本发明专利技术公开了miR‑200c‑3p、miR‑200c‑3p模拟物或miR‑200c‑3p激动剂在制备CXCR6抑制剂中的用途。本发明专利技术还公开了一种CXCR6抑制剂，它是以miR‑200c‑3p、miR‑200c‑3p模拟物或miR‑200c‑3p激动剂为活性成分，加上药学上可接受的辅料或者辅助性成分制备而成的制剂。本发明专利技术miR‑200c‑3p、miR‑200c‑3p模拟物或miR‑200c‑3p，均可以下调CXCR6的表达，抑制乳腺癌的增殖、侵袭、迁移和体内成瘤等生物学活性，可以制备成为CXCR6抑制剂，治疗肿瘤，具有良好的临床应用前景。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及miR-200c-3p、miR-200c-3p模拟物或miR-200c-3p激动剂在制备CXCR6抑制剂中的用途。
技术介绍
近年来有研究显示肿瘤细胞的增殖、侵袭、转移和血管生成等生物学特性与炎症反应的趋化因子相关。趋化因子具有相应的受体，趋化因子受体表达于参与炎症反应的白细胞表面，通过趋化因子的浓度梯度介导白细胞向炎症部位的迁移。目前发现多种趋化因子受体如CXCR4、CXCR5、CXCR6等在肿瘤细胞中的表达，其中，CXCR6是一新近发现的趋化因子受体，它在前列腺癌、卵巢上皮癌、黑色素瘤、结直肠腺癌、乳腺癌等多种癌组织细胞中的表达与相应正常组织细胞的表达有统计学差异，并且还发现CXCR6与癌细胞的侵袭、转移等特性呈正相关。但是，抑制CXCR6是否能够治疗肿瘤是未知的。
技术实现思路
本专利技术提供了miR-200c-3p及其激动剂的用途。本专利技术提供了miR-200c-3p、miR-200c-3p模拟物或miR-200c-3p激动剂在制备CXCR6抑制剂中的用途。所述CXCR6抑制剂是抗肿瘤药物。优选地，所述抗肿瘤药物是抑制乳腺癌的增殖、侵袭、迁移和/或体内成瘤性的药物。所述抗肿瘤药物是抗乳腺癌、和抗肿瘤组织中表达CXCR6同时低表达或无表达miR-200c的所有恶性肿瘤的药物，包括头颈部肿瘤(鼻咽癌、口腔癌、口咽癌、下咽癌、喉癌、甲状腺癌、副鼻窦癌)、脑瘤、非小细胞肺癌、食管癌、胃癌、肝癌、胰腺癌、结直肠癌、宫颈癌、前列腺癌、卵巢上皮癌、恶性黑色素瘤、皮肤癌、骨及软组织肉瘤等恶性肿瘤。所述miR-200c-3p的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。所述miR-200c-3p模拟物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。所述miR-200c-3p激动剂是Agomir或EndoFectinTM-Plus转染试剂。本专利技术还提供了CXCR6抑制剂在制备抗肿瘤药物中的用途；优选地，所述药物是抗乳腺癌的药物。本专利技术还提供了一种CXCR6抑制剂，它是以miR-200c-3p、miR-200c-3p模拟物或miR-200c-3p激动剂为活性成分，加上药学上可接受的辅料或者辅 助性成分制备而成的制剂。所述miR-200c-3p的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。所述miR-200c-3p模拟物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。所述miR-200c-3p激动剂是Agomir。本专利技术CXCR6抑制剂可以抑制CXCR6的表达，进而抑制乳腺癌的增殖、侵袭、迁移和体内成瘤性，miR-200c-3p、miR-200c-3p模拟物或miR-200c-3p，均可以下调CXCR6的表达，可以制备成为CXCR6抑制剂，治疗肿瘤，具有良好的临床应用前景。显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。附图说明图1 CXCR6和miRNA在正常乳腺上皮细胞及三种乳腺癌细胞中的自然表达情况。每个细胞系有4个柱子，从左至右均分别代表CXCR6、miR-200c-3p、miR-375和miR-203的表达。CXCR6的相对表达量(黑色柱子)对应左侧纵坐标；其余miRNA的相对表达量(条纹柱子)对应右侧纵坐标。图2自然状态下正常乳腺上皮细胞及三种乳腺癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力。(A)正常乳腺上皮细胞及三种乳腺癌细胞自然情况下的增殖情况。***代表MDA-MB-231与其他3个细胞系相比，P<0.01；(B)侵袭实验：正常乳腺上皮细胞及三种乳腺癌细胞侵透Matrigel胶并穿过微孔膜后，粘附于微孔膜上，采用Giemsa对细胞进行染色，并于显微镜观察计数，记录10个100倍镜下细胞数，进行平均数和方差计算。图为典型照片(上)和平均计数结果(下)：(C)迁移实验：正常乳腺上皮细胞及三种乳腺癌细胞穿过微孔膜后，粘附于微孔膜上，采用Giemsa对细胞进行染色，并于显微镜观察计数，记录10个100倍镜下细胞数，进行平均数和方差计算。图为典型照片(上)和平均计数结果(下)。图3在MDA-MB-231细胞中过表达miR-200c-3p、miR-375及shRNA沉默CXCR6后CXCR6在蛋白水平和mRNA水平的表达情况。所有图中，BC均为自然状态下的231细胞，NC-mi均为mimic阴性对照，200c-mi代表mimic转染miR-200c-3p的实验组，375-mi代表mimic转染miR-375的实验组，sh-NC为shRNA的阴性对照，sh-R6为shRNA干扰CXCR6表达的实验 组，200c-mi、375-mi和sh-CXCR6均以BC为空白对照。(A)mimic转染miR-200c-3p后，miR-200c-3p的表达情况；(B)mimic转染miR-375后，miR-375的表达情况；(C)mimic及shRNA转染MDA-MB-231细胞后CXCR6在蛋白水平(上)和mRNA水平(下)的表达情况。图4过表达miR-200c-3p、miR-375及shRNA沉默CXCR6后MDA-MB-231的增殖、侵袭和迁移情况。BC为MDA-MB-231细胞空白对照组，NC-mi为mimic阴性对照组，200c-mi为MDA-MB-231细胞中mimic过表达miR-200c的实验组，sh-NC为shRNA阴性对照组，sh-R6为MDA-MB-231细胞中shRNA干扰CXCR6表达组。(A)MDA-MB-231细胞的增殖实验，*代表200c-mi与NC-mi及BC相比，P<0.001，#代表sh-R6于sh-NC及BC相比，P<0.001；(B)侵袭实验：上述各组细胞穿过微孔膜后，粘附于微孔膜上，采用Giemsa对细胞进行染色，并于显微镜观察计数，记录10个100倍镜下细胞数，进行平均数和方差计算。图为典型照片(上)和平均计数结果(下)；(C)迁移实验：上述各组细胞穿过微孔膜后，粘附于微孔膜上，采用Giemsa对细胞进行染色，并于显微镜观察计数，记录10个100倍镜下细胞数，进行平均数和方差计算。图为典型照片(上)和平均计数结果(下)。图5在MDA-MB-231细胞中过表达miR-200c-3p、miR-375及shRNA沉默CXCR6后AKT/mTOR通路中关键分子的表达情况。BC为自然状态下的231细胞，NC-mi为mimic阴性对照组，200c-mi代表mimic转染miR-200c-3p的实验组，375-mi代表mimic转染miR-375的实验组，sh-NC为转染shRNA的阴性对照，sh-R6为shRNA干扰CXCR6表达的实验组。(A)上述各组细胞中AKT/mTOR通路的关键分子Akt、p40S6K和4E-BP-1以及它们的磷酸化水平(p-Akt、p-p40S6K和p-4E-BP-1)的表达情况。具体实施方式实施例1 miR-200c-3p及其激动剂与CXCR6表达以及乳腺癌的关系一、实验材料和检测方法1、实本文档来自技高网...
【技术保护点】
miR‑200c‑3p、miR‑200c‑3p模拟物或miR‑200c‑3p激动剂在制备CXCR6抑制剂中的用途。
【技术特征摘要】
2015.03.12 CN 20151010894301.miR-200c-3p、miR-200c-3p模拟物或miR-200c-3p激动剂在制备CXCR6抑制剂中的用途。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述CXCR6抑制剂是抗肿瘤药物。3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于：所述抗肿瘤药物是抗乳腺癌、和抗肿瘤组织中表达CXCR6同时低表达或无表达miR-200c的所有恶性肿瘤包括头颈部肿瘤(如，鼻咽癌、口腔癌、口咽癌、下咽癌、喉癌、甲状腺癌、副鼻窦癌)、脑瘤、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、食管癌、胃癌、肝癌、胰腺癌、结直肠癌、宫颈癌、前列腺癌、卵巢上皮癌、恶性黑色素瘤、皮肤癌、骨及软组织肉瘤等恶性肿瘤的药物。4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述miR-200c-3p的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。5.根据权利要...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈念永，
申请(专利权)人：四川大学华西医院，
类型：发明
国别省市：四川;51
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