本发明专利技术涉及轻化工领域，旨在提供一种葡萄座腔菌属的菌株Pseudofusicoccum sp.F10及其印染应用。该真菌F10能产生靛蓝色素，该色素为带C-CH3类取代基、含香酸类化合物，色素在中性及偏碱性水溶液中最大吸收峰位于620nm处，色素在酸性水溶液中沉淀；对氧化剂不敏感，还原剂亚硫酸钠对色素有破坏作用；印染应用时对棉织品印染效果好，媒染剂NaCl有助于染色效果。本发明专利技术得到的新型天然染料安全环保，本发明专利技术不受地域、环境的限制，真菌色素的重现性好，生物培养方法使得产量大幅度提高，更易实现工业化。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术是关于轻化工领域，特别涉及一株产靛蓝色素葡萄座腔菌属真菌Pseudofusicoccumsp.FlO及其印染应用。
技术介绍
色素即着色剂，是印染工业和食品添加剂的一个重要组成部分，它可以改善印染物品和食品的色泽，是决定产品品质的关键因素之一。产品的颜色，是产品给消费者视觉的第一感官印象，直接影响到产品的销售业绩，因此产品具有安全的色调和色泽对于产品是非常重要的。色素一般分为合成色素和天然色素。虽然合成色素占据市场的主导地位，但是随着合成色素具有毒性、致癌性，甚至可能导致对重要机体的损伤的报道，合成色素的安全性成为消费者关注的最大热点。随着人们生活水平的提高及保健意识的增强，同时由于天然色素具有安全可靠、无毒副作用、色调自然、抗肿瘤及多功能性等优点，使得天然色素越来越受到关注。天然色素按其来源可分为3类:植物色素、动物色素和微生物色素。动植物色素具有季节性和机体本身限制等不利因素，而微生物色素是从微生物中提取，不受资源、环境和空间的限制，具有植物色素和动物色素所不可比拟的优越性。微生物色素的大量发酵不仅降低了生产成本，而且节约了原材料，保护了生态环境。在自然界中微生物能产生色素的种类非常丰富，但在发酵工业中得到应用的为数不多，国际上被正式批准生产的天然蓝色素种类很少，而用微生物发酵生产的蓝色素更是罕见。蓝色素是三个基本色调(红、黄、蓝)之一，其中天然的红、黄品系色素来源较多，天然蓝色素则较为罕见，它可与另两种天然色素搭配成多种色素，极大的丰富了天然色素的种类。在目前为数不多的报道所提及的天然蓝色素中，有的具有抑菌作用(主要对革兰氏阳性菌)，如放线紫素(Actinhordin)和石蕊杀菌素(Litmocidin);有的具有多种营养保健功能，如花青素(Anthocyanidin)。因此，开发天然蓝色素具有重要的理论意义和广阔的应用前景。关于产靛蓝色素葡萄座腔菌属真菌Pseudofusicoccumsp.FlO及其印染应用，未见有报道。
技术实现思路
本专利技术涉及一株产靛蓝色素葡萄座腔菌属真菌Pseudofusicoccumsp.FlO(保藏单位:中国典型培养物保藏中心；保藏时间:2015年5月12 ;保藏地址:武汉市武昌珞珈山(武汉大学)，邮编为430072 ;保藏编号:CCTCC NO:M 2015293，分类属葡萄座腔菌科，葡萄座腔菌属， 所述的一株产靛蓝色素葡萄座腔菌属真菌Pseudofusicoccum sp.FlO(保藏编号:CCTCC Ν0:Μ 2015293)，其特征在于，该菌气生菌丝的着色随真菌和生长由灰白色变为黑色，在培养皿(PSA,马铃薯蔗糖琼脂培养其)背面颜色由逐渐变蓝灰色，最终变为蓝黑色，气生菌丝顶端形成头状孢子梗，产生透明分生孢子。所述的一株产靛蓝色素葡萄座腔菌属真菌Pseudofusicoccum sp.F10(保藏编号:CCTCC NO:M 2015293)，其特征在于，其ITS序列:ACCTACCGGGATTAGGGTCTCTTCCCGAGCCCACTCTCCAACCCTTTGTGTACCTACCTCTGTTGCTTTGGCGGGCCGCGGTTCTCCGCGGCCGGCCCCCTAGCCGGGGCTGGCCTGCGCCCGCCAGAGGACCACAAAACTCCAGTCAGTGAACTTTGCTGTCTGATATAAATTCAATAAACTAAAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACATTGCGCCCTTTGGTATTCCGAAGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATTACACCCCTCAAGCTCTGCTTGGTATTGGGCGGCGTCCTCTCCGGACGCGCCTCAAAGACCTCGGCGGTGGCGTCTTGCCTCAAGCGTAGTAGAAAACACCTCGCTTTGGAGGACGGGACGACCGCTCGCCGGACGAACCTTTGAATTCATTTTCCTAGGTTGACCTCGGATCAGGTAGGGATACCCGCTGAACTTAAGCATATCAAAAGGCCGGAGGAA 菌株ITS基因序列在NCBI数据为中分析比对，鉴定种属于葡萄座腔菌科，葡萄座腔菌属真菌。所述的一株产靛蓝色素葡萄座腔菌属真菌Pseudofusicoccum sp.F10(保藏编号:CCTCC Ν0:Μ 2015293)产色素的方法，以20%的土豆汁为基础，分别加入2%的葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、乳糖、可溶性淀粉，在固体培养基上培养5d的菌体为种子，用打孔器接种直径为6mm、菌龄一致的FlO菌块于装有10mL不同碳源的液体培养基的250mL三角瓶中，室温25 0C、需氧150rpm/min培连续培养1d，产生菌发酵液;观察菌丝量及色素合成情况，结果表明，碳源为甘油、乳糖时，不产色素;碳源为蔗糖、淀粉、麦芽糖时，产色素量较好。所述的一株产靛蓝色素葡萄座腔菌属真菌Pseudofusicoccum sp.F10(保藏编号:CCTCC Ν0:Μ 2015293)产色素分离的步骤包括: (I)菌发酵液经离心收集菌丝，菌丝冷冻干燥，加入适量酸性二氯甲烷，震荡浸提，取上清进行萃取，采用旋转蒸发仪除去二氯甲烷，获得色素粗品。(2)硅胶柱层析:利用酸性石油醚进行压柱;采用干法上样，即样品中加入少量硅胶，真空悬干上样;加入少量酸性石油醚，进行压柱;洗脱先用2倍柱体积的酸性石油醚，接着酸性石油醚:二氯甲烷(4:1，2:1，2:3，0:1)2倍柱体积进行洗脱，接着酸性二氯甲烷:甲醇(500:1、250:1、200:1、100:0.8、100:1、100:1.5、50:1)洗脱收集。(3)葡聚糖sephadex LH-20层析:sephadex LH-20在70%乙醇中浸泡24h活化；ddH20清洗乙醇，除去ddH20;甲醇洗涤sephadex LH-20，除去甲醇；甲醇:二氯甲烧(1:1)溶胀s印hadex LH-20，30min；柱子中加入部分洗脱剂，把溶胀好的凝胶搅拌均匀，注入柱中； 静置30min，使其气泡自然析出；用2-3倍柱体积的洗脱剂平衡柱子;上样(样品溶解在尽量少的二甲基甲酰胺)；洗脱，先用甲醇:二氯甲烷(1:1)的比例冲洗，接着逐步增加甲醇的比例，直至纯甲醇洗脱;收集产物即获得纯靛蓝色素； 产物经浓缩干燥后，利用HPLC-MS、H谱、红外等进行产物鉴定。所述的一株产靛蓝色素葡萄座腔菌属真菌Pseudofusicoccum sp.F10(保藏编号:CCTCC Ν0:Μ 2015293)产色素的结构特征经以下实验获得: 制备色素的水溶液，用紫外可见分光光度计于400-800nm进行光谱扫描，得蓝色素吸收光谱，蓝色素最大吸收峰值为620nm;色素在酸性水溶液中沉淀。色素经氧化还原环境稳定性试验表明，该化全物对氧化剂不敏感，能在0.2-0.6%的H2O2溶液中，室温静置Ih后，测最大吸收峰的吸光度值，计算残存率。结果表明该浓度氧化剂H2O2对该色素没有影响;但还原剂亚硫酸钠本文档来自技高网...
【技术保护点】
一株产靛蓝色素葡萄座腔菌属真菌Pseudofusicoccumsp. F10，其保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号：CCTCC NO ：M 2015293。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：王飞，赵丽芳，罗海澜，马翠云，刘少阳，魏永义，
申请(专利权)人：漯河医学高等专科学校，
类型：发明
国别省市：河南;41
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