一种CYP3A5*3的检测引物组合物、试剂盒及方法技术

技术编号:13555166 阅读:95 留言:0更新日期:2016-08-18 23:03
本发明专利技术涉及生物检测技术领域,尤其是涉及一种CYP3A5*3的检测引物组合物、试剂盒及方法,采用PNA Clamp LAMP技术,将PNA与LAMP法结合,利用PNA—A封闭rs776746的A位点,PNA‑G封闭rs776746的G位点,PNA‑I封闭高度相似基因CYP3A4,从而使得对应的LAMP反应无法继续,以此达到CYP3A5基因分型检测的目的。该发明专利技术具有的优点在于该方法步骤简单,特异性高,鉴定简便,成本低廉。

【技术实现步骤摘要】
201610298757

【技术保护点】
一种CYP3A5*3的检测引物组合物,包括:正向外侧引物F3:5’‑TACCACCCAGCTTAACGA‑3’(SEQ ID No.1);反向外侧引物B3:5’‑CCATACCCCTAGTTGTACG‑3’(SEQ ID No.2);正向内侧引物FIP:5’‑TCCAAACAGGGAAGAGATATTGAAAATGCTCTACTGTCATTTCTAACC‑3’(SEQ ID No.3);反向内侧引物BIP:5’‑GCTCCTGTGTGAGACTCTTGCACACACAGCAACCTTAGG‑3’(SEQ ID No.4);以及用于封闭rs776746A位点的肽核酸序列PNA‑A:5’‑CAATATCTCTTCCCTGT‑3’(SEQ ID No.5);用于封闭rs776746G位点的肽核酸序列PNA‑G:5’‑AGTATCTCTTCCCTGTT‑3’(SEQ ID No.6);用于封闭CYP3A4的肽核酸序列PNA‑I:5’‑TTGTTTGGCCCACATTA‑3’(SEQ ID No.7)。

【技术特征摘要】
1.一种CYP3A5*3的检测引物组合物,包括:正向外侧引物F3:5’-TACCACCCAGCTTAACGA-3’(SEQ ID No.1);反向外侧引物B3:5’-CCATACCCCTAGTTGTACG-3’(SEQ ID No.2);正向内侧引物FIP:5’-TCCAAACAGGGAAGAGATATTGAAAATGCTCTACTGTCATTTCTAACC-3’(SEQ ID No.3);反向内侧引物BIP:5’-GCTCCTGTGTGAGACTCTTGCACACACAGCAACCTTAGG-3’(SEQ ID No.4);以及用于封闭rs776746A位点的肽核酸序列PNA-A:5’-CAATATCTCTTCCCTGT-3’(SEQ ID No.5);用于封闭rs776746G位点的肽核酸序列PNA-G:5’-AGTATCTCTTCCCTGTT-3’(SEQ ID No.6);用于封闭CYP3A4的肽核酸序列PNA-I:5’-TTGTTTGGCCCACATTA-3’(SEQ ID No.7)。2.一种CYP3A5*3的检测试剂盒,其特征在于:包括权利要求1所述的引物和肽核酸序列。3.根据权利要求2所述的CYP3A5*3的检测试剂盒,其特征在于:还包括dNTP、缓冲液、Bst聚合酶和超纯水。4.根据权利要求3所述的CYP3A5*3的检测试剂盒,其特征在于:所述检测试剂盒分为两个反应体系,分别记为反应体系A和反应体系G:反应体系A中包括F3、B3、FIP、BIP、PNA-A、PNA-I、dNTP、缓冲液、Bst聚合酶和超纯水;反应体系G中包括F3、B3、FIP、BIP、PNA-G、PNA-I、dNTP、缓冲液、Bst聚合酶和超纯水。5.根据权利要求4所述的CYP3A5*3的检测试剂盒,其特征在于:所述两个反应体系中还包括用于显示体系颜色的指示剂。6.根据权利要求5所述的CYP3A5*3的检测试剂盒,其特征在于:所述指示剂为羟基萘酚蓝。7.根据权利要求6所述的CYP3A5*3的检测试剂盒,其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员:汪大为张井存
申请(专利权)人:北京晋祺生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:北京;11

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