【技术实现步骤摘要】
本专利技术提供一种可以同时产生三种抗体的多克隆抗体的制备方法。
技术介绍
全球食源性疾病发病率不断上升，且有严重暴发流行。据报道，发达国家每年大约有30％的人患食源性疾病。这些国家食源性疾病的种类较多，常见的有肠道出血性大肠杆菌O157：H7、沙门氏菌、单核增生李斯特菌感染等，腹泻发病率和死亡率较高。世界卫生组织统计报告表明，全球因食物污染而致病者已达数亿人，每年约有几亿腹泻病例，导致约300万5岁以下儿童死亡，其中约70％是因生物性污染的食品所致。在发展中国家，估计每年腹泻及其相关疾病有2.7亿病例，导致240万5岁以下儿童死亡。尤其是2012年5月在德国爆发的由出血性大肠杆菌O104：H4引发的“毒蔬菜”事件，经过一个多月的排查后，终于确定了造成此次大肠杆菌疫情的罪魁祸首元凶是产于德国北部的一家有机农场生产的豆芽。目前，此次疫情已造成约4000人感染，三十余人死亡。近日，感染了单核增生李斯特菌的甜瓜事件，在美国已经蔓延超过26个州，共造成133人感染，28人死亡的严重后果。可以说食源性致病菌污染问题已经迫在眉睫。基于双抗夹心原理的ELISA法检测多种食源性致病菌，要想实现同时检测多种目标的目的，需要制备基于目标物的多克隆抗体，但从检测的实际看，针对各自目标物的多克隆抗体混合在一起后，由于抗体之间可能会出现相互干扰而影响检测的结果，同时出于简化检测步骤的考虑，本专利技术提出了一种可同时产生多种抗体的多克隆抗体制备方法。
技术实现思路
本专利的目的是克服现有技术的不足，提供一种可同时产生肠道出血性大肠杆菌O157：H7、沙门氏菌、单核增生李斯特菌的多克隆抗体...
【技术保护点】
一种可以同时产生三种抗体的多克隆抗体的制备方法，其中包括肠道出血性大肠杆菌O157：H7、沙门氏菌、单核增生李斯特菌的抗原的制备；多克隆抗体的制备；抗体的纯化。
【技术特征摘要】
1.一种可以同时产生三种抗体的多克隆抗体的制备方法，其中包括肠道出血性大肠杆菌O157：H7、沙门氏菌、单核增生李斯特菌的抗原的制备；多克隆抗体的制备；抗体的纯化。2.权利1所述的制备方法，其中该方法包括步骤：①抗原制备的方法：将肠道出血性大肠杆菌O157：H7、沙门氏菌和单核增生李斯特菌接种于营养肉汤培养基中复苏后，接种于营养琼脂培养基平板中，37℃培养18h，用生理盐水将平板上菌苔洗下，收集，4000g离心20min，重复洗涤3次后，对收集到的抗原进行菌落计数，将抗原浓度定容在108CFU/ml，之后添加0.5％甲醛37℃放置1天，灭活。②肠道出血性大肠杆菌O157：H7、沙门氏菌和单核增生李斯特菌多克隆抗体的制备：成年健康雄性家兔适应性饲养2周后，耳中央静脉采血1ml，4℃静置过夜后，10000g离心10min，收集血清，...
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