性肾小球蛋白尿(IgG/白蛋白>0.03mg/mg)时显著增加。此外，尿液中IgG的测量可用于监测和评估肾小球蛋白尿、特发性膜性肾病、小儿紫癜性肾炎(HSPN)、糖尿病、高血压、狼疮性肾炎和小儿急性肾小球肾炎。故而急需开发一种能够检测人尿液
免疫球蛋白G检测试剂盒。
技术实现思路
为了改善上述存在问题，本专利技术提供了一种高性能的人尿液免疫球蛋白G检测试剂盒。为了实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：一种高性能的人尿液免疫球蛋白G检测试剂盒，包括试剂2，所述试剂2为标记有兔抗人免疫球蛋白G多克隆抗体的胶乳颗粒溶液。其中，试剂1选用常规的磷酸盐缓冲液、Good’s缓冲液或甘氨酸缓冲液即可。值得说明的是，本专利技术是针对试剂盒中的试剂2进行改进，然而试剂1选用市面上的常用试剂均可。本专利技术的胶乳颗粒粒径范围为130nm～300nm，每升试剂2中抗体的用量为10ml～20ml。具体地，本专利技术是采用化学偶联方法将兔抗人免疫球蛋白G多克隆抗体标记在胶乳颗粒上。作为一种优选，所述试剂盒对样本进行检测时，样本与抗体的体积比为1:1.6～1：8。所述试剂盒是基于胶乳免疫比浊法检测人尿液免疫球蛋白G，其线性范围为1.00㎎/L～80.00㎎/L，抗原过剩范围达到13000㎎/L。具体地，所述兔抗人免疫球蛋白G多克隆抗体为Dako公司生产的兔抗人免疫球蛋白G多克隆抗体。另外，所述试剂盒适用于具有自动样本稀释功能的全自动分析仪器，如迪瑞、迈瑞、Roche、Hitachi、Olympus等多种全自动生化分析仪。本专利技术具有以下优点及有益效果：1、使用本专利技术的试剂盒对人尿液中的免疫球蛋白G进行测定，因线性范围较进口试剂提高33％，使用时大幅度减少了需要人工稀释复测的样本数量，大幅度节约了人力和试剂，极大地提高了检测效率，并节约了成本。2、本专利技术的试剂盒抗原过剩范围广，有效避免了临床结果被低估甚至假阴性结果的出现，测定结果可靠性相比进口试剂更高。3、本专利技术采用成熟的化学偶联胶乳标记方法，能够规模化生产，且能够配套市面上绝大多数自动化分析仪器使用，便于推广使用。4、采用本专利技术的试剂盒进行检测，可替代进口试剂，节约病患开支。附图说明图1为本专利技术-实施例1的线性稀释图。图2为本专利技术-实施例2的线性稀释图。图3为本专利技术-实施例3的线性稀释图。图4为本专利技术-实施例4的线性稀释图。图5为本专利技术-实施例5的线性稀释图。图6为本专利技术-实施例6的线性稀释图。图7为本专利技术-实施例7的线性稀释图。图8为本专利技术-实施例8的线性稀释图。图9为本专利技术-实施例9的线性稀释图。图10为本专利技术-实施例10的线性稀释图。图11为本专利技术-实施例11的线性稀释图。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术作进一步说明，但本专利技术的实施方式不限于下列实施例。实施例1本实施例的胶乳颗粒粒径为200nm，每升试剂2标记16ml Dako公司生产的兔抗人免疫球蛋白G多克隆抗体，使用胶乳免疫比浊中最常规的磷酸盐缓冲液作为试剂1，采用自动分析仪最常见参数试剂1：试剂2比例240μl：80μl，样本预先稀释15倍后加入8μl稀释过的样本到反应体系中(即样本与抗体比例为1:2.4)。使用Hitachi7170全自动生化分析仪，波长为600nm单波长，两点终点法18-34读点计算，数据如下：表1校准数据表2线性稀释具体如图1所示，图中方程为线性回归方程，R2为线性系数，估计值根据稀释比例带入回归方程计算，R＞0.99，估计值和实测值0～8之间的绝对偏差＜0.5,8～80之间的相对偏差＜10％，则说明线性合格。表3检测下限表4抗原过剩验证理论值㎎/L实测值㎎/L备注13.0513.25线性范围内26.126.53线性范围内52.253.10线性范围内104.496.86超线性208.79189.52超线性417.58266.85超线性835.17202.18超线性1670.33178.71超线性3340.66166.85超线性6681.31134.21超线性8908.42108.22超线性11135.5297.37超线性13362.6289.45超线性从表1～4可以看出，本实施例的UIgG试剂，在1.00㎎/L～80.00㎎/L内满足线性稀释实测值与估计值偏差＜10％，且检测下限也能达到1.00㎎/L(精密度CV＜20％)，符合国家相关法规要求，证明线性范围达到1.00㎎/L～80.00㎎/L；另外，从抗原过剩验证可以看出，实际抗原过剩范围高于13000㎎/L，满足抗原过剩范围达到13000㎎/L的要求。实施例2本实施例的胶乳颗粒粒径为130nm，每升试剂2标记10ml Dako公司生产的兔抗人免疫球蛋白G多克隆抗体，使用胶乳免疫比浊中最常规的磷酸盐缓冲液作为试剂1，采用自动分析仪最常见参数试剂1：试剂2比例240μl：80μl，样本预先稀释20倍后加入10μl稀释过的样本到反应体系中(即样本与抗体比
例为1:1.6)。使用Hitachi7170全自动生化分析仪，波长为600nm单波长，两点终点法18-34读点计算，数据如下。表5校准数据表6线性稀释具体如图2所示，图中方程为线性回归方程，R2为线性系数，估计值根据稀释比例带入回归方程计算，R＞0.99，估计值和实测值0～8之间的绝对偏差＜0.5,8～80之间的相对偏差＜10％，则说明线性合格。表7检测下限浓度㎎/L1.002.003.004.005.00精密度CV19.82％16.34％10.45％6.26％4.17％合格范围＜20％＜20％＜20％＜20％＜20％表8抗原过剩验证从表5～8可以看出，实施例2的UIgG试剂，在1.00㎎/L～80.00㎎/L内满足线性稀释实测值与估计值偏差＜10％，且检测下限也能达到1.00㎎/L(精密度CV＜20％)，符合国家相关法规要求，证明线性范围达到1.00㎎/L～80.00㎎/L；另外，从抗原过剩验证可以看出，实际抗本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种高性能的人尿液免疫球蛋白G检测试剂盒，包括试剂2，其特征在于：所述试剂2为标记有兔抗人免疫球蛋白G多克隆抗体的胶乳颗粒溶液；其中，所述胶乳颗粒粒径范围为130nm～300nm，每升试剂2中抗体的用量为10ml～20ml。
【技术特征摘要】
1. 一种高性能的人尿液免疫球蛋白G检测试剂盒，包括试剂2，其特征在于：所述试剂2为标记有兔抗人免疫球蛋白G多克隆抗体的胶乳颗粒溶液；其中，所述胶乳颗粒粒径范围为130nm～300nm，每升试剂2中抗体的用量为10ml～20ml。2. 根据权利要求1所述的一种高性能的人尿液免疫球蛋白G检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒对样本进行检测时，样本与抗体的体积比为1:1.6～1：8。3. 根据权利要求1或2所述的一种高性能的人尿液免疫球蛋白G检测试剂盒，其特征在于，采用化学偶联方法将兔抗人免疫球蛋白G多克隆抗体标记在胶乳颗粒上。4. 根据权利要求1或2所述的一种高性能的人尿液免疫球蛋白G检测试剂盒，其特征在...
【专利技术属性】
技术研发人员：唐向珍，王延辉，段茂华，
申请(专利权)人：柏荣诊断产品上海有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31
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