本发明专利技术公开了γ‑氨基丁酸菌株及其筛选和制备酸菜的方法。该发明专利技术中筛选得到的γ‑氨基丁酸产生菌SC221被鉴定为短乳杆菌(Lactobacillus brevis)。该菌株发酵生产γ‑氨基丁酸的最适初始pH为4.0，最适发酵温度为35℃。经短乳杆菌(Lactobacillus brevis)SC221发酵制作的酸菜，γ‑氨基丁酸的含量为6.73g/kg。本发明专利技术公布的方法具有发酵周期短、生产成本低、安全性好、易实现工业化等特点，既提高了酸菜的营养价值，又扩展了乳酸菌的应用范围，为农产品的深加工提供了一条很具经济效益和社会效益的途径。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于食品工程
，涉及γ-氨基丁酸菌株及其筛选和制备酸菜的方法。
技术介绍
γ-氨基丁酸是谷氨酸经脱羧后形成的一种非蛋白氨基酸，广泛分布在自然界的微生物、植物以及动物体内。γ-氨基丁酸作为一种神经递质抑制剂在动物体内起着重要的生理作用，具有抗焦虑、降血压、促进睡眠、改善脑机能、增强记忆力等多种生理功能，具有良好的医药、保健等应用前景。它可以作为生物活性成分应用到药物以及保健食品中，例如奶酪、茶叶等。因此，近些年来关于γ-氨基丁酸的研究越来越引起人们的兴趣。目前，γ-氨基丁酸的生产主要有化学合成与生物合成法，化学合成法具有生产成本高且安全性差等缺点，而生物合成法则是工艺简单、效率高、成本低并且安全性高的一种γ-氨基丁酸生产方法。2009年，由生物方法制备的γ-氨基丁酸已经被我国卫生部列为“新资源食品”。目前，γ-氨基丁酸的生物法生产主要是利用具有谷氨酸脱羧酶活性的菌株作用于谷氨酸钠，谷氨酸钠经谷氨酸脱羧酶作用产生γ-氨基丁酸。这样的菌株如红曲霉、乳酸菌、酵母菌等。乳酸菌作为食品中常见的菌种，通常可以从酸奶、酸菜、腐乳等食品中分离得到， 也可以被安全地用以γ-氨基丁酸生产中。酸菜是一种非常常见的风味食品，在全国各地都有各自不同风味的酸菜，酸菜具有开胃提神、醒酒解腻、促进食欲等食用效果。乳酸菌是酸菜的发酵过程起主要作用的菌株，因此在制作酸菜时，有目的性地添加能产生γ-氨基丁酸的乳酸菌，则既能缩短酸菜的制作时间，又能提高酸菜的营养价值。
技术实现思路
本专利公开了一种γ-氨基丁酸菌株及其筛选和制备酸菜的方法。为实现上述目的，本专利技术提供的技术方案：一种γ-氨基丁酸菌株，其分类属于为乳杆菌目(lactobacillus)、乳杆菌科(Lactobacillaceae)、短乳杆菌属的γ-氨基丁酸菌(Lactobacillus brevis)SC221，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保存编号为CGMCC No 11437，保藏日期为2015年09月21日，中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮政编码为100101。以上所述的γ-氨基丁酸菌株的筛选方法，包括以下步骤：(1)γ-氨基丁酸产生菌的初筛：从市场购买的酸菜研磨，取研磨液加入发酵培养基，28-37℃静置培养4-6天，薄层层析检测培养液中γ-氨基丁酸含量；(2)γ-氨基丁酸产生菌的复筛：挑选γ-氨基丁酸含量高的培养液，涂布筛选培养基平板，28-37℃培养1-3天后，选取周围具有透明圈的单菌落接种到发酵培养基，28-37℃静置培养4-6天，HPLC检测发酵液中γ-氨基丁酸含量，根据检测结果选取浓度大于3g/L菌株， 即可得到权利要求1所述的γ-氨基丁酸菌株。以上所述的γ-氨基丁酸菌株的筛选方法，所述的步骤(1)和(2)所用的发酵培养基的组分为：葡萄糖5-12g/L；酵母浸提物8-15g/L；蛋白胨1-6g/L；乙酸钠1-5g/L；谷氨酸钠5-15g/L；MgSO4·7H2O0.1-0.4g/L；MnSO4·H2O 0.001-0.3g/L；FeSO4·7H2O 0.0005-0.005g/L；NaCl0.0005-0.005g/L；pH 6.5-7.2。以上所述的γ-氨基丁酸菌株的筛选方法，所述的步骤(2)筛选培养基的组分为：胰蛋白胨8-13g/L，酵母1-6g/L，葡萄糖10-25g/L，柠檬酸二铵0.5-5g/L，吐温-80 0.3-1.5mL/L，CH3COONa·3H2O 15-30g/L，KH2PO4 2-9g/L，MgSO4·7H2O 0.1-1g/L，MnSO4·4H2O 0.05-0.3g/L，FeSO4·7H2O 0.01-0.05g/L，CaCO3 10-25g/L，琼脂8-18g/L，pH6.6-7.0。将经过上述筛选到的菌株(在此命名为γ-氨基丁酸菌(Lactobacillus brevis)SC221)进行16S rDNA基因序列测定和生理生化鉴定，结果如下：1.提取菌株SC221的总DNA，然后以总DNA为模板，利用通用引物27f(5’-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’)和1492r(5’-TACGGCTACCTT-GTTACG ACTT-3’)，PCR得到其16s保守序列，经过对SC221菌株的16S rDNA基因序列比对，与短乳杆菌(Lactobacillus brevis)的序列同源性最高，为99％。经测序得到SC221具体DNA基因序列(1480bp序列)为：16s5’-CCGATCTCTGTCACCTTAGACGGCTGACTCCCGAAGGTTATCTCACCGGCTTTGGGTGTTACAAACTCTCATGGTGTGACGGGCGGTGTGTACAAGGCCCGGGAACGTATTCACCGCGGCATGCTGATCCGCGATTACTAGCGATTCCAACTTCATGTAGGCGAGTTGCAGCCTACAATCCGAACTGAGAACGGCTTTAAGAGATTAGCTTAGCCTCACGACTTCGCAACTCGTTGTACCGTCCATTGTAGCACGTGTGTAGCCCAGGTCATAAGGGGCATGATGATTTGACGTCATCCCCACCTTCCTCCGGTTTGTCACCGGCAGTCTCACCAGAGTGCCCAACTGAATGCTGGCAACTGATAATAAGGGTTGCGCTCGTTGCGGGACTTAACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAACCATGCACCACCTGTCATTCTGTCCCCGAAGGGAACGTCTTATCTCTAAGATTGGCAGAAGATGTCAAGACCTGGTAAGGTTCTTCGCGTAGCTTCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTGTGCGGGCCCCCGTCAATTCCTTTGAGTTTCAACCTTGCGGTCGTACTCCCCAGGCGGAGTGCTTAATGCGTTAGCTGCAGCACTGAAGGGCGGAAACCCTCCAACACTTAGCACTCATCGTTTACGGCATGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTCGCTACCCATGCTTTCGAGCCTCAGCGTCAGTTACAGACTAGACAGCCGCCTTCGCCACTGGTGTTCTTCCATATATCTACGCATTCCACCGCTACACATGGAGTTCCACTGTCCTCTTCTGCACTCAAGTCTCCCAGTTTCCGATGCACTTCTCCGGTTAAGCCGAAGGCTTTCACATCAGACTTAAAAAACCGCCTGCGCTCGCTTTACGCCCAATAAATCCGGACAACGCTTGCCACCTACGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGTAGTTAGCCGTGGCTTTCTGGTTAAATACCGTCAACCCTTGAACAGTTACTCTCAAAGGTGTTCTTCTTTAACAACAGAGTTTTACGAGCCGAAACCCTTCTTCACTC本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种γ‑氨基丁酸菌株，其分类属于为乳杆菌目(lactobacillus)、乳杆菌科(Lactobacillaceae)、短乳杆菌属的γ‑氨基丁酸菌(Lactobacillus brevis)SC221，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保存编号为CGMCC No 11437。
【技术特征摘要】
1.一种γ-氨基丁酸菌株，其分类属于为乳杆菌目(lactobacillus)、乳杆菌科(Lactobacillaceae)、短乳杆菌属的γ-氨基丁酸菌(Lactobacillus brevis)SC221，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保存编号为CGMCC No 11437。2.一种如权利要求1所述的γ-氨基丁酸菌株的筛选方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)γ-氨基丁酸产生菌的初筛：从市场购买的酸菜研磨，取研磨液加入发酵培养基，28-37℃静置培养4-6天，薄层层析检测培养液中γ-氨基丁酸含量；(2)γ-氨基丁酸产生菌的复筛：挑选γ-氨基丁酸含量高的培养液，涂布筛选培养基平板，28-37℃培养1-3天后，选取周围具有透明圈的单菌落接种到发酵培养基，28-37℃静置培养4-6天，HPLC检测发酵液中γ-氨基丁酸含量，根据检测结果选取浓度大于3g/L菌株，即可得到权利要求1所述的γ-氨基丁酸菌株。3.根据权利要求2所述的γ-氨基丁酸菌株的筛选方法，其特征在于：步骤(1)和(2)所用的发酵培养基的组分为：葡萄糖5-12g/L；酵母浸提物8-15g/L；蛋白胨1-6g/L；乙酸钠1-5g/L；谷氨酸钠5-15g/L；MgSO4·7H2O 0.1-0.4g/L；MnSO4·H2O 0.001-0.3g/L；FeSO4·7H2O 0.0005-0.005g/L；NaCl0.0005-0.005g/L；pH 6.5-7.2。4.根据权利要求2或3所述的γ-氨基丁酸菌株的筛选方法，其特征在于：步骤(2)筛选培养基的组分为：胰蛋白胨8-13g/L，酵母1-6g/L，葡萄糖10-25g/L，柠檬酸二铵0.5-5g/L，吐温-80 0.3-1.5mL/L，CH3COONa·3H2O 15-30g/L，KH2PO4 2-9g/...
【专利技术属性】
技术研发人员：杨齐，黄斌良，黄燕菲，吴华德，黄妹平，蓝健益，
申请(专利权)人：广西多得乐生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广西;45
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