本发明专利技术公开了一种菲降解菌Acinetobacter tandoii LJ-5及其应用。本发明专利技术分离得到一株以菲为碳源的降解菌株，根据菌株形态、生理特征、革兰氏反应、16S rDNA基因测序分析、DNA-DNA杂交实验及系统发育分析，鉴定该菌株为Acinetobacter tandoii种的不同株系并将其命名为Acinetobacter tandoii LJ-5。该菌能够利用菲作为唯一碳源并且很快地降解菲：在菲初始浓度为100-200mg·L-1环境下培养3天后，降解率均可达80％以上；在菲的初始浓度为400-1000mg·L-1环境下培养7天后，降解率均可达到60％以上；该菌株在生物修复方面具有较好的应用潜力。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物
，具体设及一种菲降解菌Acinetobacter tandoii LJ-5 及其应用。
技术介绍
多环芳控(PA化)是受到广泛关注的一类环境污染物质，在环境中普遍存在且不断 积累。菲(phenant虹ene)是一种S环芳控，它与PAHs的致癌性有着非常密切的关系，凭借其 独特的化学结构，菲成为PAHs研究的模式化合物化i et al. ,2010;刘爽等，2013)。由于菲 具有持久性、致癌、致崎、致突变性及生物累积性等特性，能够对生态环境和人类健康构成 重大危害(杨轩等，2012)。 环境中有毒有害有机污染物的自然衰减主要依赖相关微生物代谢作用，生物修复 技术具有成本低、效果好、无二次污染等优点，因此该方法是目前菲污染修复最具潜力的修 复手段（Samanta et al.,1999;杨秀虹等，2012)。目前，已报道的菲降解菌株包括 Agmenellum sp.、Aeromonas sp.、Alcaligenes sp.、Acinetobacter sp.、Bacillus sp.、 Berjerincki曰 sp.、Burkholderi曰 sp.、Coryneb曰cterium sp.、Cyclotrophicus sp.、 Flavobacterium sp.、Micrococcus sp.、Moraxella sp.、Mycobacterium sp.、 Nocardioides sp.、Pseudomonas sp.、Lutibacterium sp.、Rhodococcus sp.、 Streptomyces sp.、Sphingomonas sp.、Stenotrophomonas sp.、Vibrio sp .、 Paenibacillus sp.等(Zhao et al.,2008)。近年来国内外科研工作者已从自然环境中分 离得到一些菲降解菌，并对其降解性能进行初步研究(侯宁等，2013)。倪雪等从多环芳控污 染区植物体内分离得到两株具有降解菲能力的寡养单胞菌属（Stenotrophomonas sp.)和 假单胞菌属（Pseudomonas sp.)，该两株菌在7d内可降解90 %无机盐培养基中的菲 (IOOmg . [1)(倪雪等，2013)。邓军等从长期受PAHs污染的±壤中分离得到1株菲降解菌氧 化节杆菌(Arthrobacter oxydans)，在菲初始质量浓度为50mg ? [1的无机盐培养液中培养 5d后，菲降解率为60%左右(邓军等，2010)。田志刚等从胜利油田附近石油污染±壤采集± 样，筛选到能W菲为唯一碳源的芽抱杆菌属，在菲初始浓度为200mg ? [1时，培养96h后的菲 降解率为98.36 % (田智刚等，2011)。目前，由于工矿业、农业等人为活动W及±壤环境背景 值高等因素已经造成了环境中多环芳控的严重污染及严重超标，并且化工类园区及周边± 壤、采油区、采矿区、污水灌概区的主要污染物都为多环芳控巧Ij芳等，2011)。因此，筛选出 能有效降解高浓度菲的菌株更具应用价值。
技术实现思路
本专利技术的第一个目的是提供一种菲降解菌Acinetobacter tandoii LJ-5,该菌是 从山东北部某石油污水处理厂中采集活性污泥，W高浓度菲为碳源进行长期驯化，通过多 次筛选和分离纯化得到高效的、能降解高浓度菲的菲降解菌;Acinetobacter tandoii LJ-5于2016年3月1日保藏于广东省微生物菌种保藏中屯、(GDMCC)，地址:广州市先烈中路100号 大院59号楼5楼，广东省微生物研究所，保藏编号为:GDMCC No:60010。 本专利技术的菲降解菌Acinetobacter tandoii LJ-5的菌学特性描述如下： 该菌经活化W后，在3(TC有氧的条件下在固体营养培养基制成的平板上生长24h 后，能形成直径为0.5-2.Omm灰白色、圆形、表面光滑、微微向上凸起的、不透明、边缘整齐、 无芽抱、无鞭毛、革兰氏染色呈阴性、菌株个体为杆状的菌落。该菌为专性厌氧菌，其细胞尺 寸大概为0.7-1.0 X 1.0-1.5皿。其细胞的透射电子显微镜图见图1。 分子生物学特性:该菌的DNA G+C含量为41.0%，运个含量正好落在已经报道过的 不动杆菌属的细菌DNA G+C含量所在的范围之内；扩增该菌的16s rRNA基因并测序，得到如 SEQ ID NO. 1所示的DNA序列，利用该序列采用邻位相接法和最小进化法构建系统发育树的 结果表明，该菌与Acinetobacter tandoii DSM 1497〇t同源性最高，达97.7% ;DNA-DNA杂 交实验表明该菌和Acinetobacter tandoii DSM 1497〇t杂交结果为90.11±0.8%，高于杂 交阀值70%，说明该菌在分子生物学层面上是属于Acinetobacter tandoii同一个种的不 同株系，因此将本专利技术的菲降解菌LJ-5命名为Acinetobacter tandoii LJ-5。[000引 Acinetobacter tandoii LJ-5应用于菲降解的实验表明：在30°C，pH 7.0,不添加 化Cl的液体营养培养基的培养条件下，Acinetobacter tandoii LJ-5能够很快地降解菲， 在菲初始浓度为100-200mg ? 1/1的无机盐培养基培养3天后，降解率均可达80% W上;在菲 的初始浓度在400-1000111肖-[1的无机盐培养基培养7天后，降解率均可达到60%^上;说明 Acinetobacter tandoii LJ-5是一种降解菲及耐受菲能力均很强的菌株。菲常常作为多环 芳控类的模式化合物，因此可W预见该菌对多环芳控具有较好的耐受性和降解性。因此，本 专利技术的第二个目的是提供菲降解菌Acinetobacter tandoii LJ-5在降解多环芳控中的应 用，进一步的，菲降解菌Acinetobacter tandoii LJ-5在降解菲中的应用。 本专利技术的Acinetobacter tandoii LJ-5是在活性污泥中分离并鉴定的新型不动 杆菌属的菌株，关于Acinetobacter tando i i对PAHs降解研究国内外还未见报道； Acinetobacter tandoii LJ-5能W高浓度菲作为碳源从而有效降解，该菌在菲初始浓度为 50-200111旨-[1环境下培养3天后，降解率均可达80%^上;在菲的初始浓度为400-1000111邑-[1环境下培养7天后，降解率均可达到60% W上;该菌是一种降解菲及耐受菲能力均很强的 菌株，对多环芳控适应性强;在多环芳控污染环境的生物修复中具有很好的应用前景。 本专利技术的Acinetobacter 1:andoii LJ-5于2016年3月1日保藏于广东省微生物菌 种保藏中屯、(GDMCC)，地址:广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，广东省微生物研究所，保 藏编号为:GDMCC No:60010。【附图说明】图1是Acinetobacter tandoii LJ-5的形态，其中（a)为固体营养培养基上生长的 Acineto本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种菲降解菌Acinetobacter tandoii LJ‑5，其保藏编号为：GDMCC No：60010。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：李继兵，罗春玲，李军，张干，
申请(专利权)人：中国科学院广州地球化学研究所，
类型：发明
国别省市：广东;44
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