阳离子性脂质制造技术

本发明专利技术提供一种阳离子性脂质，该阳离子性脂质可利用于向细胞质的核酸传递，而可解决脂质复合物的物理稳定性的课题。本发明专利技术的阳离子性脂质的特征在于：它是下述通式(3)所表示的化合物或其药剂学上可接受的盐。[化66][式(3)中，L表示碳数7～12的烷基或碳数7～12的烯基，R表示碳数1～2的烷基；n1及n2分别独立地表示1～3的整数。]。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种新颖的阳离子性脂质。本申请案是基于2014年1月9日在美国提出申请的临时申请案61/925,267号而主张优先权，并将其内容引用到本文中。
技术介绍
siRNA(小干扰RNA)、miRNA(微小RNA)、shRNA(短发夹RNA、或小发夹RNA)表达载体、反义寡核苷酸等核酸是在活体内诱导序列特异性基因表达抑制的核酸，其作为核酸医药而为公众所知。在这些核酸医药中，特别是siRNA备受瞩目。siRNA是包含19～23个碱基对的双链RNA，其会诱导被称为RNA干扰(RNA interference；RNAi)的序列特异性基因表达抑制。然而，siRNA虽化学性质稳定，但在治疗用途中存在如下问题：容易被血浆中的RNase(核糖核酸酶，ribonuclease)分解、及当单独存在时难以透过细胞膜(例如，专利文献1)。针对所述问题，已知有通过将siRNA封入到含有阳离子性脂质的微粒子内，而保护所封入的siRNA免于在血浆中发生分解，且可使siRNA透过脂溶性细胞膜，作为此种含有阳离子性脂质的脂质粒子，提出了含有特定的阳离子性脂质并通过挤出法或线内混合法而制备的脂质制剂(例如，参照专利文献1)。专利文献1中所记载的脂质制剂是在微粒子中封入了核酸等高分子的核酸-脂质粒子组合物，并且披露了该脂质制剂可将核酸导入到细胞中。另外，作为被期待利用于核酸医药的阳离子性脂质，现在开发出了各种化合物(例如，参照专利文献2～6及非专利文献1)，但已知含有具有非对称结构的阳离子性脂质的脂质纳米粒(Lipid nanoparticles，LNPs)在保管期间粒径会增大，也就是说在物理稳定性方面存在课题(非专利文献2)。针对所述问题，非专利文献2中披露了通过对含有具有非对称结构的阳离子性脂质的LNPs选择性地使用某种磷脂质，而使粒径的增大得到抑制。现有技术文献专利文献专利文献1：日本专利特表2012-530059号公报专利文献2：国际公开第2012/040184号专利文献3：国际公开第2013/059496号专利文献4：国际公开第2010/144740号专利文献5：美国公开第2013/0178541号专利文献6：美国专利第8158601号非专利文献非专利文献1：Angew.Chem.Int.Ed.(德国应用化学)2012,51,8529-8533非专利文献2：Mol.Pharmaceutics(分子制药)2014,3,11(11),4143-53
技术实现思路
专利技术所要解决的技术问题然而，尽管最近有所进展，但可利用于向细胞质的核酸传递而可解决如上所述的物理稳定性的课题的阳离子性脂质仍然是必要的。解决问题的技术手段本专利技术的阳离子性脂质的特征在于：它是下述通式(1)所表示的化合物或其药剂学上可接受的盐。[化1]通式(1)中，R1及R2分别独立地表示碳数4～24的烷基或碳数4～24的烯基，n1及n2分别独立为1～3的整数，R3为碳数1～3的烷基。所述通式(1)中，R1也可具有由碳链的一部分缩合而形成的1个以上的环丙烷。所述通式(1)中，R1也可具有由碳链的一部分缩合而形成的1个环丙烷。所述通式(1)中，R1为[化2]R2为表示碳数7～12的烷基或碳数7～12的烯基的L、R3为碳数1～2的烷基R的本专利技术的阳离子性脂质是以下述通式(3)表示。[化3]关于本专利技术的阳离子性脂质，在通式(3)中，n1及n2也可分别独立为1～2的整数。本专利技术的阳离子性脂质也可为选自以下化合物中的化合物或其药剂学上可接受的盐。1)[化4]2)[化5]3)[化6]4)[化7]5)[化8]6)[化9]7)[化10]8)[化11]本专利技术的阳离子性脂质也可为下述式(4)所表示的化合物或其药剂学上可接受的盐。[化12]本专利技术的阳离子性脂质也可为下述式(5)所表示的化合物或其药剂学上可接受的盐。[化13]本专利技术的阳离子性脂质也可为下述式(10)所表示的化合物或其药剂学上可接受的盐。[化14]本专利技术的组合物的特征在于含有：(I)本专利技术的阳离子性脂质、(II)选自由中性脂质、聚乙二醇修饰脂质及固醇所组成的组中的至少一种脂质及(III)核酸。本专利技术的组合物可通过如下制造方法而制造，该制造方法包括：将包含(I)本专利技术的阳离子性脂质和(II)选自由中性脂质、聚乙二醇修饰脂质及固醇所组成的组中的至少一种脂质的含极性有机溶剂的水溶液、与含有(III)核酸的水溶液加以混合而获得混合液的步骤；以及使所述混合液中的极性有机溶剂的含量减少的步骤。专利技术效果根据本专利技术的阳离子性脂质，可向细胞质高效率地释放核酸。另外，根据本专利技术的阳离子性脂质，可解决如上所述的物理稳定性的课题。因此，本专利技术的阳离子性脂质具有作为用于向细胞质传递核酸的脂质的可利用性。附图说明图1是表示实施例20及比较例1的组合物的平均粒径随时间经过而产生的变化。图2是表示实施例21～25及比较例2的组合物在保管前后的平均粒径变化。具体实施方式《阳离子性脂质》在一个实施方式中，本专利技术提供一种阳离子性脂质，它是下述通式(1)
所表示的化合物或其药剂学上可接受的盐。阳离子性脂质也可为所述盐的水合物或所述盐的溶剂合物。[化15]通式(1)中，R1及R2分别独立地表示碳数4～24的烷基或碳数4～24的烯基，n1及n2分别独立为1～3的整数，R3为碳数1～3的烷基。通式(1)中，R1可具有由碳链的一部分缩合而形成的1个以上的环丙烷，也可具有1个环丙烷。所述通式(1)中，R1以[化16]表示、R2为表示碳数7～12的烷基或碳数7～12的烯基的L、R3为碳数1～2的烷基R的本专利技术的阳离子性脂质是以下述通式(3)表示。[化17]关于本专利技术的阳离子性脂质，在通式(3)中，n1及n2也可分别独立为1～2的整数。在本专利技术中，所谓阳离子性脂质，是指下述式所表示的具有脂质亲和性区域X和亲水性区域Z的两亲分子(amphiphilic molecule)，该脂质亲和性区域X含有一个以上的烃基，该亲水性区域Z含有在生理pH值下会质子化的极性基。此外，本专利技术的阳离子性脂质也可在脂质亲和性区域和亲水性区域之间具有连结区Y。[化18]X-Y-Z在本说明书中，所谓“烷基”，是指具有指定个数的碳原子的直链状、环状或支链状的饱和脂肪族烃基。在本说明书中，所谓“烯基”，是指具有指定个数的碳数的直链状、环状或支链状的不饱和脂肪族烃基，例如可列举二烯、三烯及四烯等，但
并不限定于这些。作为所述环状“烷基”或环状“烯基”，例如可列举具有1个以上由碳链的一部分缩合而形成的环丙烷或环丁烷等环的基，但并不限定于这些。作为所述通式(3)所表示的化合物，可列举以下的化合物。[化19][化20][化21][化22][化23][化24][化25][化26]本专利技术的阳离子性脂质是所述通式(1)所表示的化合物或其药剂学上可接受的盐。即，本专利技术的阳离子性脂质可发生质子化而含有下述通式(1')所表示的阳离子。[化27][通式(1')中，R1～R3、n1及n2分别表示与所述通式(1)中的R1～R3、n1及n2相同的含义]作为与所述通式(1')所表示的阳离子成对，且本专利技术的阳离子性脂质可含有的阴离子，只要为药剂学上可接受的阴离子，则没有特别限定，例如可列举：氯化物离子、溴化本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种阳离子性脂质，其特征在于：它是下述通式(3)所表示的化合物或其药剂学上可接受的盐，[化54]所述通式(3)中，L表示碳数7～12的烷基或碳数7～12的烯基，R表示碳数1～2的烷基；n1及n2分别独立为1～3的整数。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.01.09 US 61/925,2671.一种阳离子性脂质，其特征在于：它是下述通式(3)所表示的化合物或其药剂学上可接受的盐，[化54]所述通式(3)中，L表示碳数7～12的烷基或碳数7～12的烯基，R表示碳数1～2的烷基；n1及n2分别独立为1～3的整数。2.根据权利要求1所述的阳离子性脂质，其特征在于：通式(3)中，n1及n2分别独立为1～2的整数。3.根据权利要求1或2所述的阳离子性脂质，其特征在于：它是选自以下的化合物(4)...

【专利技术属性】
技术研发人员：铃木裕太，兵头健治，田中阳平，
申请(专利权)人：卫材RD管理有限公司，
类型：发明
国别省市：日本;JP