一种金黄色葡萄球菌疫苗及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种金黄色葡萄球菌疫苗及其制备方法，利用辐射对金黄色葡萄球菌进行灭活处理，并加入佐剂，在使其丧失增殖活性的同时，保留其代谢活性，与热灭活和甲醛等化学灭活相比，使菌体表面的蛋白与多糖抗原得到了良好保留，可诱导全面、显著的免疫应答与免疫保护。制备方法简单、便捷，适用于金黄色葡萄球菌疫苗的大规模制备，除用于制备金葡菌疫苗外，还可作为生物威胁或新出现病原体的快速应答策略，尤其是对于免疫应答机制尚不明确的病原体，可采用此种方法迅速得到候选疫苗，缩短了研发时间，并降低研发成本。

【技术实现步骤摘要】
201610227955

【技术保护点】
一种金黄色葡萄球菌疫苗的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)菌体培养：将金葡菌菌液接种于平板培养基上，进行菌落培养后，再将菌落接种于含有胰蛋白胨肉汤的培养基中进行对数培养；(2)菌体提取：将步骤(1)中所述培养后的菌液进行离心，去除培养基，得到菌体沉淀；用磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤并重悬至菌体浓度为5×108/ml‑2×109/ml；(3)菌体处理：将步骤(2)中得到的菌液置于低温环境下，用γ射线、紫外线或X射线进行辐射处理后，进行菌体部分保留代谢活性检验和无增殖活性检验；(4)疫苗配制：再将步骤(3)中检验合格的菌液加入佐剂，充分混合，得到金黄色葡萄球菌疫苗；所述佐剂为氢氧化铝或磷酸铝溶液。

【技术特征摘要】
1.一种金黄色葡萄球菌疫苗的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)菌体培养：将金葡菌菌液接种于平板培养基上，进行菌落培养后，再将菌落接种于含有胰蛋白胨肉汤的培养基中进行对数培养；(2)菌体提取：将步骤(1)中所述培养后的菌液进行离心，去除培养基，得到菌体沉淀；用磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤并重悬至菌体浓度为5×108/ml-2×109/ml；(3)菌体处理：将步骤(2)中得到的菌液置于低温环境下，用γ射线、紫外线或X射线进行辐射处理后，进行菌体部分保留代谢活性检验和无增殖活性检验；(4)疫苗配制：再将步骤(3)中检验合格的菌液加入佐剂，充分混合，得到金黄色葡萄球菌疫苗；所述佐剂为氢氧化铝或磷酸铝溶液。2.根据权利要求1所述的金黄色葡萄球菌疫苗的制备方法，其特征在于：步骤(1)所述的平板培养基为血平板，培养温度为37℃，培养时间为24h。3.根据权利要求1所述的金黄色葡萄球菌疫苗的制备方法，其特征在于：步骤(1)所述对数培养为振荡培养，转速为220rpm，温度为37℃，培养时间为16-20...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈玉保，李竹石，魏宪义，蒋德席，
申请(专利权)人：四川远大蜀阳药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51