特异于FCRN的抗体制造技术

本发明专利技术公开涉及特异于FcRn的抗体、包含其的制剂、各自在疗法中的用途、表达并可选地配制所述抗体的方法、编码这些抗体的DNA及包含所述DNA的宿主。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】本专利技术公开涉及特异于FcRn的抗体、包含其的制剂、各自在疗法中的用途、表达并可选地配制所述抗体的方法、编码这些抗体的DNA及包含所述DNA的宿主。FcRn是膜蛋白FcRn的α链与β2微球蛋白(β2M)的非共价复合体。在成年哺乳动物中，FcRn作为结合并挽救IgG亚型抗体的受体在维持血清抗体水平上起到关键作用。IgG分子被内皮细胞内吞，并且如果其结合了FcRn则重新回收而从细胞中转移出去，进入例如循环。相反，未结合FcRn的IgG分子会进入细胞，并成为溶酶体途径的靶标而被降解。其中His435突变为丙氨酸的变体IgG1导致选择性丢失FcRn结合，并显著降低血清半衰期(Firan等人2001,InternationalImmunology13:993)。有假说认为FcRn是至少部分由自身抗体引起的特定自身免疫障碍的潜在治疗靶标。目前对所述特定障碍的治疗方法包括血浆置换。有时同时采用血浆置换和免疫抑制疗法以长期控制所述疾病。血浆置换是最快移除有害自身抗体的短期方案。然而，抑制免疫系统产生自身抗体也是可取的，例如通过使用药物如泼尼松、环磷酰胺、环孢菌素、霉酚酸酯、利妥昔单抗或其混合物。能通过血浆置换治疗的疾病的实例包括：格林-巴利综合征；慢性炎症性脱髓鞘性多发性神经病；肺出血肾炎综合征；高粘滞综合征；冷球蛋白血症；副蛋白血症；华氏巨球蛋白血症；重症肌无力；血栓性血小板减少性紫癜(TTP)/溶血性尿毒症综合症；韦格纳肉芽肿；兰伯特-伊顿综合征；抗磷脂抗体综合征(APS或APLS)；显微镜多血管炎；移植肾中复发性局灶节段性肾小球硬化；HELLP综合征；PANDAS综合征；雷弗素姆病；白塞氏综合征；HIV相关的神经病；在新生儿及婴幼儿中的Graves病；寻常型天疱疮；多发性硬化症、横纹肌溶解症和自身免疫疾病。血浆置换有时被用作挽救疗法用于移除含有Fc的治疗剂，例如在需要减轻严重副反应的紧急情况下。尽管血浆置换在特定医疗条件下是有用的，但该疗法可能有潜在的风险和并发症。插入相当大的静脉导管可导致出血、肺穿刺(取决于导管插入位点)，且如果导管置入时间过长，可导致感染和/或对静脉的损坏，这样就限制了重复此过程的可能性。此过程还有其他相关的并发症，例如当患者血液流出身体通过血浆置换设备时，血液有凝结的倾向。为减少这种倾向，一个通用的操作流程是在血液流过循环线路的同时输注柠檬酸盐。柠檬酸盐结合血液中的钙，而钙对于血液凝结是关键。柠檬酸盐对于防止血液凝结十分有效，然而，使用它可能导致钙水平降低，甚至危及生命。这一点可由沃斯特克氏征或特鲁索氏征的症状而检测到。为防止这种并发症，在患者进行血浆置换的同时静脉内输注钙；此外，还可经口施用钙补充剂。此过程的其他并发症包括：低血压；潜在的暴露于血液制品(这会伴随有输血反应或输血传染疾病风险)；患者免疫系统受抑制以及出血或更换针头导致的出血或血肿。此外，提供血浆置换的机构有限，此过程亦非常昂贵。血浆置换的一个备选方案为静脉注射免疫球蛋白(intravenousimmunoglobulin，IVIG)，这是一种含有提取自数千名献血者血浆的混合多克隆IgG的血液制品。该疗法在静脉内施用，持续时间区段为2周至3个月。IVIG治疗的并发症包括头痛、皮炎、治疗剂产品污染导致的病毒感染，如HIV或肝炎病毒感染、肺水肿、过敏反应、急性肾衰竭、静脉血栓和无菌性脑膜炎。因此，对那些更少侵入并让患者能较少发生医疗并发症的自身免疫障碍疗法有显著却未满足的需求。这样，阻断或减少IgG对FcRn结合的试剂可用于治疗或预防所述自身免疫和炎性疾病。抗-FcRn抗体于在先专利WO2009/131702、WO2007/087289和WO2006/118772中有所描述。然而，仍然有对改进的抗-FcRn抗体的需要。专利技术概述因此，在一方面，提供了抗-FcRn抗体或其结合片段，其包含重链或具有可变区的重链片段，其中所述可变区包含一个、两个或三个CDR，其独立地选自SEQIDNO:1、SEQIDNO:2和SEQIDNO:3，例如，其中CDRH1为SEQIDNO:1、CDRH2为SEQIDNO:2而/或CDRH3是SEQIDNO:3。因此，在一个实施方式中，CDRH1为SEQIDNO:1并且CDRH2为SEQIDNO:2，或者CDRH1是SEQIDNO:1并且CDRH3是SEQIDNO:3，或者CDRH2为SEQIDNO:2并且CDRH3是SEQIDNO:3。在另一方面，提供了抗体或片段，其包含本文限定的序列或序列组合，例如同源对可变区。本专利技术公开的抗体阻断IgG对FcRn的结合，这被认为可用于减少FcRn的一种或多种生物学功能，包括缩短循环抗体的半衰期。这样有益之处在于，其允许患者更快速地清除抗体，如自身抗体。因此，本专利技术公开的抗体减少IgG对FcRn的结合。重要的是，本专利技术的抗体能够结合人FcRn，例如在pH6和pH7.4都有类似的高结合亲和力。因此，这些抗体有优势的是能够甚至在内体中也能继续结合FcRn，由此最大程度地阻断FcRn对IgG的结合。在一个实施方式中，根据本专利技术公开的抗体或结合片段包含轻链或具有可变区的轻链片段，例如，其包含一个、两个或三个CDR，其独立地选自SEQIDNO:4、SEQIDNO:5或SEQIDNO:7和SEQIDNO:6，具体而言，其中CDRL1为SEQIDNO:4、CDRL2为SEQIDNO:5或SEQIDNO:7，并且CDRL3是SEQIDNO:6。因此，一个实施方式中，CDRL1是SEQIDNO:4并且CDRL2是SEQIDNO:5或SEQIDNO:7，或者CDRL1为SEQIDNO:1并且CDRL3是SEQIDNO:6，或者CDRL2为SEQIDNO:5或SEQIDNO:7并且CDRL3是SEQIDNO:6。在一个实施方式中，根据本专利技术公开的抗体或结合片段包含选自SEQIDNO:1至7的CDR序列，例如其中CDRH1是SEQIDNO:1、CDRH2是SEQIDNO:2、CDRH3是SEQIDNO:3、CDRL1是SEQIDNO:4、CDRL2是SEQIDNO:5或SEQIDNO:7并且CDRL3为SEQIDNO:6。还提供了一种抗体或结合片段，其与本文明确公开的抗体或结合片段结合相同的表位。因此，提供了抗-FcRn抗体或其结合片段，其结合人FcRn的表位，所述表位包含选自人FcRn细胞外结构域(SEQIDNO:48)的残基E115、W131、P132及E133中的一个、两个、三个或<本文档来自技高网...

【技术保护点】
抗‑FcRn抗体或其结合片段，其包含重链或具有可变区的重链片段，其中所述可变区包含三个CDR，其中CDR H1具有SEQ ID NO:1给定的序列，CDR H2具有SEQ ID NO:2给定的序列，并且CDR H3具有SEQ ID NO:3给定的序列。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.11.13 GB 1320066.21.抗-FcRn抗体或其结合片段，其包含重链或具有可变区的重链片段，其中所述可变区
包含三个CDR，其中CDRH1具有SEQIDNO:1给定的序列，CDRH2具有SEQIDNO:2给定的序
列，并且CDRH3具有SEQIDNO:3给定的序列。
2.根据权利要求1的抗-FcRn抗体或其结合片段，其中所述抗体或结合片段进一步包含
轻链或具有包含三个CDR的可变区的轻链片段，其中CDRL1具有SEQIDNO:4给定的序列，
CDRL2具有SEQIDNO:5或SEQIDNO:7给定的序列，并且CDRL3具有SEQIDNO:6给定的
序列。
3.根据权利要求1或权利要求2的抗-FcRn抗体或其结合片段，其具有包含SEQIDNO:
12给定的序列的重链和包含SEQIDNO:8给定的序列的轻链。
4.根据权利要求1或权利要求2的抗-FcRn抗体或其结合片段，其中所述抗体是人源化
的。
5.根据权利要求1或权利要求2的抗-FcRn抗体或其结合片段，其具有包含SEQIDNO:
25给定的序列的重链和包含SEQIDNO:16给定的序列的轻链。
6.根据权利要求1或权利要求2的抗-FcRn抗体或其结合片段，其具有包含SEQIDNO:
59给定的序列的重链和包含SEQIDNO:51给定的序列的轻链。
7.结合人FcRn的抗-FcRn抗体或其结合片段，其包含重链，其中重链的可变结构域包含
与SEQIDNO:25给定的序列具有至少80％同一性或相似性的序列，并且其中轻链的可变结
构域包含与SEQIDNO:16给定的序列具有至少80％同一性或相似性的序列。
8.根据权利要求7的抗-FcRn抗体或其结合片段，其中抗体分子具有SEQIDNO:1给定
的序列作为CDR-H1，SEQIDNO:2给定的序列作为CDR-H2，SEQIDNO:3给定的序列作为
CDR-H3，SEQIDNO:4给定的序列作为CDR-L1，SEQIDNO:5或SEQIDNO:7给定的序列作为
CDR-L2，以及SEQIDNO:6给定的序列作为CDR-L3。
9.根据权利要求1至8中任一项的抗-FcRn抗体或其结合片段，其中所述抗体或结合片
段为scFv、Fv、Fab或Fab’片段。
10.根据权利要求9的抗-FcRn抗体Fab’片段，其具有包含SEQIDNO:33给定的序列的
重链和包含SEQIDNO:20给定的序列的轻链。
11.根据权利要求6的抗-FcRn抗体Fab’片段，其具有包含SEQIDNO:63给定的序列的
重链和包含SEQIDNO:55给定的序列的轻链。
12.根据权利要求1至11中任一项的抗-FcRn抗体或其结合片段，其中所述抗体或结合
片段缀合至多聚物，所述多聚物例如选自淀粉、白蛋白和聚乙二醇。
13.根据权利要求12的抗-FcRn抗体或其结合片段，其中所述多聚物为PEG，例如分子量
范围为5至50kDa。
14.根据权利要求1至8中任一项的抗-FcRn抗体，其中所述抗体为全长抗体。
15.根据权利要求14的抗-FcRn抗体，其中所述全长抗体选自IgG1、IgG4和IgG4P。
16.根据权利要求5、权利要求14或权利要求15的抗-FcRn抗体，其具有包含SEQIDNO:
37、SEQIDNO:39或SEQIDNO:73给定的序列的重链和包含SEQIDNO:20给定的序列的轻
链。
17.根据权利要求1至8中任一项的抗-FcRn抗体或其...

【专利技术属性】
技术研发人员：P·A·阿瑟福尔德，T·A·塞斯卡，H·M·芬尼，L·凯沃尔基安，K·萨卡尔，B·J·史密斯，K·L·泰森，
申请(专利权)人：UCB生物制药私人有限公司，
类型：发明
国别省市：比利时;BE