一种制造技术

本发明专利技术属于放射性药物及核医学领域，具体涉及一种

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于放射性药物及核医学领域，具体涉及一种18F标记的亲合体类化合物及制备方法与应用。
技术介绍
正电子发射断层扫描(PET)作为21世纪生物医学研究和临床诊断的尖端技术，被称为“活体生化显像”技术，可以从体外无创、定量、动态地观察人体内的生理、生化变化，洞察标记药物在正常人或病人体内的活动。与SPECT相比，PET具有分辨率高和可定量分析等明显优势。18F具有接近100％的正电子效率、低正电子能量(0.64兆电子伏)和相对较短的物理半衰期(t1/2＝109.7min)等特点，是理想的PET显像核素。多肽具有组织渗透迅速、血液中快速清除、免疫原性低等优点，是制备18F标记显像剂的合适载体。人类表皮生长因子受体2(human epithelialgrowth factor receptor-2，HER2)是结合在细胞膜表面的跨膜受体样蛋白，具有酪氨酸激酶活性，通过激活下游信号通路参与细胞的生长、活化和增殖过程。HER2在正常组织中表达不显著，但在乳腺癌，卵巢癌、宫颈癌和肺癌等恶性肿瘤中高度表达。因此，HER2是肿瘤诊断和治疗的重要靶点。亲和体(Affibody)又称“人工抗体”，是一类基于非免疫蛋白亲和配体的新型多肽。亲合体ZHER2:342由58个氨基酸残基组成，与HER2具有特异性的结合能力，其18F标记产物适于肿瘤显像，可用于肿瘤的早期诊断和疗效监测。目前，对亲合体进行18F标记的方法，包括以下步骤：QMA柱纯化18F、多步反应制备辅基(18F-SFB或18F-FBEM)及其纯化、耦联肽、HPLC纯化等；该方法不仅耗时(约1～2h)、操作较复杂，而且产物中18F的总体标记率较低。18F离子易与金属(如：铝)结合，生成的18F-铝配合物(18F-Al)可被NOTA螯和。利用该原理，McBride等通过18F-Al和连接NOTA的肽进行直接反应，制得18F标记肽。该制备方法，无须辅基的制备和纯化等，制备时间缩短，且标记物具有高特异性活度。Kramer-Marek G等制备了18F-FBEM-(ZHER2:342)，其可以作为靶向于HER2受体的肿瘤的显像剂(Kramer-Marek G et al，Eur J Nucl Med MolImaging，2008，35，1008-1018)。然而，一方面，肿瘤对上述18F-FBEM-(ZHER2:342)的摄取值较低，这导致肿瘤显像灵敏度较低；另一方面，肝脏对上述18F-FBEM-(ZHER2:342)的摄取值较高，这导致对肝脏的毒副作用较大；此外，上述18F-FBEM-(ZHER2:342)的制备方法较复杂，从而在一定程度上限制了其临床应用。因此，研究肿瘤显像灵敏度较高、对肝脏的毒副作用较小、制备方法较简便的18F标记的靶向于HER2受体的肿瘤PET显像剂具有重要意义。
技术实现思路
为此，本专利技术提出一种18F标记的亲合体类化合物，并进而提供制备方法与应用。为解决上述技术问题，本专利技术是通过以下技术方案来实现的：本专利技术提供式(Ⅰ)所示的化合物，Val-Asp-Asn-Lys-Phe-Asn-Lys-Glu-Met-Arg-Asn-Ala-Tyr-Trp-Glu-Ile-Ala-Leu-Leu-Pro-Asn-Leu-Asn-Asn-Gln-Asp-Lys-Arg-Ala-Phe-Ile-Arg-Ser-Leu-Tyr-Asp-Asp-Pro-Ser-Gln-Ser-Ala-Asn-Leu-Leu-Ala-Glu-Ala-Lys-Lys-Leu-Asn-Asp-Ala-Gln-Ala-Pro-Lys-Asn-Asp-Arg-Gly-Gly-Gly-R1其中，R1表示的为本专利技术还提供一种用于制备式(Ⅰ)所示的化合物的药盒，所述药盒的试剂包括：1～10摩尔份式(Ⅱ)所示的化合物和1摩尔份式三氯化铝，Val-Asp-Asn-Lys-Phe-Asn-Lys-Glu-Met-Arg-Asn-Ala-Tyr-Trp-Glu-Ile-Ala-Leu-Leu-Pro-Asn-Leu-Asn-Asn-Gln-Asp-Lys-Arg-Ala-Phe-Ile-Arg-Ser-Leu-Tyr-Asp-Asp-Pro-Ser-Gln-Ser-Ala-Asn-Leu-Leu-Ala-Glu-Ala-Lys-Lys-Leu-Asn-Asp-Ala-Gln-Ala-Pro-Lys-Asn-Asp-Arg-Gly-Gly-Gly-R2其中，R2表示的为优选地，本专利技术上述用于制备式(Ⅰ)所示的化合物的药盒中，所述药盒的试剂包括：1～5摩尔份式(Ⅱ)所示的化合物和1摩尔份三氯化铝。进一步优选地，本专利技术上述用于制备式(Ⅰ)所示的化合物的药盒中，所述药盒的试剂包括：3摩尔份式(Ⅱ)所示的化合物和1摩尔份三氯化铝。进一步优选地，本专利技术上述用于制备式(Ⅰ)所示的化合物的药盒中，所述药盒的试剂还包括：醋酸-醋酸钠缓冲液。进一步优选地，本专利技术上述用于制备式(Ⅰ)所示的化合物的药盒中，
所述醋酸-醋酸钠缓冲液为0.4～0.6mol/L，pH为3.0～5.0。进一步优选地，本专利技术上述用于制备式(Ⅰ)所示的化合物的药盒中，所述醋酸-醋酸钠缓冲液为0.5mol/L，pH为4.0。进一步优选地，本专利技术上述用于制备式(Ⅰ)所示的化合物的药盒中，式(Ⅱ)所示的化合物和所述三氯化铝均为冻干粉。本专利技术还提供一种上述药盒的制备方法，包括以下步骤：(1)将选定摩尔份的式(Ⅱ)所示的化合物溶于所述醋酸-醋酸钠缓冲液中，得溶液A，备用；(2)将选定摩尔份的氯化铝溶于所述醋酸-醋酸钠缓冲液中，得溶液B，备用；(3)将所述溶液A和所述溶液B混合均匀，得溶液C，备用；(4)将所述溶液C进行无菌过滤，分装于容器中，冷冻干燥，即得。进一步优选地，本专利技术上述制备方法中，所述容器为管制抗生素瓶。本专利技术还提供上述制备方法制备得到的药盒。本专利技术还提供上述药盒在制备式(Ⅰ)所示的化合物中的应用。本专利技术还提供一种式(Ⅰ)所示的化合物的制备方法，包括以下步骤：(a)将乙酸溶液加入至上述药盒中，溶解，然后加入乙腈和即配的18F水溶液，在80～110℃下密闭反应5～20min，冷却，得反应液；(b)将所述反应液加入水稀释，注入Sep-Pak C18分离小柱，用PBS和水冲洗所述Sep-Pak C18分离小柱，得标记产品；(c)用乙醇洗脱所述标记产品，用生理盐水稀释，无菌过滤，即得。优选地，本专利技术上述式(Ⅰ)所示的化合物的制备方法，包括以下步
骤：(a)将10～50μL质量分数为2～8％的乙酸溶液加入至上述药盒中，溶解，然后加入100～400μL乙腈和100～200μL即配的20～150mCi 18F水溶液，在80～110℃下密闭反应5～20min，冷却，得反应液；(b)将所述反应液加入水稀释，注入Sep-Pak C18分离小柱，用PBS和水冲洗所述Sep-Pak C18分离小柱，得标记产品；(c)用0.2～1mL乙醇洗脱所述标记产品，用生理盐水稀释，无菌过滤，即得。进一步优选地，本专利技术上述式(Ⅰ)所示的化合物的制备方法，包括以下步骤：(a)将20μL质量分数为5％的乙酸溶液加入至上述药盒中，溶解，然后加入200μL乙腈本文档来自技高网...

【技术保护点】
式(Ⅰ)所示的化合物：Val‑Asp‑Asn‑Lys‑Phe‑Asn‑Lys‑Glu‑Met‑Arg‑Asn‑Ala‑Tyr‑Trp‑Glu‑Ile‑Ala‑Leu‑Leu‑Pro‑Asn‑Leu‑Asn‑Asn‑Gln‑Asp‑Lys‑Arg‑Ala‑Phe‑Ile‑Arg‑Ser‑Leu‑Tyr‑Asp‑Asp‑Pro‑Ser‑Gln‑Ser‑Ala‑Asn‑Leu‑Leu‑Ala‑Glu‑Ala‑Lys‑Lys‑Leu‑Asn‑Asp‑Ala‑Gln‑Ala‑Pro‑Lys‑Asn‑Asp‑Arg‑Gly‑Gly‑Gly‑R1其中，R1表示的为

【技术特征摘要】
1.式(Ⅰ)所示的化合物：Val-Asp-Asn-Lys-Phe-Asn-Lys-Glu-Met-Arg-Asn-Ala-Tyr-Trp-Glu-Ile-Ala-Leu-Leu-Pro-Asn-Leu-Asn-Asn-Gln-Asp-Lys-Arg-Ala-Phe-Ile-Arg-Ser-Leu-Tyr-Asp-Asp-Pro-Ser-Gln-Ser-Ala-Asn-Leu-Leu-Ala-Glu-Ala-Lys-Lys-Leu-Asn-Asp-Ala-Gln-Ala-Pro-Lys-Asn-Asp-Arg-Gly-Gly-Gly-R1其中，R1表示的为2.一种用于制备式(Ⅰ)所示的化合物的药盒，其特征在于，所述药盒的试剂包括：1～10摩尔份式(Ⅱ)所示的化合物和1摩尔份三氯化铝，Val-Asp-Asn-Lys-Phe-Asn-Lys-Glu-Met-Arg-Asn-Ala-Tyr-Trp-Glu-Ile-Ala-Leu-Leu-Pro-Asn-Leu-Asn-Asn-Gln-Asp-Lys-Arg-Ala-Phe-Ile-Arg-Ser-Leu-Tyr-Asp-Asp-Pro-Ser-Gln-Ser-Ala-Asn-Leu-Leu-Ala-Glu-Ala-Lys-Lys-Leu-Asn-Asp-Ala-Gln-Ala-Pro-Lys-Asn-Asp-Arg-Gly-Gly-Gly-R2其中，R2表示的为3.根据权利要求2所述的用于制备式(Ⅰ)所示的化合物的药盒，其特征在于，所述药盒的试剂包括：1～5摩尔份式(Ⅱ)所示的化合物和1摩尔份
\t三氯化铝。4.根据权利要求2或3所述的用于制备式(Ⅰ)所示的化合物的药盒，其特征在于，所述药盒的试剂还包括：醋酸-醋酸钠缓冲液。5.根据权利要求4所述的用于制备式(Ⅰ)所示的...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨敏，徐宇平，潘栋辉，赵富宽，严骏杰，王立振，杨润琳，张波，
申请(专利权)人：江苏省原子医学研究所，
类型：发明
国别省市：江苏;32