一种直肠癌高危风险评估试剂盒制造技术

本实用新型专利技术公开了一种直肠癌高危风险评估试剂盒，属于诊断试剂领域。一种直肠癌高危风险评估试剂盒，由盒体、试剂固定件、内源性过氧化物酶阻断剂、第一抗体、第二抗体、PBS缓冲液，DAB显色液和反应终止液组成。本实用新型专利技术的优点是：本实用新型专利技术能检测与直肠癌的肿瘤细胞淋巴转移相关的血管内皮生长因子的表达情况，从而对直肠癌高危风险性做出有效评估。

【技术实现步骤摘要】

本技术涉及一种直肠癌高危风险评估试剂盒，属于诊断试剂领域。
技术介绍
直肠癌是常见的恶性肿瘤之一，发病率呈逐年上升趋势，人群中约有20％的个体为直肠癌的高危人群，有直肠癌的各种危险因素。血管内皮生长因子(VEGF-C)是直肠癌的分子标志物之一。应用免疫组织化学染色方法,检测VEGF-C在人结直肠癌组织中的表达情况,同时对伴与不伴有淋巴结转移的结直肠癌VEGF-C表达的差异进行统计学分析。结果发现VEGF-C在结直肠癌组织中的阳性表达率为44.7％,其中有淋巴结转移的表达率为60.0％,无淋巴结转移的表达率为17.7％，二者差异有统计学意义。说明直肠癌可表达VEGF-C,并与肿瘤细胞淋巴转移有关。众做周知，癌症细胞的淋巴转移意味着高危风险，因此通过检测VEGF-C在病理标本中的表达情况，可以对直肠癌高危风险做出评估。
技术实现思路
本技术要解决的技术问题是提供一种直肠癌高危风险评估试剂盒。为实现上述目的，本技术采用以下设计方案：一种直肠癌高危风险评估试剂盒，由盒体、试剂固定件、内源性过氧化物酶阻断剂、第一抗体、第二抗体、PBS缓冲液，DAB显色液和反应终止液(染色液)组成。所述试剂固定件为纸质固定件或高分子材质固定件，例如塑料泡沫固定件。试剂固定件上设有试剂固定位，例如孔洞或凹槽，用于固定各种试剂，便于运输和贮藏。所述内源性过氧化物酶阻断剂、第一抗体、第二抗体、PBS缓冲液，DAB显色液和反应终止液(染色液)置于试剂固定件的试剂固定位中。所述内源性过氧化物酶阻断剂为3wt％H2O2。所述第一抗体为人源抗VEGF-C单克隆抗体或鼠源抗VEGF-C单克隆抗体。所述第二抗体为辣根过氧化物酶标记的羊抗小鼠/兔IgG聚合物。所述PBS缓冲液为市售产品。所述DAB显色液为二氨基联苯胺(Diaminobenzidine)溶液。所述反应终止液为苏木精染色液。试剂盒的使用方法如下:先将制作好的石蜡切片放置于新鲜的二甲苯溶液中 浸泡15分钟x2次予以脱蜡和水化，尔后置于微波炉中抗原修复暴露位点，再滴加内源性过氧化物酶阻断剂处理组织切片，将第一抗体滴加到待测组织切片上孵育60分钟，滴加第二抗体识别连接在组织切片上的第一抗体，室温下孵育15分钟。再加入DAB显色液室温下孵育3-5分钟，聚合物上的辣根过氧化酶部分可以催化DAB显色液中的双氧水分解，使的联苯胺氧化变成联苯亚胺，使组织切片中一抗结合的抗原位点上出现黄色或棕黄色着色。用自来水冲洗后，滴加反应终止液(苏木精染色液)予以终止反应并复染、最后用PBS或自来水冲洗反蓝，最后脱水、封片、镜下观察。本技术的优点是：本技术能检测与直肠癌的肿瘤细胞淋巴转移相关的血管内皮生长因子的表达情况，通过观察其表达迁移位置及表达量的差异从而对直肠癌高危风险性做出有效评估。以下通过附图和具体实施方式详细说明本技术的技术方案，并不以此限定本技术的实施范围，凡依照本技术披露内容所进行的本领域等同替换，均属于本技术的保护范围。附图说明图1为本技术的结构示意图图2为本技术的试剂摆放位置示意图具体实施方式实施例1参照图1和图2所示，一种直肠癌高危风险评估试剂盒，由盒体1、试剂固定件2、内源性过氧化物酶阻断剂3、第一抗体4、第二抗体5、PBS缓冲液6，DAB显色液7和反应终止液8组成。内源性过氧化物酶阻断剂3为3wt％H2O2，规格为6ml/瓶x1。第一抗体4为人源抗VEGF-C单克隆抗体或鼠源抗VEGF-C单克隆抗体，规格为6ml/瓶x1。第二抗体5为酶标羊抗小鼠/兔IgG聚合物，规格为6ml/瓶x1。所述PBS缓冲液6，规格为12ml/瓶x1。所述DAB显色液7为二氨基联苯胺溶液，规格为1ml/瓶x1。所述反应终止液8为苏木精染色液，规格为6ml/瓶x1。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种直肠癌高危风险评估试剂盒，其特征在于：由盒体、试剂固定件、内源性过氧化物酶阻断剂、第一抗体、第二抗体、PBS缓冲液，DAB显色液和反应终止液组成；所述试剂固定件为纸质固定件或高分子材质固定件，所述试剂固定件上设有试剂固定位，所述内源性过氧化物酶阻断剂、第一抗体、第二抗体、PBS缓冲液，DAB显色液和反应终止液置于试剂固定件的试剂固定位中。

【技术特征摘要】
1.一种直肠癌高危风险评估试剂盒，其特征在于：由盒体、试剂固定件、内源性过氧化物酶阻断剂、第一抗体、第二抗体、PBS缓冲液，DAB显色液和反应终止液组成；所述试剂固定件为纸质固定件或高分子材质固定件，所述试剂固定件上设有试剂固定位，所述内源性过氧化物酶阻断剂、第一抗体、第二抗体、PBS缓冲液，DAB显色液和反应终止液置于试剂固定件的试剂固定位中。2.根据权利要求1所述的一种直肠癌高危风险评估试剂盒，其特征在于：所述内源性过氧化物酶阻断剂为3wt％H2O2。3.根据权利要求1所述的一种直肠癌高危风险评估试剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨武，尚建平，宁义刚，
申请(专利权)人：天津瑞华生物科技有限公司，
类型：新型
国别省市：天津;12