公开了具有改进的稳定性的器官和组织保存溶液。该溶液包括两种单独的溶液。第一溶液，溶液A，包括平衡盐溶液，其在为7.0或更高的pH下的溶液中是稳定的。第二溶液，溶液B，包括水性溶液，所述水性溶液含有L‑谷胱甘肽和/或半胱氨酰甘氨酸，诸如D‑葡萄糖的糖，L‑精氨酸，诸如抗坏血酸的还原剂和水，溶液B的pH低于7.0，优选为从约3.0至5.0。然后在使用时将这两种溶液混合在一起，并将pH调节至约7.3，得到具有改善的稳定性的器官和组织保存溶液。优选地，溶液A具有为约7.6的pH以及溶液B具有为约5.0的pH。本发明专利技术还包括试剂盒20，其包括在两个单独的容器22，24中的两种溶液。在一个替代的实施例中，糖可在溶液A中。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】相关申请本申请要求于2013年11月22日提交的序列号为61/963,093的在先提交的待决美国临时专利申请的权益和优先权，其公开内容由此以其全文通过引用并入本文。
本专利技术涉及用于保存组织和器官功能的配制物，以及更具体地涉及用于保存组织和器官功能(具体是移植之前的血管导管功能)的储存稳定的配制物。
技术介绍
本文引用的所有参考文献的教导以其全文通过引用并入。美国专利7,981,596公开了组织和器官保存溶液，通常称为GALA。其由以下三种成分命名：谷胱甘肽，抗坏血酸和L-精氨酸。GALA溶液还包括平衡盐溶液。这些溶液特别适用于保存诸如动脉和静脉的血管导管。血管导管被用作适于各种旁路外科手术的移植物，所述手术包括但不限于周围血管旁路分流手术和冠状动脉旁路移植(CABG)手术。旁路移植是其中血管导管以如此的方式移植以旁路绕过被阻塞的动脉以至于将血流恢复到目标组织的方法。在血管手术期间，在血管导管被移植之前获取血管导管、对其进行冲洗并暂时保存在储存溶液中。内皮功能障碍是在导致血管导管发生故障的相互关联的发病中的主要决定因素。移植失败之后会导致移植血栓形成、内膜增生和加速移植动脉粥样硬化，所有这些在血管导管内皮的以往功能和/结构损伤之前都已预知。已经认识到用于在手术中获取的隐静脉段的存储溶液的选择对血管内皮的结构和功能以及因此移植通畅方面具有显著影响。这些溶液无法充分保存保持血管导管已被许多研究者(Thatte HS，Biswas KS，Najjar SF等人，隐静脉内皮细胞的多光子显微镜评估及其用新溶液GALA的保存(Multi-photon microscopic evaluation of saphenous vein endothelium and its preservation with a new solution,GALA.,Ann Thorac Surg 2003；75：1145-52和Hussaini 2011))所证实。在Wilbring等人的2011体外研究中证实在从患者获取的导管存放在通常适用于血管导管存储的缓冲盐溶液中之后血管功能完全丧失。该数据表明内皮细胞功能也显著下降，但这些功能失调的导管在本研究中被成功地用作适于旁路手术的移植物。在体外研究中对于GALATM保存溶液对人体隐静脉段的影响进行了评估。虽然当今在临床上使用的溶液导致在血管导管(隐静脉)的内皮细胞活力上的显著下降，但GALATM维持内皮功能和结构活性至少达24小时(Thatte 2003，Circulation 2013:127e6-e245Hussaini BE，Lu XG，Wolfe JA和Thatte S.Evalation of endoscopic vein extraction on structural and functional viability of saphenous vein endothelium.J Cariothorac Surg 2011；6：82-90)。因而体外数据表明通过将GALATM用作血管导管保存溶液而提供血管导管的更好保存。然而，所公开的溶液由于溶液的不稳定性而具有有限的储存寿命。因此，需要生产GALA器官和组织保存溶液的改进的溶液以便提高溶液的稳定性和储存寿命。
技术实现思路
本专利技术基于实现下述为前提，即GALA配制物的稳定性可通过将配制物分离成具有pH为至少7、通常为7.4-8的第一溶液A和具有pH为小于7、通常更低的第二溶液B来改进。溶液A包括平衡盐溶液。溶液B包括水，诸如抗坏血酸的抗氧化剂，具体为L-谷胱甘肽的还原剂，诸如L-精氨酸的一氧化氮底物和诸如D-葡萄糖的糖。该溶液保持在低于7、优选5，4或3的pH，优选具有为以每百万零份的氧含量。在本专利技术的一个替代实施例中，溶液A和B如上所述配制，不同之处在于所述糖被添加到溶液A而不是溶液B。此外，在替代的配制物中，可添加红细胞生成素(EPO)，优选添加到溶液B。附图说明图1是适于在本专利技术中使用的多室袋的透视图；图2是适于与本专利技术一起使用的具有第一和第二容器的试剂盒的透视图；图3A和图3B是表示在谷胱甘肽、抗坏血酸和精氨酸的加速储存条件下随时间变化的浓度曲线图；图4是描绘L-谷胱甘肽在溶液B中降解速率的两幅曲线图；以及图5A-5D是实施本专利技术的方法的示意性视图。具体实施方式除非另有定义，否则文中所用的所有技术及科学术语具有由本专利技术所属领域的普通技术人员所通常理解的相同含义。尽管在本专利技术的实践或测试中可使用与本文中所述那些类似或相当的任何方法及材料，但对优选的方法及材料进行描述。出于本专利技术的目的，下列术语定义如下。如本文中所用，术语“患者”包括动物界的成员，包括但不限于人类。如本文中所用，“器官”包括但不限于心脏、静脉、动脉、肺、肝、胰腺及肾。亦涵盖器官的部分。如本文中所用，“无菌水”包括但不限于：(a)注射用无菌水，USP；(b)无菌蒸馏去离子水；及(c)灌洗用无菌水。如本文中所用，“心麻痹(cardioplegia)”包括但不限于心脏麻痹。如本文中所用，“亚低温”为约10摄氏度-21摄氏度。如本文中所用，“抗氧化剂”为当存在于包含可氧化底物生物分子的混合物或结构中时，延迟或防止底物生物分子氧化的物质。例如，抗坏血酸为抗氧化剂。“平衡盐溶液”被定义为渗透上平衡以防止急性细胞或组织损伤的水性溶液。“缓冲盐溶液”被定义为平衡的盐溶液，化学物质添加到其以保持预定的生理pH值范围。“GALA”是指包括谷胱甘肽、抗坏血酸、L-精氨酸和平衡盐溶液的一种类型的组织保存溶液。“移植物”被定义为在身体的一部分中移植或植入以修复缺陷的组织。“获取的旁路导管”被定义为用于使得血液旁路绕过阻塞的外科手术安装的替代路径。“心麻痹溶液”被定义为在运输或手术过程中辅助保存心脏的溶液。“细胞还原剂”被定义为容易失去电子从而引起其它物质被化学还原的物质。“缓冲剂”是用于维持溶液的酸度(pH)接近选定值的酸或碱。用于生产本专利技术溶液的优选的缓冲剂是4N的盐酸和84％的NaHCO3。“等渗溶液”是指具有跨半透膜的相同渗透压的两种溶液。等渗溶液是具有与细胞相同的盐浓度的溶液。“生理溶液”被定义为通过与正常间质流体等渗而与正常组织兼容的盐水性溶液。本专利技术提供包含两种溶液(溶液A和溶液B)的GALA类型的组织保存配制物，其相比于现有GALA类型的单一溶液的组织保存溶液具有出乎意料之外的更高稳定性。根据本专利技术，第一溶液或溶液A包括平衡盐溶液。该平衡盐溶液包括水和生理学上可接受的盐。典型的平衡盐溶液将包括水，钙离子，氯离子，钾离子，磷酸根离子，镁离子和钠离子。平衡盐溶液包括选自如下的盐：二水合氯化钙、氯化钾、磷酸二氢钾、六水合氯化镁、七水合硫酸镁、氯化钠、碳酸氢钠、七水合磷酸氢二钠及其组合。平衡盐溶液以第一及第二溶液混合在一起时将产生等渗溶液的浓度提供。在示例性实施例中，平衡盐溶液包括约0.14克/升二水合氯化钙、约0.4克/升氯化钾、0.06克/升磷酸二氢钾、约0.1克/升六水合氯化镁、约0.1克/升七水合硫酸镁、约8克/升氯化钠、约0.36克/升碳酸氢钠及约0.03克/升七水合磷酸氢二钠。溶液A的成分在水中一起溶解，并且所得溶液的pH通本文档来自技高网...
【技术保护点】
器官和保存试剂盒，其包括：包含在第一容器中的第一水性溶液，其中所述第一水性溶液包括平衡盐溶液，并且所述第一溶液具有至少为7.0的pH；和包含在第二容器中的第二溶液，其中所述第二溶液包括水、还原型谷胱甘肽、抗坏血酸、糖、L‑精氨酸，并且所述第二溶液具有为约5.0或更小的pH。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.11.22 US 61/963,0931.器官和保存试剂盒，其包括：包含在第一容器中的第一水性溶液，其中所述第一水性溶液包括平衡盐溶液，并且所述第一溶液具有至少为7.0的pH；和包含在第二容器中的第二溶液，其中所述第二溶液包括水、还原型谷胱甘肽、抗坏血酸、糖、L-精氨酸，并且所述第二溶液具有为约5.0或更小的pH。2.根据权利要求1所述的试剂盒，其中所述第一和第二容器是在单个容器内的第一和第二腔室，以及第一和第二腔室通过隔开物从彼此分隔开，其中当移除所述隔开物时，所述第一溶液与所述第二溶液混合以形成整体的器官和组织保存溶液。3.根据权利要求1所述的试剂盒，其中所述第一溶液的pH为约7.8以及第二溶液的pH为约4.0。4.根据权利要求1所述的试剂盒，其中所述第一溶液的pH为约7.6以及第二溶液的pH为约5.0。5.根据权利要求1所述的试剂盒，其中溶液A和/或B在胶体、软膏、洗剂或水凝胶中配制。6.用于制备器官或组织保存溶液的方法，包括；制备第一溶液，包括形成具有pH为7.6至约8.0的平衡盐溶液；制备pH为约3–5的第二溶液，所述第二溶液包括水、D-葡萄糖、L-精氨酸、谷胱甘肽和抗坏血酸；以及在使用时将第一溶液与第二溶液混合在一起，以形成具有pH为7.3±0.4的混合溶液。7.用于保存组织或器官的方法，包括根据权利要求6所述的方法形成溶液，并将组织或器官与所述溶液接触。8.根据权利要求7所述的方法，其中所述组织或器官选自于由下述构成的组：隐静脉、上腹部动脉、胃网膜动脉、桡动脉、心脏、肺、肾、脑、肌肉移植物、皮肤、肠道、骨骼、附属器官、眼睛、以及所述组织或器官的部分。9.用于保存器官和组织的试剂盒，其包括：包含在第一容器中的第一水性溶液，其中所述第一水性溶液包括平衡盐溶液和糖，并且所述第一溶液具有从约7.6至约8.0的pH；和包含在第二容器中的第二溶液，其中所述第二溶液包括水、L-精氨酸、还原型谷胱甘肽和抗坏血酸，并且所述第二溶液具有为约3-5的pH。10.根据权利要求8所述的试剂盒，其中所述第一溶液的pH为约7.6以及第二溶液的pH为约5.0。11.根据权利要求8所述的试剂盒，其中将溶液A和/或B在胶体、软膏、洗剂或水凝胶中配制。12.用于制备器官或组织保存溶液的方法，包括；制备具有pH为约7.6至8.0的第一溶液，其包括水性平衡盐溶液和糖；制备pH为约3-5的第二溶液，其包括水、L-精氨酸、谷胱甘肽和抗坏血酸；以及将第一溶液与第二溶液混合在一起。13.根据权利要求11所述的方法，其中所述第一溶液的pH为约7.6以及第二溶液的pH为约5....
【专利技术属性】
技术研发人员：马亨德拉·瑟亚纳，
申请(专利权)人：索玛解有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US
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