一种从西兰花中提取异硫氰酸苄酯的方法技术

本发明专利技术涉及天然产物提取的技术领域，特别是涉及一种从西兰花中提取异硫氰酸苄酯的方法，包括：步骤一，干燥；步骤二，粉碎；步骤三，配制酶溶液；步骤四，酶解；步骤五，超声提取；步骤六，浓缩；步骤七，乙醚萃取和浓缩；步骤八，冷冻干燥。该从西兰花中提取异硫氰酸苄酯的方法具有提取率高、提取时间短的优点，其中，每千克的西兰花能够得到8mg~12mg的异硫氰酸苄酯粗品。另外，该从西兰花中提取异硫氰酸苄酯的方法具有环保、能耗低、安全性好、工艺简单、可操作性强和生产成本低的优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及天然产物提取的
，特别是涉及一种从西兰花中提取异硫氰酸苄酯的方法。
技术介绍
西兰花（Brassica oleracea L.var.botrytis L），为十字花科、芸薹属1~2年生草本植物，富含蛋白质、糖、脂肪、维生素和胡萝卜素等，营养成份位居同类蔬菜之首，被誉为“蔬菜皇冠”，同时它含有异硫氰酸酯类化合物，因此还具有抗癌功效，其功效已被世界认可，具有很高的药用价值。异硫氰酸酯是有R-N=C=S结构通式的一类化合物。它广泛存在于十字花科植物中，如：西蓝花、花椰菜、芥蓝等，代表物主要有:异硫氰酸苄酯﹑异硫氰酸丙烯基酯﹑萝卜硫素等，具有有效的抗癌活性。近年来，国内外研究表明，西蓝花中含有异硫氰酸苄酯，且药理活性广泛，抗癌、抗炎活性已被认证。异硫氰酸苄酯是十字花科植物中次级代谢产物，在植物细胞中以前体形式存在，细胞破裂经黑芥子酶催化得到。目前异硫氰酸苄酯主要有化学合成法和天然提取法，但化学合成法工艺复杂，设备及成本高，所用的化学物质大都有毒，安全系数低，产品有一定的毒副作用。另外，现有技术中的天然提取法存在工艺复杂、提取时间长、提取率低的缺陷。
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对现有技术中的不足之处而提供一种从西兰花中提取异硫氰酸苄酯的方法，该方法具有工艺简单、提取时间短和提取率高的优点。为达到上述目的，本专利技术通过以下技术方案来实现。提供一种从西兰花中提取异硫氰酸苄酯的方法，它包括以下步骤：步骤一，干燥：将西兰花脱水处理，然后在一定温度下烘干至恒重，得到干燥的西兰花；步骤二，粉碎：将步骤一得到的干燥的西兰花进行粉碎，得到西兰花干粉；步骤三，配制酶溶液：将黑芥子酶、纤维素酶、果胶酶、维生素C和EDTA加入到一定量的水中进行溶解并混合均匀后，制得酶溶液；步骤四，酶解：将步骤二得到的西兰花干粉加入到步骤三的酶溶液中，搅拌均匀，在一定温度下酶解一定时间后，得到酶解液；步骤五，超声提取：将步骤四得到的酶解液加入到无水乙醇中，然后在一定温度下进行超声波振荡提取一定时间，然后静置一定时间后，得到提取物，再将所得到的提取物进行滤去残渣，得到滤液，并将所得到的滤液进行真空抽滤以除去杂质，制得粗提液；步骤六，浓缩：将步骤五制得的粗提液在一定温度下进行浓缩以除去乙醇，得到粗提水溶液；步骤七，乙醚萃取和浓缩：将步骤六得到的粗提水溶液加入到乙醚中进行萃取，以除去水分，得到乙醚相，然后将乙醚相在一定温度下进行浓缩至膏状，以除去乙醚，得到膏状粗提物；步骤八，冷冻干燥：将步骤七得到的膏状粗提物进行冷冻干燥至恒重，即制得异硫氰酸苄酯粗品。上述技术方案中，所述步骤一干燥步骤，将西兰花于70℃~80℃下进行脱水1h~3h，然后在50℃~65℃下烘干至恒重，得到干燥的西兰花。上述技术方案中，所述步骤二粉碎步骤，将步骤一得到的干燥的西兰花进行粉碎至40目~80 目，得到西兰花干粉。上述技术方案中，所述步骤三配制酶溶液步骤中，所述黑芥子酶、所述纤维素酶、所述果胶酶、所述维生素C、所述EDTA和所述水之间的质量比为4~6:1~3:1~3:1.5~4：2~4:9~12。上述技术方案中，所述步骤四酶解步骤中，所述西兰花干粉与所述酶溶液的质量体积比为1g/mL~4g/mL，所述酶解温度为35℃~75℃，所述酶解时间为1h~5h。上述技术方案中，所述步骤五超声提取步骤，将步骤四得到的酶解液加入到无水乙醇中，然后在40℃~50℃下进行超声波振荡提取0.5h~2.5h，然后静置8min~12min后，得到提取物，再将所得到的提取物进行过20目~40目筛以滤去残渣，得到滤液，并将所得到的滤液进行真空抽滤以除去杂质，制得粗提液；所述超声波的功率为250W~450W。上述技术方案中，所述步骤五超声提取步骤中，所述酶解液与所述无水乙醇的体积比为1~2:3~5。上述技术方案中，所述步骤六浓缩步骤，将步骤五制得的粗提液先在45℃~55℃下进行旋转蒸发浓缩以除去大部分的乙醇，再在60℃~70℃下进行旋转蒸发浓缩以除尽乙醇，得到粗提水溶液。上述技术方案中，所述步骤七乙醚萃取和浓缩步骤，将步骤六得到的粗提水溶液加入到乙醚中进行萃取2次~3次，以除去水分，得到乙醚相，然后将乙醚相在45℃~55℃下进行旋转蒸发浓缩至膏状，以除去乙醚，得到膏状粗提物；所述粗提水溶液与所述乙醚的体积比为0.5~1.5:1~3。上述技术方案中，所述步骤八冷冻干燥步骤中，所述冷冻温度为-35℃~-45℃。本专利技术的有益效果：（1）本专利技术提供的一种从西兰花中提取异硫氰酸苄酯的方法，由于以黑芥子酶、纤维素酶、果胶酶、维生素C和EDTA配制酶溶液，其中，纤维素酶、果胶酶用于破坏植物细胞壁，并使细胞内的异硫氰酸苄酯的前体物质更好地释放，黑芥子酶与异硫氰酸苄酯的前体物质充分接触，以促进细胞内的相关酶促反应，使异硫氰酸苄酯的前体物质更好地向异硫氰酸苄酯转化，进而能提高异硫氰酸苄酯的提取率，增加产量，另外，维生素C和EDTA的作用都是用于提高黑芥子酶、纤维素酶和果胶酶的活力，以加快反应速率。因此，该从西兰花中提取异硫氰酸苄酯的方法具有提取率高、提取时间短的优点，其中，每千克的西兰花能够得到8mg~12mg的异硫氰酸苄酯粗品。（2）本专利技术提供的一种从西兰花中提取异硫氰酸苄酯的方法，由于以无水乙醇作为溶剂，并以超声波进行提取，另外使用乙醚进行萃取，其中，无水乙醇和乙醚均能够通过旋转蒸发浓缩除去，因此，该从西兰花中提取异硫氰酸苄酯的方法具有环保、能耗低、安全性好的优点，并且，该方法具有工艺简单、提取时间短、可操作性强的优点。（3）本专利技术提供的一种从西兰花中提取异硫氰酸苄酯的方法，由于是以日常蔬菜西兰花作为原料，西兰花价格便宜且资源丰富，因此，该从西兰花中提取异硫氰酸苄酯的方法具有生产成本低，且能够适用于大规模生产的特点。具体实施方式为了使本专利技术所解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。其中，本专利技术提及的EDTA为乙二胺四乙酸。实施例1。本实施例的一种从西兰花中提取异硫氰酸苄酯的方法，它包括以下步骤：步骤一，干燥：将西兰花于75℃下进行脱水2h，然后在55℃下烘干至恒重，得到干燥的西兰花；步骤二，粉碎：将步骤一得到的干燥的西兰花进行粉碎至60 目，得到西兰花干粉；步骤三，配制酶溶液：将黑芥子酶、纤维素酶、果胶酶、维生素C和EDTA加入到一定量的水中进行溶解并混合均匀后，制得酶溶液；本实施例中，黑芥子酶、纤维素酶、果胶酶、维生素C、EDTA和水之间的质量比为5:2:2:2.8：2.92:10；步骤四，酶解：将步骤二得到的西兰花干粉加入到步骤三的酶溶液中，搅拌均匀，在45℃下酶解3h后，得到酶解液；本实施例中，西兰花干粉与酶溶液的质量体积比为2g/mL；步骤五，超声提取：将步骤四得到的酶解液加入到无水乙醇中，然后在45℃下进行超声波振荡提取1.5h，然后静置10min后，得到提取物，再将所得到的提取物进行过30目筛以滤去残渣，得到滤液，并将所得到的滤液进行真空抽滤以除去杂质，制得粗提液；本实施例中，超声波的功率为300W，酶解液与无水乙醇的体积比为1.5:4；步骤六，浓缩：将将步本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从西兰花中提取异硫氰酸苄酯的方法，其特征在于：它包括以下步骤：步骤一，干燥：将西兰花脱水处理，然后在一定温度下烘干至恒重，得到干燥的西兰花；步骤二，粉碎：将步骤一得到的干燥的西兰花进行粉碎，得到西兰花干粉；步骤三，配制酶溶液：将黑芥子酶、纤维素酶、果胶酶、维生素C和EDTA加入到一定量的水中进行溶解并混合均匀后，制得酶溶液；步骤四，酶解：将步骤二得到的西兰花干粉加入到步骤三的酶溶液中，搅拌均匀，在一定温度下酶解一定时间后，得到酶解液；步骤五，超声提取：将步骤四得到的酶解液加入到无水乙醇中，然后在一定温度下进行超声波振荡提取一定时间，然后静置一定时间后，得到提取物，再将所得到的提取物进行滤去残渣，得到滤液，并将所得到的滤液进行真空抽滤以除去杂质，制得粗提液；步骤六，浓缩：将步骤五制得的粗提液在一定温度下进行浓缩以除去乙醇，得到粗提水溶液；步骤七，乙醚萃取和浓缩：将步骤六得到的粗提水溶液加入到乙醚中进行萃取，以除去水分，得到乙醚相，然后将乙醚相在一定温度下进行浓缩至膏状，以除去乙醚，得到膏状粗提物；步骤八，冷冻干燥：将步骤七得到的膏状粗提物进行冷冻干燥至恒重，即制得异硫氰酸苄酯粗品。

【技术特征摘要】
1.一种从西兰花中提取异硫氰酸苄酯的方法，其特征在于：它包括以下步骤：步骤一，干燥：将西兰花脱水处理，然后在一定温度下烘干至恒重，得到干燥的西兰花；步骤二，粉碎：将步骤一得到的干燥的西兰花进行粉碎，得到西兰花干粉；步骤三，配制酶溶液：将黑芥子酶、纤维素酶、果胶酶、维生素C和EDTA加入到一定量的水中进行溶解并混合均匀后，制得酶溶液；步骤四，酶解：将步骤二得到的西兰花干粉加入到步骤三的酶溶液中，搅拌均匀，在一定温度下酶解一定时间后，得到酶解液；步骤五，超声提取：将步骤四得到的酶解液加入到无水乙醇中，然后在一定温度下进行超声波振荡提取一定时间，然后静置一定时间后，得到提取物，再将所得到的提取物进行滤去残渣，得到滤液，并将所得到的滤液进行真空抽滤以除去杂质，制得粗提液；步骤六，浓缩：将步骤五制得的粗提液在一定温度下进行浓缩以除去乙醇，得到粗提水溶液；步骤七，乙醚萃取和浓缩：将步骤六得到的粗提水溶液加入到乙醚中进行萃取，以除去水分，得到乙醚相，然后将乙醚相在一定温度下进行浓缩至膏状，以除去乙醚，得到膏状粗提物；步骤八，冷冻干燥：将步骤七得到的膏状粗提物进行冷冻干燥至恒重，即制得异硫氰酸苄酯粗品。2.根据权利要求1所述的一种从西兰花中提取异硫氰酸苄酯的方法，其特征在于：所述步骤一干燥步骤，将西兰花于70℃~80℃下进行脱水1h~3h，然后在50℃~65℃下烘干至恒重，得到干燥的西兰花。3.根据权利要求1所述的一种从西兰花中提取异硫氰酸苄酯的方法，其特征在于：所述步骤二粉碎步骤，将步骤一得到的干燥的西兰花进行粉碎至40目~80 目，得到西兰花干粉。4.根据权利要求1所述的一种从西兰花中提取异硫氰酸苄酯的方法，其特征在于：所述步骤三配制酶溶液步骤中，所述黑芥子酶、所述纤维素酶、所述果胶酶、所述维生素C、所述EDTA和...

【专利技术属性】
技术研发人员：李宝红，李福美，彭新生，王家平，
申请(专利权)人：广东医学院，
类型：发明
国别省市：广东;44